ACADËMIE
D E
MONTPELLIER
UNIVERSITÉ
DES
SCIENCES
ET
TECHNIQUES
DU
LANGUEDOC
THE S E
présentée à l'Université des Sciences et Techniques du Languedoc
pour obtenir le grade de Docteur de 3ème cycle de
PARASITOLOGIE, PATHOLOGIE ET RELAT,IONSECOPHYSIOLOGIQUES
,
,
" \\
IV.
•
_J
-
-- ~
. •
.
l
- ~
ETUDE DE L'INFESTATION EXPERIMENTALE D'HELIOTHIS ARMIGERA HUBNER, 1808
(LEPIDOPTERE, NOCTUIDAE) PAR NOSEMA MANIERAE N. SP. MICROSPORIDIE
PARASITE DE CHILO ZACCONIUS BLEZENSKI,1970 (LEPIDOPTERE, PYRALIDAE) .
'.~ ~~ ~'t:~·""...~_.C":·
•;
fi
.,
' , ' , < '
:,
....... ',1
... . .~ ~ .. "
"
~,~,
par
,"~
,,"-,0.'
,.. "
Bhen-Sikina TOGUEBAYE
Soutenue en Octobre 1981 devant la Commission d'Examen.
JURY
MM.
L.
EUZET
Président
1
C.
VAGO,Membre de l'Institut
G.
BOUIX
Assesseurs
R.
COUILLOUD
ATELIER
DUPLICATION
-
U.S.T.L. -

---

LISTE
DES
PROFESSEURS
Président:
L. THALER
Vices-Présidents: MM. CORRIU, PIETRASANTA et NOUAZE.
Doyens Honoraires à l'Université des Sciences et Techniques du Languedoc
1
P. MATHIAS
1
B. CHARLES
A. CASADEVALL
Présidents Honoraires :
P. DUMONTET
J. ROUZAUD
Professeurs Honoraires de l'Université des Sciences et Techniques du
Languedoc :
R. JACQUES
J. SALVINIEN
G. COUCHET
M. CASTERAS
M. MOUSSERON
P. DEMANGEON
E. TURRIERE
P. CHATELAIN
J.P. ROIG
C. CAUQUIL
A.M. VERGNOUX
G. DENIZOT
E. KARANE
J. GRANIER
J.M. MORETTI
Secrétaire ~énéral : E. SIAU
Professeurs titulaires :
M. J. AVIAS .•..•..•.•....•.••...•••.....•... Géologie
M. J.J. MOREAU ....••......•...•..•.....•..•. Mécanique rationnelle
M. B. CHARLES .•..•.•.........•.•.•....•...•. Mathématiques Pures
M. R. JOUTY .••..••..••.•.•..•.•...•..•...... Physique
M. R. LEGENDRE •••..••.•........•...........• Zoologie
M. 1. ASSENMACHER ••......•....••.•...••....• Phys io logie Animale
M. Ch. ROUMIEU •...•.••.••.••..•....••..••.•• Analyse supérieure
M. J. ROBIN ..••.•.•••....•..•....•.......... Physique
M. B. PISTOULET ..••.•.••....•....•....•..... Physique
M. A. POTIER •.•.•••.••.••...••.•....•..•.... Chimie Minérale
M. R. LAPaNT ..•..••.•.............•.••••.... Phys ique
M. R. JACQUIER ..•..••.......•.•..•.......... Chimie
H. J. FALGUElRETTES ..•.•••.................. Minéralogie
M. J. REGNIER .•.•.•......................... Chimie
Mme J. CHARLES .....••••..•.................. Mathématiques
M. J. ROUZAUD ........•...................... Chimie
M. P. CAILLON ...........•.................•. Phys ique
M. H. CHRISTOL (E.N.S.C.M.)
Chimie

---

- I I -
M. H. ANDRILLAT .••••••••.•••••••..•.•••••• As tronomie
Mme G. VERNET •..••••••••••••••••.•••.••••. Biologie Animale
M. L. CECCHI •.•..•••.•••••.•••...•••••••.. Physique
M. L. EUZET •••..•••.•••••••••••.•••.•••.•• Zoologie
M. C. DELOUPY ••••••••••••••••••••••••••••• Phys ique
M. M. MATTAUER •••.•••••••••••••••••••.•••• Géologie
M. M. SAVELLI .••••••••••••••••••••••.••••• Physique
M. R. MARTY ••••••••••••••••••••.••••..•••. Psychophysiologie
M. A. BONNET •••••••••.•••••••••••••••.••.• Bo tanique
M. G. LM1ATY •••••••••••.•••••••••••••••••• Chimie
Mme S. ROBIN •••••••••••••••••••••••••••••• Physique
M. R. CORRIU ••••••••••••.••••••••.•••••••. Chimie
Mme N. PARIS •••••••••••••••••.•.••••.••••. Physiologie Végétale
M. J. ZARZYCKI .••••••.••••••••••.••••••••• Sciences des Matériaux
M. H. MAURIN •••••••••••••••••••••.••.••••• Chimie Minérale
M. L. THALER ••••••••••••••••••••••.•••.••• Paléontologie
M. S. GRO~m •••••••••••••••••••••••••.••.•• Chimie Physique
M. J. V. ZANCHETTA ••••••••••••••••••••••••• Chimie Générale
M. P. SABATIER •••••••••••••••••••••••••••• Mathématiques
M. F. SCHUE ••••••••••••••••••••••••••••••• Chimie Organique
M. E. GROUBERT •••••••••••••••••.•••••••••• Physique
M. Ch CASTAING •••••••••••••••••••••••••••• Mathématiques
M. M. ROUZEYRE •••••••••••••••••••••••••••• Physi que
M. F. PROUST •.•••••••••••••••••••••••••••• Géologie
M. J. PARIS ••••••••••••••.•.•••••••••••••• Bio logie Animale
M. A. GROTHENDIECK •••••••••••••••••••••••• Mathématiques
M. C. DURANTE ••••••••••••••••••••••••••••• Physique
M. G. BOUGNOT •••••••••••••••••••••••••.••• Physique
M. G. LECOY •••.••••••••••••.•.••••••.••••• E.E .A.
M. R. GAUFRES •••••••••••••••••••••••.••••• Chimie
M. J .D. BAYLE
Physiologie Animale
M. J. L. IMBACH •••••••••••••••••••••••••••• Chimie
M. J .P. FILLARD ••••••••••••••••••••••••••• E.E.A.
M. N. ROBY •••••••••••••••••••••••••••••••• Mathématiques
M. Ph. JEANTEUR ••••••••••••••••••••••••••• Biochimie
M. M. AMANIEU (I.S.I.)
•••••••••••••••••••• Hydrologie et Mariculture
M. A. COMMEYRAS ••••••••••••••••••••••••••• Chimie Organique
Professeurs sans Chaire :
M. G. TOURNE ••••••••••••••••••••••.••••••• Chimi e
M. J. REMY •••.•••.••••••••..••••.••.•••••. Géologie
Mme H. GUASTALLA ..•••••••••.••••••••.••••• Biologie Physico-chimique
M. R. LENEL ••.••.••••••.•••••••••••••••••• Biologie Animale
M. A. BASSOMPIERRE ••••••••••••.•••••••..•. Physique
M. R. JONARD •..•••••••••••.•••••.•..••.••• Botanique
M. R. CANO (1. U. T.)
Mesures Physiques
M. P. MOLINO •.••...•••••••••••.••••••••••• Mathématiques
M. J. LEGRAND ••••.•.•••••••••••••••.••••.• Physiologie Animale
M. J. D'AUZAC •.......................•.... Physiologie Végétale
M. G. BOUIX •••••••••••••••..••••••.•.•••.. Zoo logie
M. M. DENIZOT •..••.•••••...•...•••....••.• Biologie Végétale
M. B. BRUN •..••.•••••••••.•.•••.•••.•••••• Chimie Physique
M. L. GlRAL ••••..••.•••••.•••.•••••...•••• Chimie Organique
M. J.P. QUIGNARD .•••••••...•••.••.•••..•.• Zoologie
M. Ph. VIALLEFONT •••..•••••••••.•••.•..••• Chimie
M. A. RAIBAUT
Zoo 10 gie
M. P. VISTE ••.••••.••...•.•.•.•.••..•..••• Chimie Minérale
M. J. GRIMAUD (E.N.S.C.M.)
••••.•.....••... Chimie

---

- III -
M. J. GARCIA (1. U. T. NIMES)
•••••.•••••.••••• Génie Mécanique
M. P. LOUIS ••••••.•••.•••••••••••••••••••••• Géophysique Appliquée
M. Cl. BOCQUILLON •••••••••••••••••.••••••••• Hydrologie
M. A. DONNAD lEU ••••••••••••.•.••••••••••.•.• Physique
M. M. LEFRANC ••••••••••••••••••••••••••••••• Mathématiques
M. G. MASCHERPA ••••••••••••••••••••••••••••• Chimie
M. C. GOUT ...•....•••••.•••••••••.•.•..•••.• Physique
M. J.P. TRILLES (I.U.T.) •••••••••••••••••••• Biologie Appliquée
M. F. HALLE ..•..••••.....•••.•.•...•....•.•. Biologie Végétale
M. G. BORDURE (1. U•T • )
••••••••••••••.••••••• Génie électrique
M. J. P. NOUGUIER •••••••••••••••••••••••••••• Electronique
M. M. GODRON ••••••••••••••••••••••.•.••••••• Ecologie Végétale
M. L• LAS SABATERE ( 1. U• T• )
•••••••••••••••••• E.E.A.
M. J. LAPAS SET (I.U.T.)
•••.••••••••••••.•••• Physique - Mesure Physique
M. M. AVEROUS (I.U.T.)
•••••••.•••.•••••••••• Physique - Génie électrique
M• G• MA:URY •••••••••••••••••• ••••••••••••••• Chimie
M. G. LO'UP lAS . . . . • . . • • . . . . . . . • . . . . . . . . . • . • . • Mathématiques
M. R. BEN AIM (1. S. l • )
•••••••••••••••••••••• Génie chimique et Traitement
des eaux
M. J. CROUZET (1. S • l • )
.. Biochimie Appliquée
M. L. COT (E.N.S.C.M.) •••••••••••••••••••••• Chimie
M. J. C. CHEFTEL (1. S. 1. )
•••••••••••••••••••• Biochimie Appliquée à
l'alimentation
M. P. JOUANNA (I.U.T.)
Génie Civil
M. H. MATHIEU (I.S.I.)
E.E.A.
Professeurs Associés :
M. M. MICALI •••.••••••••••••••••••••.•••.••• Mathématiques
M. H. BILGER ••••••.•••••••.•••••••.••••••.•. Physique
M. G. AUBERSON •••••••••••••••••••••••••••••• Mathématiques
Professeurs associés d'Université:
M. 1. DAUZIER •••••••••••••••••••••••••••.••• Physiologie Animale
M.
GALZY. • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • . • • • • • • . •• Biochimie
M. C. MAURIN •••••••••••••••••••.•••.•••••.•• Bio logie Animale
M. R. SENOUILLET ••••••.••••••••••••••••••••• Economie et Gestion
M. E. SERVAT •••••••••••••••••••.•••.••.••••• Géologie
M. C. VAGO ••.••••••••••••••••••••••••••••••• Biologie Animale
Mme M. VAN CAMPO •••.•••.••••••••••.•.••••.•• Biologie Végétale
M. E. VERDIER ••••••••••••••••.•••••..••.•••• Chimie
M. F. WINTERNITZ ••••••••••••••••.•••.•...••• Chimie
Maîtres de Conférences :
M. R. HAKIM .•.••••..••••••.••••••••.•.•.••.• Mathématiques
M. F. LAPSCHER •••••••••••..•••••••..•••.•.•• Mathématiques
Mle M. LEVY (1. U. T.)
Chimie
M. J. LAGARRIGUE (I.U.T.)
.••••..••..•••••.•• Biologie Appliquée
M. Cl. DROGUE (1.S.1.)
•••.•••••..••••••••..• Hydrogéologie
M. P. GENESTE (E.N.S.C.M.)
•••••.••.••.•••.•. Chimie Physique Appliquée
M. Y. PIETRASANTA (E.N.S.C.M.)
•.•••..••.•••• Chimie Appliquée
M. B. LEMAIRE (1.S.1.)
.••.•••.••••••••..•••. Mathématiques Appliquées
Informatique
M. M. VALADIER .••.•••••..••......•.••.••.•.• Mathématiques
M. J.L. ROBERT (I.U.T. Nîmes)
.•.•.•.••.•.... Génie électrique

---

- IV -
M. O. MAISONNEUVE ••••••••••••••••.•••••••••• Mécanique
M. R. BRUNEL •••••••••••••••••••••••••••••••• Physique
M. M. CADENE •••••••••.•••••••••••••••••••••• Phys ique
M. P. DELORS •••••••••••••••••••••••••••••••• Phys ique
M. A. PAVIA ••.•••••••••••••••••••••••••••••• Chimie
M. J .M. BESSIERE •••••••••••••••••••••••••••• Chimie
M. J.P. BARD •••••••••••••••••••••••••••••••• Géologie
M. P. BESANCON (LS.L)
••••••••••••••••••••• Physiologie de la nutrition
appliquée à l'alimentation
M. Y. NOUAZE •••••••••••••••••••••••••••••••• Mathématiques
M. J. PETRISSANS •••••••••••••••••••••••••••• Chimie
M. J. Y. GAL
Chimie analytique appliquée
M. C. BENOIT ••••••••••••••••••••••.••••••••• Phys ique
M. H. GIBERT (LS.I.)
Génie Alimentaire
M. A. LIEGEOIS (LS.L)
Automatique
M. B. TARODO DE LA FUENTE (I.S.I.) ••••••••••• Biochimie appliquée et Techniques
des Matières alimentaires.
M. Y. ESCOUFIER ••••••••••••••••••••••••••••• Informatique
M. A. SANS •••••••••••••••••••••••••••••••••• Psychophysiologie
M. G. DURA.ND . • • . . . . . . . . . . . . . . . • . . . • • . . • . . . . • Chimie
M. B. FILLIATRE (I.S.I.)
•••••••••••••••••••• Informatique et Gestion
M. J.J. MACHEIX ••••••••••••••••••••••••••••• Physiologie Végétale
M. P. HINZEL IN •••••••.••••••••••••.•.••••••• Génie Civi l
M. Cl. BOKSENBAUM ••••••••••••••••••••••••••• Informatique
M. G. CAMBON (I. S. l • )
••••••••••••••••••••••. E. E •A.
M. J. FERRIE (1. S. 1.)
Informatique
M. E. AKUTOWICZ ••••••••••••••••••••••••••••• Ma théma tiques
M. Ch. HEBANT ••••••••••••••••••••••••••••••• Paléobotanique
M. J. LANCELOT •••••••••••••••••••••••••••••• Géophys ique
M. D. AUVERGNE (I • S • l • )
••••••••••••••••••••• E. E •A.
M. B. LEBLEU
Biochimie
M. C. JOUANIN ••••••••••••••••••••••.•••.•... Phys ique
M. M. RIBES ••••••••••••••••••••••••••••••••• Chimie
M. J.P. ROQUE
Chimie
M. J. L. AUBAGNAC •••••••••••••••••••••••••••• Chimie
M. Cl. ALIBERT •••••••••••••••••••••••••••••• E .E.A.
MIe H. ASTIER ••••••••••••••••••••.•••••••••• Physiologie Animale
M. F. ARTHAUD ..•....••...•.•......•......•.. Géologie
M. G. ROYO •••••••••••••••••••••••••••••••••• Chimie Organique - Mesures
Physiques
M. Ph. FOUCOU (LU. T.)
Sciences économiques

---

AVANT
PROPOS
Ce tnavail a été ~é~é au Laboratoire d'Ichthyologie et de
Parasitologie Générale de l'Université des Sciences et Techniques du Langue-
doc avec. .ta. c.oUa.bo!UU:ion. du Labo~oLtu de t 1 I n6.:Utut de Rec.hMc.hu de
Coton. et du Te:dil.u Exotiquu (I. R. C. T. J et de t 1 In6ü.tut de Rec.hMc.he-6
AgMn.oml.quU T~op-i.c.aiu et du CuUMU V-i.v~èJt.u (1. R.A. T.), du G~oupe.merr.t
d' Etudu et de Rec.hMc.hu po M te Vévetoppe.merr.t de t 1AgM n.oml.e TM p-i.c.ate
(G. E. R. V.A. T. J,
a Morr.tpetliM [F~c.eJ .
Avarr.t d'abo~de~ t'expo~é de mon. ~ujet de ~ec.hMc.he, je vou~
~e.mMUM MOn6-i.eM te P~o6u~eM G. BOUIX quJ.. a cU.JUgé c.e tnavail ; U a ~
tOM tu moyen6 ma.:té~~ du LaboMtoLte a ma ~po~-i.ü.on. et a pW beauc.oup
de Mn. te.mp~ poM t'ac.c.ompw~e.men.t de ma thùe. Sa c.on.6-i.anc.e pMmanerr.te, Mn.
cUde et .ta. ~-i.mpUUté de n.o~ ~ppow orr.t été pOM mo-i. d' un. g~d ~ec.ouJ[,6 mo-
~ da.n6 tu momew di.6McJ.1.e-6. SU ~é6teuon6 et ~on. ouv~Me d'upill
m' orr.t p~ d' ac.qué~ ptM-i.euJt6 tec.hrr.-i.quu d'-i.n.vutigaû.On6. QU' U me ~oil
p~ de tuJ.. ~en.cilte un g~n.d hommage.
J e ~e.mMc.-i.e égaie.merr.t
MOn6-i.eM te PM6u~eM L. EUZET, P~~-i.derr.t du JMY, dorr.t.ta. ~en.­
c.o~e, au Tc.had, avec. te ~ue tc.hadi.en. de t'En6ugn.e.merr.t ~upé~eM et
te Voyen. de ta Fac.uUé du Suen.c.u du Tc.had, a pe~ ta po~uJ..te de mu
étude-6 en. F~c.e .
MOn6-i.eM te PM6u~eM c. VAGO, memb~e de t'In6ü.tut, quJ.. m'a
6ad te uù g~n.d hon.n.eM de jugM c.e tnavail.
MOn6-i.eM R. COUILLOUD, V~ec.teM du Labo~o~e de N~on. et
d'Etevage d~ In6ec.t~ de t'I.R.C.T. [G.E.R.V.A.T. - MOrr.tpetliM) qui m'a
6o~ du matwet, d~ ht6o~aü.on6 et du doc.umerr.U c.on.c.eltnarr.t t' Uevage
du In6ec.tu. J' upè~e c.orr.thtuM a bén.éMc.-i.e~ de Mn. cUde ~-i. app~éuabte. Je
te ~e.mMc.-i.e égaiemerr.t de m' avo~ ac.c.Mdé ~a c.on.Man.c.e en. ac.c.eptarr.t de jugM
c.e..:t:te thù e .

---

MU-6-ie.UJL6 te.-6 PJt06u-6e.UJL6 A. RAIBAUT et J. -P. QUIGNARD on.t
toujOUJL6 mon.bté la. ptuo glta.nde. pltéoc.c.u.pa.,üon pou.Jt mu be.-6o-in-6 rm:tWe.t-6.
Qu'ili :tJtOuve.n.t -iu t ' e.xpltu-6-ion de. ma pM60nde. 1te.c.onna-iManc.e..
Made.mo-i-6e.Ue. J.-F. MANIER, Ma..UJte. de. Re.c.he.Jtc.he. au. C.N.R.S.,
Mudame.-6 F. COSTE-MATHIEZ et V. ROUSSET, MU-6-ie.UJL6 J. MAURAND,~, C. LOUBES
et C. GASC, MlÛtItu AM-i-6:ta.nt& n' on.t jama-i-6 hé-6ilé à. me. pltocügue.Jt C.OYL6e.il-6
et e.nc.ou.Jtage.me.n.t6 et c.e.u ave.c. un max-imum de. ge.n.tillU-6 e. et de. -6pon..tanWé.
Je. tu 1te.me.Jtue. :to uo c.hate.u.Jte.uo e.me.n..t.
Ce. .tJtavail n' au.Jtail jama-i-6 c.onnu -6011. :te.Jtme. -6aYL6 t' cUde. de.-6
Te.c.Wue.YL6 du. LaboJta..to.ur.e. d' I c.h.thyotog-ie. et de. PaJta.-6-i:totog-ie. GénéJta.te. :
Madame. J. BOYER a me.né à. b-ie.n et ave.c. be.auc.oup de. ptLÜe.nc.e. la. paJLÜe. da.c..ty-
to glta.ph-iq ue. de. c.e. mérro.ur.e. ; Mo YL6 -ie.u.Jt J. BARRAL a ht6 taUé no.tJte. ht6 e.e..taJr.,{,wn
et a e. 66e.c..tu.é te. .tJtavail photo gltaph-ique. ; Madame. S. OUSTAU m' a ~é à. ta
mùJto~c.oyU.e. Ue.c.:tJton-ique. et MOYL6-ie.u.Jt L. CANAGUIER m'a appoJt.té -6011. cUde. pJta.ti-
que.. Qu'il me. -6oil pe.Jtm-i-6 de. te.u.Jt e.xplt-ime.1t ma v-ive. gJta..tilude..
Je. dé~-ilte. auo-6-i adJtU-6e.Jt mu 1te.me.Jtue.me.nt& à. MOYL6-ie.u.Jt M. GIRET,
Che.Jtc.he.u.Jt au. LaboJta..to.ur.e. de. Nu..tJtil-ion et d'Ele.vage. du In-6e.c..te.-6 de. t'I.R.C.T.
(G.E.R.V.A.T. - Mon..tpe.tUe.Jt], MoYL6-ie.u.Jt D. BORDAT e.:t Madame. J. COQUARD,
c.he.Jtc.he.u.Jt-6 au LaboJta.:to-ilte. #e. Vé6e.ru,e. du Cu.ltu.Jte.-6 de. t'I.R.A.T. (G.E.R.V.A.T.-
Mon..tpe.tUe.Jt! CÜ!t-igé paJt J. BRENIERE, qu.-i m'on..t 60u./tM du -iYL6e.c..te.-6 -ind-i-6pe.n-
~abtu pou.Jt mon .tJtavail.
Ii m' u:t .tJtè.6 agltéabte. de. lte.me.Jtue.Jt Mo YL6-ie.u.Jt E. BIRGI, MaLtlte.-
AM-i-6:tant à. t'Un-ive.Jt-6ilé de. Yaoundé (CaméltOun! qu.-i, m'a.yant plté-6e.n..té à. Mon-
-6-ie.u.Jt te. PM 6e.M e.u.Jt G. BOUIX, m'a. pe.Jtm.i.-6 de. 6a.-iJte. de. ta Re.c.he.Jtc.he..
En Mn, ma pe.YL6 ée. aU e.c..tue.uo e. -iJta. VeJ!..6 me.-6 paJtenU, me.-6 6ltélte.-6
et me.-6 -6 0e.UJL6 , ma 6emme. et :touo mU a.m.i.-6, deJr..YUe.M -6u.Jt la. W:te. ma-i-6 non
da.n-6 mo 11. U pltil.
00000

---

SOMMAIRE
INTRODUCTION
1
PREMIERE PARTIE: GENERALITES ET APERCU HISTORIQUE
13
Chapitre ILes Microsporidies des Lépidoptères
15
l - Historique
15
II - Les NOJ.lema. des Lépidoptères
17
a) Cycle de développement des No~ema.
17
b) Caractères distinctifs des différentes espèces de
No~ema. des Lépidoptères..........................
17
c) Action des No~ema. sur leurs hôtes Lépidoptères..
19
III - La Microsporidie de Chifo Za.~~o~U6
23
Chapitre II:
Problèmes économiques liés aux H~o~ et lutte con-
tre ces derniers ........................•...............
25
l - Problèmes économiques liés ~ux Héiiot~
.
25
II - Lutte contre les H~ot~
.
27
1) La lutte chimique ..••.
,
27
,
~.'• • ~,.:.r'- .'
.
2) La lutte biologique .~,.•...........•.• "~
.
28
al Utilisation d'ento~phages..••• ; ...•.....•..
28
bl Utilisation d'entomÔ~~ho~~~ ...••.•..•.•.
28
cl La lutte autocide
':•...••.••..•.•.....
29
dl La lutte culturale ...•................•....
30
3) La lutte combinée .............•...••.••.........
30
III - Conclusions
31
DEUXIEME PARTIE : No~ema. ma.n1ekae n. ~p. PARASITE DE Chifo za.~~o~U6
Blez., 1970 ET SON HOTE EXPERIMENTAL, Heliotf~ anm~eka.
Hüb. 1 1808. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
33
Chapitre l
L'hôte expérimental : H~ot~ aAmigeka. Hübner, 1808.
35
l - Elevage d'He~ot~ ~geka
35
li Composition et préparation du milieu nutritif
,
35
21 Technique d'élevage •............................
37
a) Elevage des adultes et obtention des oeufs.
37
b) Incubation des oeufs.
39
c) Elevage des larves
39
II - Description des différents stades de développement.
41
11 Les oeufs
42

---

2/ Les chenilles .••.•.•..••.•.•••••••.••••••.•••
43
3/ Les chrysalides •............•..••....•....•..
47
4/ Les adultes ••......•...•.•.....•..•..........
49
III - Biologie des H. ~g~a
49
IV - Position systématique .........•....•....•...•...
51
Chapitre II : La Microsporidie parasite : No~ema mani~e n. ~p .•
55
l - Etude du cycle de développement (observations en
microscopie photonique)
.•...•.••.•••...•.•.•....•
55
1/ Méthodologie ••.•......••.....•.•....•.......•
55
2/ Les différents stades du cycle •......•.•••..•
56
a) La mérogonie et les mérontes ••...•.•..•.
57
b) La sporogonie. les sporontes et les sporo-
blastes. •• . • •. . . • . . .• • .• • • . . . •• . . . •. •• •• .
57
c) Les spores .••....•..•..•.....•••••.•••.•
59
II - Etude des ultrastructures des différents stades du
cycle de développement ......•.•..•.....•••....... 59
1/ Méthodologie
59
2/ Observations
61
a) Les mérontes et la mérogonie ..........•.. 61
b) Les sporontes et la sporogonie ....••..•.. 63
c) Les sporoblastes .•..................•.... 65
d) La sporogenèse et les spores .......•..••. 67
III - Discussion et position systématique ......•..•... 67
IV - Variation de la taille des spores de No~ema manie-
~e en fonction de ses hôtes et problème de sa
spécificité .............•...•...............•.... 75
1/ Variation de la taille des spores ........•.... 75
a) Méthodes d'interprétation ........••.....• 75
b) Résul tats obtenus •...........•........... 76
c) Conclusions ..•...........•••.......•..... 78
2/ Problème de la spécificité des No~ema de Lépi-
doptères •........•.•.......................... 79
a) Résultats obtenus ..•..................... 79
b) Conclusions ...•.....•....•......•........ 80
V - Etude du pouvoir de conservation de la virulence
de la Microsporidie de ch. zaeeo~U6 vis à vis des
larves d' H. ~g~a
81
1/ Conservation sous forme de suspension dans l'
eau distillée ..•........................•....• 81
2/ Conservation dans les cadavres ...........••... 82

---

3/ Retransmission de la Microsporidie ..........•....
84
4/ Conclusion et discussion .•...•...................
84
TROISIEME PARTIE : INFESTATIONS EXPERIMENTALES ET ACTIONS PATHOGENES
DE NOSEMA MANIERAE SUR H. ARMIGERA
89
Chapitre 1
Relations hôte-Parasite................................
91
l - Méthodologie ..............•.•........••...•..•••..•..
91
1) Méthodes de purification, de comptage et de conser-
vation des spores
.
91
2) Méthodes d'infestation expérimentale, .......•..••.
92
3) Calcul de la mortalité
93
4) Etude histologique ..•..........•.•........•......
93
5) Analyse enzymatique ........••...•••.....•...•....
94
II - Etude quantitative .••..•.•...............••..•..••.•
95
A) Recherche d'une action pathogène de trois Microspo-
ridies vis à vis d' H. a.Jl.m-i..geJta. •••••••••••••••••••
95
1/ Essais par ingestion ...............••.......
97
2/ Essais par inoculation
. 101
3/ Conclusions ..........•.......•.....•.•...... 105
B/ Influcence de la dose des spores et du stade lar-
vaire sur le développement de la microsporidiose
à No,6 ema. man..i.eJta.e •••••••••••••••••••••••••••••••• 106
1/ Action de la dose des spores sur le 2è stade
la.rvaire
107
a - mortalité larvaire ...............•...•. 107
b - évolution de la mortalité larvaire ..... 109
c - action des différentes doses de spores
ingérées sur les mues larvaires ..•..... 111
d - action sur la nymphse et la mue imagina-
le de différentes doses de spores
114
2/ Action de la dose des spores sur les larves
de 3è stade ......•..••..•..•........•....... 115
a - Mortal~té totale observée.c~ez les 1
... 115
3
b - Evolutl.on de cette mortall.te ........•..• 117
c - Action des différentes doses des spores
sur les mueS larvaires .......•.......... 119
d - Action des différentes doses de spores
sur la nymphose et la mue imaginale chez
les 1
122
3
3/ Action de la dose des spores sur le 4è stàde
larvaire
123
- Essai par ingestion libre
123
a - mortalité larvaire
125
b - évolution de la mortalité larvaire
125

---

• Infestation par injection................
129
a - mortalité larvaire
130
b - évolution de la mortalité
131
c - action des différentes doses de spores'
inoculées sur la nymphoses des L .....
131
4
41 Action des différentes doses de spores sur
les L
133
5
- Contamination par voie orale
133
a - mortalité larvaire
133
b - évolution de la mortalité chez les L5
c - action des différentes doses de spores
ingérées sur la nymphose et la mue ima-
ginale ...........•..........•...•....
134
- Contamination par injection •............•.
136
a - mortalité larvaire .....•.............
137
b - évolution de la mortalité
137
c - action des différentes doses de spores
inoculées sur la nymphose et la mue
imaginale ..........•.•...••..........
139
51 Action de la dose des spores sur les larves de
dernier stade •...•......••..............•...
140
a) Mortalité larvaire ...•..........•........
140
b) Evolution de cette mortalité .....•..•....
140
c) Action des différentes sortes de spores
utilisées sur la nymphose et la mue imagi-
nale .....•........•......................
142
61 Conclusions et discussions •.......•.•.......
143
III - Etude biométrique
148
1) Action de la microsporidiose sur la croissance, le
poids et la durée de vie des larves d'Ho ~g~.
148
al Action sur la croissance et le poids des lar-
ves •..........•...•.•....•..•...............
148
bl Action sur la durée de vie larvaire
151
2) Action de N. mani~e sur le moment de la nymphose
et sur le poids des nymphes ...............•......
152
3) Conclusion et discussion .............•...•.......
157
IV - Etude histopathologique .................•........•..
159
A) Symptomatologie
159
B) Histologie en microscopie photonique
159
II Histopathologie liée à la microsporidiose
161
a) Le tube digestif
161
b) Les tubes de Malpighi
161
c) Les muscles striés ............•..........
161
d) Les cellules péritrachéales
163
e) Le tissu adipeux
163
f) L'hypoderme..............................
163

---

g) Les glandes salivaires ......•..•.....
163
h) Les gonades
163
i) Le cerveau
164
2/ Evolution de la microsporidiose
169
a) Infestation par voie orale
169
b) Infestation par injection
171
C) Microscopie électronique
172
D) Conclusions
172
v - Etude biochimique: analyse enzymatique
177
1/ Introduction
177
2/ Résultats....................................
180
3/ Conclusion
185
Chapitre II : Etude d'une microsporidiose double chez H. anmige~
N. man,.i.e~e et NOJ.Jema. J.Jp., parasite de Spodopte~ 1.J.;t;to-
Jr.iJ.UA .••••.•••••..•.••••••••..••••••..•.....•..••••.•
187
1/ Action de NoJ.Jema. J.Jp. de S. lltto~ sur les larves
de différents stades et les adultes d'Ho anmig~
190
1/ Mortalité obtenue
190
a) essais sur le 2è stade
190
b) essais sur les larves de 4è stade
193
c) essais sur les larves de dernier stade .
196
2/ Action de NOJ.Jema. J.Jp. de S. 1.J.;t;toJr.iJ.UA sur la
~production d'Ho anmig~
196
a) Méthodologie
196
b) Résultats
199
3/ Histopathologie .............•...............
207
11/ Action de NoJ.Jema. man,.i.~e et de NoJ.Jema. J.Jp. de S.
~Jr.iJ.UA transmise simultanément chez les lar-
ves d'Ho anmige~
209
1) Mortalité totale obtenue
209
2) Histopathologie
209
3) Recherche sur la conservation du pouvoir patbo-
gène de l'association des deux Microsporidies
215
4) Conclusion et discussion....................
216
Chapitre III : Les antimicrosporidiens et leurs effets sur NoJ.Jema.
~~e chez He~~ anmig~
.
217
I/ Méthodologie
217
11/ Essais avec la fumagilline
.
218
a) Mortali té larvaire
..
220
b) Mortalité nymphale
.
220
c) Influence de la fumagilline sur la repro-
duc tion
"
.
220

---

111/ Essais avec le Benomyl ....•.•...•.•.•.. ..•..•
222
a) Mortalité larvaire .••.......•...•••..•••••
222
b) Mortalité nymphale
.....•.....•..•
222
c) Influence du Benomyl et de N. m~enae sur
la re produc t ion •....•..•••.••.••.•.••••..•
222
IV/ Discussion et conclusions •.•••..•.••.•••.•••••
226
RESUME ET CONCLUSIONS GENERALES
229
BIBLIOGRAPHIE
237
ANNEXES
.
I à XX
-00000-

---

INTRODUCTION

---

- 3 -
INTRODUCTION
Il Y a plusieurs années, l'emploi des pesticides contre les Insec-
tes
déprédateurs, a connu une large extension. L'utilisation des insecti-
cides de synthèse est à la base d'un système de lutte assez avantageux, le
plus souvent facile à appliquer et permettant d'obtenir des résultats ra-
pides dans la plupart des cas. Corollairement à la généralisation de la
lutte chimique intense, des difficultés, voire des insuccès, sont apparus
sur différentes cultures en divers pays. Parmi les conséquences fâcheuses
enregistrées du fait de l'emploi des pesticides, il y a :
- les actions néfastes sur la faune auxilliaire
- l'effet favorisant qu'ils peuvent avoir sur la multiplication de cer-
tains ravageurs par action directe ou indirecte, consécutive à des modifica-
tions physiologiques exercées sur les plantes ;
- l'amplification du phénomène de résistance des Insectes,
- la contamination ou la pollution du milieu environnant.
Cette situation a conduit à une impasse économique pour plusieurs
productions végétales. Il était alors nécessaire de reconsidérer les moda-
lités de lutte. Ainsi est né le concept de "lutte intégrée" qui se propose
de combiner plusieurs modalités : parmi elles, la lutte biologique par uti-
lisation d'entomophages et de germes pathogènes.
Les recherches sur la pathologie des Insectes ont alors particu-
lièrement retenu l'attention des chercheurs et quatre groupes de micro-or-
ganismes pathogènes sont à l'heure actuelle étudiés en vue d'essais de trai-
tement microbiologique.

---

- 4 -
1 - LES
CHA MP l G NON S
Plusieurs champignons ont été étudiés et il ressort de ces
études que certains de ces parasites sont susceptibles de jouer un rôle
dans la dynamique des populations de leur hôte.
- Beauvekia b~~~ana parasite beaucoup d'Insectes. Cette espèce a été
utilisée en Chine et en URSS contre les Insectes nuisibles aux vergers et
aux forêts.
- Beauvekia tenetia détermine chez Melolhonta melolhonta la "muscar-
dine blë>.nche" qui entraîne généralement la mort des vers à soie.
- Plusieurs autres Champignons appartenant aux germes Coelomomyc~,
La.gerUdium. En-tomophtholta et CuUunomyc~ sont de potentiels éléments
de contrôle des populations de Moustiques (U.S. Département of Agriculture,
1978) .
II - LES BAC TER lES
Les premiers entomopathogènes à être approuvés pour la lutte
biologique sont les Bactéries.
- Bac.i.Uu6 popilU.aedétermine chez les Melolontha melolon.tha la "ma-
ladie laiteuse". Cette Bactérie a été utilisée avec succès aux U.S.A. en
1940 contre le hanneton japonais, Pop~a japorUca par traitement des
champs infestés par les larves (U.S. Département of Agriculture, 1978).
- Ba~ thuking~en6~ est extrêmement pathogène aux Lépidoptères.
Actuellement, dans beaucoup de pays, cette espèce est utilisée sous forme
de biopréparation pour lutter contre les Insectes
déprédateurs. Ainsi,
les spores dé B. thuking~en6~ ont été utilisées en champ aux Antilles
contre Spodoptelta 6ItUg~peltda. Une grande efficacité a été constatée (DEL-
PLANQUE et GRUNER, 1975).
- Aux U.S.A., une autre Bactérie, BaUllU6 ~phae~cU6 est étudiée en
vue de traitement microbiologique contre les moustiques (U.S. Department
of Agricul ture, 19 78) .

---

- 5 -
III - LES
V 1 RUS
Le troisième groupe de germes étudiés en vue de leur utilisa-
tion dans la lutte contre les Insectes déprédateurs sont les Virus de la
polyédrose nucléaire, de la granulose, de la polyédrose cytoplasmique, de
l'entomopoxvirose, de la virose
irisante, de la densonucléose et des
picornavirose. Des essais au laboratoire ont montré que ces virus sont
susceptibles de jouer un rôle dans la dynamique des populations de cer-
tains Insectes. Par exemple:
- En Egypte, les virus des polyédroses nucléaires (Baeutov~l ont.
été utilisé dans des champs de coton, de patates douces, et de maïs contre
les larves de Spodop~~ titto~~. Les essais ont abouti à la dispari-
tion des larves de 2è et de 3è stade (ABUL NASR, 1959).
- En Colombie une maladie virale de type densonucléose a été décrite
chez le Lépidoptère Limacodidae, S~b~ne 6Uôea ravageur de palmiers. Les
animaux atteints cessent de s'alimenter et meurent (MEYNADIER et al., 1977).
- Une polyédrose nucléaire chez Gatie~a metlonetla a été étudiée par
ODIER, 1974 ; cette maladie entraîne la mort des larves de G. metlonella
dès le 5è ou 7è jour après l'infestation.
IV - L-E S Mie ROS P 0 RIO 1 E S
L'utilisation des Microsporidies dans la lutte microbiologique
a retenu, il y a fort longtemps, l'attention des chercheurs car ces para-
sites ont été remarqués par les dégats sévères qu'ils causent sur les In-
sectes dans les conditions naturelles et en élevage.
Dans la nature, les Microsporidies peuvent parasiter une partie
importante des populations d'Insectes :
- No~ema ~p. parasite les oeufs, les larves, les chrysalides et les
adultes de Malaeo~oma am~eanum. Le pourcentage de parasitisme peut at-
teindre 92 % chez les adultes (NORD IN , 1975).
- No~ema e~poeap~ae infeste les tubes de Malpighi, le tube digestif
et les glandes à soie de No~oeetlia uddmanniana (Lépid., Tortricidae). En
1969, le parasitisme a atteint, chez les larves, un taux de 25 %. Ce para-
site participe à la mort de cet Insecte (LIPA, 1977 b).

---

- 6 -
- Plei6topho~ oneope~e n'a cessé de progresser chez Oneope~ albo-
guttata en Australie: de 1971 à 1972 le taux de parasitisme était de 14 %
chez les larves et 22 % chez les adultes, de 1972 à 1973 le taux était de
61 % chez les larves et 50 % chez les adultes; de 1973 à 1974, 100 % des
adultes ont été atteints et 39 % des larves ont été touchées. La mortalité
enregistrée a été importante (MILNER, 1977).
- No6ema yponomeutae parasite les larves et les nymphes d'Yponomeuta
padella et d'Y. evonymetla. Le taux de parasitisme est de 5,1 % chez les
larves et de 3 % chez les nymphes d'Y. padella et de 6,1 % chez les larves
et 33 % chez les nymphes d'Y. evonynella (PURRINI, 1977).
- No6ema thom6oni a été observée chez 25 % des larves de Cho~tone~a
eon6lietana récoltées au Canada ; cette Microsporidie attaque le tube di-
gestif, les glandes à soie et les tubes de Malpighi (WILSON et BURKE, 1971).
n'autre part, en élevage, les épidémies peuvent provoquer de
vraies hécatombes.
- No6ema gatl~ae est responsable de la mort des larves de Gatle~a
metlonetla en élevage aux U.S.A. (1959) et en U.R.S.S. (1966 et 1967)
(LIPA, 1977 c).
- En 1973, à la station de Zoologie et de Lutte biologique d'Antibes
(France), il a été noté une mortalité exceptionnellement élevée des divers
stades de développement de Ce~ eapitata. L'agent pathogène responsable de
cette
mortalité est Oeto6po~ea mU6eaedome6tieae (ORMIERES et al., 1977).
- N06ema loeU6tae entraine une mortalité de plus de 92 % chez LoeU6ta
mig~o~a en élevage au département de Zoologie de "College of Science
and Technology" de Londres (Angleterre) (CANNING, 1962).
- No6ema po~phy~niae est à l'origine de la mortalité enregistrée dans
l'élevage de P~phy~nia ama6~na (Lép., Noctuidae) à la Station de Recher-
che de Regina (Canada) (LIPA, 1977d).
6
- No6ema 6umi6e~ae, transmise par voie orale à la dose de 10 spores/
ml, provoque une mortalité de plus de 50 % chez les larves de 2è et 3è
7
7
9
stade de Cho~toneuka 6umi6e~na ; aux doses de 2.10 , 3.10
et 2.10
la
mortalité est de 50 % chez les larves de 4è, 5è et 6è stade (WILSON. 1974).
- No6ema melolonthae transmise aux larves de Melolontha melola~a
provoque la mort de celles-ci ; le taux de mortalité enregistrée est fonc-
tion de la quantité de spores ingérées et de l'âge des larves. Les D.L.50
5
sont, par ingestion libre. de 1.10
spores/ml pour les larves de 1er sta-
6
de. de 5.10
spores/ml pour les 2è et 3è stade (KHARAZI-PAKDEL, 1968).

---

- 7 -
No~ema ga6~ideae, transmise aux larves de Leptinotanha deeemli- -
neata
provoque une mortalité de 80 % de celles-ci durant les la premiers
jours (HOSTOUNSKY et WEISER, 1973).
Il ressort donc de ces quelques exemples que ces quatre grou-
pes de micro-organismes parasites présentent un intérêt pour une éventuelle
lutte biologique. C'est dans cette perspective que des études sur les ma-
ladies et les entomophages des Helioth)A, ennemis d'un nombre impression-
nant de plantes cultivées, ont été entreprises dans plusieurs pays.
v - LES E NTOM 0 PAT H0 G E NES DES HELIOTHIS
Le premier souci des spécialistes fut de procéder à On inven-
taire aussi complet que possible des germes pathogènes pour ces Lépidop-
tères. Dans l'ensemble, les inventaires montrent que les maladies de ces
noctuelles sont essentiellement provoquées par 3 catégories de germes :
- Une polyédrose
nucléaire (Baeulov~) a été décrite chez Helio-
th)A zea aux U.S.A. Selon TEAKLE, 1977, c'est la plus meurtrière des mala-
dies, les larves parasitées deviennent molles, meurent et se liquéfient.
Une virose de même type a été signalée chez Helioth)A v~~~ee~ (IGNOFFO,
1966a) ,chez H. peltige~ en Israël (HARPAZ et ZLOTKINE, 1965).
- Une polyédrose
cytoplasmique a été signalée chez H. v~~een6
(SIM-
MONS et SIKOROWSKI, 1973). Les larves infestées pèsent 50 % moins que les
larves saines, la vie larvaire est plus longue et la fécondité est réduite
de 68 %.
- Une granulose a été notée chez H. ~ge~ (TEAKLE, 1977) et chez
Helioth)A ~p. (WHITLOCK, 1977). Selon WHITLOCK (1977), cette granulose pro-
longe la vie larvaire et la mort n'intervient qu'au stade prénymphal chez
les Helio~ ~p.

---

- 8 -
Des affections cryptogamiques sont aussi connues chez les
- Nom~ea (=Sp~~~a) 4iley~ parasite H. zea. Les chenilles se con~
taminent généralement sur les plantes hôtes ; les spores se fixent sur la
surface de l'Insecte, germent et pénètrent dans la peau. La larve devient
rigide puis est recouverte d'un duvet vert et meurt (TEAKLE, 1977
MOHAMED et al. 1977).
- Beauve~a ba6~~ana s'attaque aux larves d'Ho zea. Les larves de-
viennent rigides, meurent et sont enveloppées d'un duvet blanc (TEAKLE,
1977).
S~ m~~~~eU6 parasite les oeufs d'Ho zea (BELL, 1969).
Une seule Microsporidie a été rencontrée chez les Helio~~.
Il s'agit de No~ema heliothi~ décrite par LUTZ et SPLENDORE en 1904 au
Brésil chez H. zea. KRAMER, en 1959, en redécrivant cette espèce a indi-
qué que N. helio~~ se localise dans le tube digestif
des larves et
imago d'Ho zea et d'Ho v~~~~en6. LIPA, en 1968, montre que cette Micros-
poridie attaque beaucoup d'autres tissus chez H. zea j il s'agit de l'épi-
the1ium intestinal, des trachées, des glandes salivaires, des muscles, du
corps adipeux, de l'hypoderme, des hemocytes et des gonades. BROOKS (1968)
démontre, quant à lui, que N. helio~~ se localise aussi dans les oeufs
et les tubes de Malpighi d'Ho zea
$PRAGUE, 1977b).
Parallèlement à l'inventaire de germ~ pathogènes aux Helio~~,
plusieurs chercheurs ont procédé à des infestations expérimentales afin
de mettre en évidence certains caractères pathologiques et épidémio1ogi-
ques de ces maladies.
- VANDAMME et ANGELINI (1966) ont importé le virus de la po1yédrose
nucléaire d'Ho zea des U.S.A. et l'ont élevé sur H. akmig~a de la Côte
d'Ivoire. Le virus détruit les cellules sanguines et provoque la mort des
chenilles. Ces mêmes auteurs ont également réussit à infester les chenil-
les d'Ho anmigeka par le virus de la po1yédrose cytoplasmique décrit chez
H. v~~~~en6. Chez H. anmige~a, ce virus se développe aux dépens des cel-
lules du mésoderme.

---

- 9 -
- WHITLOCK (1977) a réalisé une infestation simultanée de la granulose
et de la polyédrose nucléaire sur les larves d'Ho ~ge~ ; il a alors
constaté que ce complexe entraine une mortalité plus faible que chaque vi-
rus séparément.
- Ba~ thuning~~~ a été testé sur H. zea aux U.S.A. (HARDWICK,
1965) et sur H. anmige~ en Côte d'Ivoire (DELATTRE, 1973).
- NOfJe.ma ga.6U, NOfJe.ma fJpMng~cLi..6, NOfJe.ma w..chop.e.U6~ae et VaiMmoltpha
nec.a.tJUx ont é té transmise à H. vLtu c.en.'J et H. zea
(SflRAGUE, 1977b).
V 1 - LES E N TOM 0 P H AGE S DES
HELIOTHIS
--- .._----------------------
Les H~otM!J, comme la plupart des Noctuelles, ont un pouvoir
de reproduction très élevé ; mais la pullulation de ces Insectes est sou-
vent limitée par des ennemis naturels, qui sont surtout des Hyménoptères,
des Hémiptères, et des Diptères.
Beaucoup d'Hyménoptères parasites ou prédateurs des Helio~
ont été signalés un peu partout dans le monde.
- T~chogJta.mma minU-tum et T. evanUc.en.'J parasitent les oeufs d'Ho zea
aux U.S.A. (HARDWICK, 1965)
- T~chogJta.mma .e.U-teum et T. b~ilenIJe ont été signalée parasitant les
oeufs d' H. ~ge~ (HARDWICK, 1965 ; DELATTRE, 1973).
Campo~ fJonoltenIJ~ pond ses oeufs dans les larves d'Ho vLtUc.enIJ
aux U.S.A. (NORTON et VINSON, 1977).
- Caltdiochilu neg~c.epfJ déposent ses oeufs dans les larves d'Ho zea
et d'Ho vLtUc.enIJ (KAHN et al., 1976).
- ChetonU6 texanU6 se nourrit aux dépens des oeufs d'Ho vLtUc.en.'J
(VINSON, 1975).
- /lU.c.ltOp.tU.iA c.ltoc.epu pond ses oeufs dans les larves d' H. vLtu c.en.'J
(DAHLMAN et VINSON, 1975) et d'Ho zea (BARRAS et al., 1972).
- Ec.pholtop!J~ peltcLi..6Unc.tU6 et BanchopfJ~ ltUQ.{.c.OItYU!J parasitent les
larves d'Ho attrnige~ en Inde (PATEL et PATEL, 1972 ; MATHUR, 1967).

---

- 10 -
- Tkichog~amma chilotnoeae infeste les oeufs d'Ho pettig~ en Inde
(MANJUNATH et al., 1976).
- ChelonU6 hetiopae en Inde, se
nourrit des embryons d'Ho peltige~
(MANJUNATH et al., 1976).
- Campol~ maeutip~, Ekibo~U6 ~p., et P~tome~ ~p. vivent aux
dépens des larves d'Ho pettige~ (MANJUNATH et al., 1976).
Des Hyménoptères prédateurs de jeunes larves d'Ho peltig~
ont été signalés en Inde; il s'agit surtout de CamponotU6 ~ekieeU6
(MAN-
JUNATH et al., 1976).
Des Hémiptères comptent également au nombre des prédateurs d'
- Tkiphle.p~ J.~J.CÜo~U6 vit aux dépens des jeunes larves d 'H ,zea aux
U.S.A., alors que T. aU6tna1J. chasse les larves d'Hetio~ ~p. en Austra-
lie (GBENOU, 1977).
- P~phle.p.6 le.avJ.lL6c.ulU6 et OkiU6 J.~J.CÜoU6U6 sont prédateurs des
larves d'Ho zea aux U.S.A. (OATMAN, 1978).
Dans la littérature, on relève un certain nombre de Diptères
ennemis d'Hetio~ :
- Eueelatokia ~p. se développe dans les larves d'Ho ~ge~a (ZISER et
al., 1977).
- WJ.nthemJ.a
~u6opJ.eta parasite les chenilles d'Ho ze.a et d'Ho vJ.-
~~ee.YL6 (DANKS, 1975).
- A~chtjta6 m~o~atU6 pond ses larves dans celles d' H. v~e..6 ee.YL6
(NETTLES et BURKS,
1975).
- Les larves d'Eue~eetia J.llota, d'Exo~ta xantha6p~, de Pale.xo~ta
laxa et de C~ee.tia ~p. se nourrissent aux dépens des larves d'Ho pettig~a
en Inde (MANJUNATA et al., 1976).

---

-
Il -
Beaucoup de germes pathogènes et d'entomophages ont été étudiés
chez les He~o~, mais malgré le grand nombre de programmes de recherches
consacrés à la lutte contre ces Insectes, aucune microsporidiose à effet
notable n'a été détectée chez H. ~gena. Aussi il nous a semblé intéres-
sant de rechercher si des microsporidies ne seraient pas susceptibles de
jouer un rôle dans la limitation de la pullulation de ces Insectes hautement
nuisibles à plusieurs plantes cultivées en Afrique et en Europe.
Après avoir maitrisé la technique d'élevage d'Ho anmigena, nous
avons réalisé des infestations expérimentales pour rechercher le pouvoir
pathogène de trois Microsporidies pour les larves de cet Insecte. Ce sont
une Microsporidie de CWo zac.c.orUlL6, une de Spodop-telta W-toJr..o.UA et une
de Gatenuc.eLe.a· .tu;teo.ta..
La Microsporidie de Ch. zac.c.orUlL6, No~ema marUeJta.e
s'est révé-
lée la plus efficace.
Un chapitre a été consacré à l'étude de cette Microsporidie. Plu-
sieurs aspects ont été abordés: étude du cycle de développement, de l'ul-
trastructure, de la variation de la taille et de la forme des spores, de sa
spécificité parasitaire et du pouvoir de conservation de sa virulence.
Un autre
chapitre a été consacré à l'étude des relations entre
la Microsporidie et son hôte expérimental, H. ~gena. Cette étude a été
abordée sous plusieurs angles: aspects quantitatifs et histopathologiques,
influence sur la croissance des larves et aspects biochimiques.
L'étude d'une microsporidiose double chez H. anmigena a été
également réalisée. Les deux Microsporidies utilisées sont : N. marUeltae
et No~ema ~p. de Spodop-telta W-ton~.
Compte tenu de l'importance que prend l'élevage des Insectes en
Entomologie appliquée, nous avons étudié les effets des antibiotiques
con-
sidérés comme étant des antimicrosporidiens sur N. manienae.
Enfin, en conclusion, nous avons discuté la signification des
résultats obtenus.

---

1ère PAR T 1E
Généra lités
et
Aperçu
Historique

---

- 15 -
CHAPITRE 1
LES MICROSPORIDIES DES LEPIDOPTERES
- HISTORIQUE
Les Microsporidies ont longtemps été classées dans le sous-
embranchement des Cnidosporidies et il a fallu attendre l'essor du micros-
cope électronique pour mettre en évidence leur structure unicellulaire,
la méiose dans leur cycle (LOUBES, 1979a)et toutes leurs caractéristiques
très spécifiques qui les placent parmi les Mi~o~po~a (SPRAGUE, 1977a).
Strictement parasites, les Mîcrosporidies s'attaquent à divers groupes
d'animaux: les Protozoaires (Grégarines, Ciliés), les Myxosporidies, les
Helminthes (Cestodes, Nématodes, Trématodes), les Annélides (Oligochètes,
Polychètes, Achètes), les Mollusques (Lamellibranches, Gastéropodes), les
Lophophoriens (Bryozoaires), les Rotifères, les Arthropodes (Crustacés,
Arachnides, Myriapodes, Insectes) et enfin les Vertébrés (Poissons, Repti-
les, Batraciens, Oiseaux et Mammifères).
Les hôtes les plus fréquents des Mîcrosporidies sont les In-
sectes qui hébergent environ les 2/3 des Mîcrosporidies décrites jusqu'à
présent et, parmi eux, après les Diptères, les Lépidoptères semblent être
les plus touchés. Chez les Lépidoptères, la première espèce décrite est
No~ema bomby~ Naegeli, 1857, chez Bombyx mo~. Après la description de
cette espèce, suivent les études de LUTZ et SPLENDORE de 1903 à 1908 avec
la description de No~ema a6ty~ae, N. eubut~, N. e~pp~, N. juno~, N.
vanittae a, N. vanittae e, N. ly~~mi~e,N.
eeeuliae, N. hy~ae, N. ha-
leJ.J~do.t.ùi0~, N. heliotMCÜ6, N. micJtatau, N. ~abaUYte et N. epMctU..L6,

---

- 16 -
puis celles de ZANDER en 1909 (N. ap~), d'ISHIWATA en 1917 (No~ema ~p.)
et de PAILLOT de 19 18 à 1938 (No~ ema mM /"Lili 1 M{.cJto~ poJUiÜ.um mM /"Lili 1 N.
pYJta.u.6ta et N. c.MpO ca.p~ ae) •
Les résultats se multiplient jusqu'à nos jours et plusieurs autres espè-
ces ont été décrites appartenant aux genres No~ema Naegeli (1857), Pt~­
tophoJta Gurley (1893), Thetoh~a Henneguy (1884), Octo~poJtea Flu (1911),
Gunleya Doflein (1898) et V~oJtpha Pilley (1916).
Les caractères distinctifs de ces genres sont résumés et
regroupés dans le tableau 1 (critères empruntés à la classification de
SPRAGUE, 1977 a).
-
Genres
structure nucléaire
Pans-
Nombre de spores à par-
poro-
tir du sporonte.
méronte
sporonte
blaste
Forme des spores.
No~ema
diplocaryon
diplocaryon
non
2 (ou plus)
ovoide ou subcylindrique
Octo~poJtea diplocaryon
diplocaryon
non
8
( 1)
allongée ou arquée
Gunleya
noyaux
noyaux
oui
4
isolés
isolés
pyriforme
Thetoh~a diplocaryon
noyaux
oui
8
isolés
ovoide Ou pyriforme
Pt~topho- diplocaryon
noyaux
oui
16 (ou plus)
!ta
isolés
ovoides
VaJJUmoJtpha
Microsporidie dimorphique : caractères de No~ema et
Th do ha.rria .
TABLEAU 1
Caractères des genres de Microsporidies décrites chez les
Lépidoptères.
(1) ORMIERES et al. puis HAZARD, utilisant la microscopie
électronique, ont démontré qu'il existe une membrane pans-
poroblastique qui entoure les stades de sporulation
(SPRAGUE, 1977 b) .

---

- 17 -
SPRAGUE (1977~ regroupe par ailleurs les formes ambigües et les espèces
incertaines de plusieurs
Microsporidies de Lépidoptères sous le nom de
MtC!W6 poJU..cüwn •
II - LES NOSEMA DES LEPIDOPTERES
La plupart des Microsporidies décrites chez les Lépidoptères
appartiennent au genre No~ema. Plus de 90 espèces de No~ema ont été dé-
crites et toutes présentent le même cycle de développement.
a) Cycle de développement des No~ema
Le stade essentiel d'identification des No~ema est la spore,
,
car c'est le seul stade du cycle qui possède une forme propre et une struc-
ture interne composé d'éléments caractéristiques fixes. Cette spore permet
au parasite d'avoir une phase libre. Ingérée par un nouvel hôte, un stimu-
lus encore inconnu provoque 1 1 évagination du filament ; le sporoblaste
binucléé est alors entrainé et injecté dans la cellule-hôte, où il se trans-
forme en méronte. Les deux noyaux du méronte subissent chacun une mitose
aboutissant à la formation d'un méronte à 2 diplocaryons qui évolue
en sporonte entouré d'une membrane épaisse et complexe. Le sporonte, par
cytodiérèse donne deux sporoblastes qui évoluent en spores binucléées.
Selon LOUBES (1979a~ les sporontes peuvent donner plusieurs sporoblastes
après avoir formé un petit plasmode.
Le cycle de développement que nous venons d'exposer représente
la phase asexuée du cycle des No~ema car, selon LOUBES (1979~, la sporogo-
nie peut aussi déboucher sur la formation des spores uninuclées dont les
noyaux sont haploLdes
si une méiose qui, selon lui, se déroule peu avant
la sporogonie, existe.
b) Caractères distinctifs des différentes espèces de No~ema
des Lépidoptères
Bieu que leur cycle de développement soit semblable dans ses
grandes lignes, les No~ema des Lépidoptères se distinguent cependant les
unes des autres et les caractères distinctifs intraspécifiques les plus

---

- 18 -
utilisés sont : la morphologie (taille et forme) et la structure du méronte,
du sporonte et surtout de la spore. En se basant sur ces critères plus de
90 espèces de No~ema ont été décrites ; la taille de leurs spores varient
entre 2 et 10 ~ de long sur 1 à 4 ~ de large. Citons quelques unes de
ces espèces avec leurs caractères distinctifs (voir tableau 2) (SPRAGUE, 1977b).
-
Espèces
Méronte
Sporonte
Spores
N. c.ac.oec.iae
arrondi
allongé, binu-
ovales
Weiser, 1956
2-3,5 J-1IIl de
cléé
2-2,6 x 1,5 )Jm
diamètre
N. :thomôorU
sphérique
allongé, uni-
ovoide
Wilson & Burke,
2-3,5 )Jm de
nucléé
2,1-3,1 x 1,1-1,8
1971
diamètre
2 x 4,5 ).lm
)Jm
N. opeJtoph:CeJLa.e
uninuc1éé
-
cylindrique
Canning, 1960
binuc1éé
2,5-3,5 x 1-1,3 pm
et 5-7 x 1-1,5 )J1D.
N. bomblJ~
-
fusiforme
ovale
Naegeli , 1857
binuc1éé
3-4 x 1,5-2 J.1lIl
N. c.aJtpoc.ap6ae
rond
fusiforme
ovoide
Paillot, 1938
binuc1éé ou
binucléé ou
4 x 2)JID.
uninucléé
uninucléé
N. dU, ~:tJUae
petite taille
fusiforme
elliptique
Thomson, 1959
1,5 }lm de dia-
binuc1éé
4-5 x 2 J-1IIl
mètre
grand diplo-
caryon
N. ap-i-ô
en chaine
à membrane
ovale
Zander, 1909
épaisse
5 x 2,8 )Jm
binuc1éé
N. mM c.u.iil!U6
binuc1éé
binuc1éé
ovoïde
Weiser, 1957
4,8-6 x 3-4 pm
vacuole postérieu-
re
N. ~ eltb'<'c.a
-
-
ovale
Weiser, 1957
6-8 x 4)J1D.
No~ema ~p.
-
-
allongée ou ovoïde
Lipa, 1964
4,5-8,2 x 2-3,5 ~m
TABLEAU 2
Caractères distinctifs des quelques espèces de No~ema
des Lépidoptères.

---

- 19 -
Il ressort de ce tableau que beaucoup d'auteurs se sont basés
surtout sur la forme et la taille du méronte, du sporonte et surtout des
spores pour définir une espèce. Cette façon de procéder rend très diffi-
cile la compréhension de toutes les espèces de No~ema ; certains auteurs
mettent d'ailleurs en cause la validité de certaines espèces. Ainsi,
NORDIN et MADDOX (1974) mettent les espèces suivantes en synonymie
avec N. bombyei6 : N. ~nvaden6 Kellen et Lindegreen, 1973, N.
polyvo~a
Blunk, 1952, N. m~~ Paillot, 1918, N. pe~z~o~d~ Huger, 1960, N.
6umi6~ae Thomson, 1955, N. ~~tniae Thomson, 1959, N. tnichoplU6~ae
Tanabe et Tamashiro, 1967, No~ema ~p. Nordin et Maddox, 1974.
- PILLEY (1976) transfère N. ne~x dans le. genre V~monpha Pilley,
1976.
- SPRAGUE (1978) pense que, tel qu'il est composé en ce moment, le genre
No~ema constitue un groupe très hétérogène et que 80 i. seulement des espè-
ces décrites appartiennent réellement au genre No~ema.
Les Microsporidiologistes actuels s'intéressent de plus en plus
aux critères ultrastructuraux car leur importance taxonomique n'est plus à
démontrer.
Ce sont, selon LOUBES (1979) :
- l'organisation sporale
- la morphologie de l'appareil nucléaire
la distinction mérogonie - sporogonie
- laplasrnotornie (division du sporonte)
- les relations topographiques entre la cellule-hâte
et le parasite.
C'est en utilisant ces critères que beaucoup d'espèces mal ou
pas connues ont pu être parfaitement définies.
c) Action des No~ema sur leurs hôtes Lépidoptères
Afin d'étudier la Microsporidie de Chilo za~~oniU6, quelques
exemples ont servi de référence. Ces publications retenues en fonction de
notre travail, traitent le sujet.suivant trois grands types
- le premier fait appel aux données statistiques
- le second s'attache à décrire les lésions causées par le parasite
- le troisième fait appel aux données biochimiques.

---

- 20 -
- ~~~~~~~_~~~~i~~i~~~~
- NMema. .6p. Nordin, 1976 provoque une forte mortalité chez
les deux premiers stades larvaires de Mala.eo.6oma. a.me~eanum (Lép. : La-
siocampidae) ; NORDIN (1976) a également remarqué que 78,8 % seulement
des oeufs issus des femelles parasitées éclosent, alors que 91,7 % des
oeufs issus des femelles saines éclosent.
No.6ema. 6~6e~a.e Thomson, 1955 parasite le Lépidoptère
Cho~tone~a. 6umi6e~a.. WILSON (1974) a noté après des études d'infes-
tations expérimentales que la mortalité chez les larves de différents
stades de Ch. 6umi6e~a. s'accroît au fur et à mesure que la quantité de
spores de N. 6umi6~ana.e ingérées augmente. Il faut, suivant les cas, 14
à 20 jours au parasite pour provoquer une mortalité de 50 % chez les
larves.
- No.6ema. ~~elta.e Ke11en et al., 1977 vi~ahez Pa.ka.mye-
lo~ ~~~ella. (Lép. : Pyra1idae);e11e provoque un ralentissement de
la croissance des larves de ce Lépidoptère. Les, 1a~v~s malades donnent
• l
,
.
1
i /1 '-.
des petites nymphes déformées qui évoluent ent~dultes'dè:~petite'taille
l "
!
(KELLEN & al., 1977).
' \\ ' ,
- Les spores de N. PYJta.u.6ta. répanduEi~sp,us t~)t'~< de suspens ion
" . . l '
• ' "
•
dans l'eau dans un champ de mais parasité par O.6~~aonùb~~ (Lép. :
Pyra1idae) à raison de 22,5.10 7 spores/plante réduisent le nombre de lar-
ves par plante de 48,1 % (LEWIS & LYNCH, 1978). Cette même espèce réduit
la durée de vie des adultes, la fécondité des femelles et la fertilité
des oeufs de PYJta.U6ta. nub~
(Lép. : Pyra1idae) (KRAMER, 1959).
- NMema. :tJU.ehopluo-i.a.e provoque chez les femelles de T~eho­
pluo-i.a. n-i. (Lép. : Noctuidae) une baisse de la fécondité. En effet, les
femelles fortement infestées ne pondent que le 1/4 ou le 1/6 du nombre
d'oeufs pondus par les femelles saines; beaucoup de ces oeufs ne sont
pas fertiles et les larves issues des oeufs pondus par les femelles in-
festées sont également parasitées et meurent au dernier stade larvaire
(TANABE & TAMASHIRO, 1967).
- No.6ema. plodia.e se transmet par la vo~e transovarienne chez
Plo~a. -i.nte~punetella.. KELLEN & LINDERGREN, (1973) ont noté que 51,8 %
des oeufs pondus par les femelles parasitées sont infestés. Ce mode de
transmission augmente considérablement les possibilités de transmission
du parasite d'une génération à l'autre.
- No.6ema. p~ez-i.o-i.de.6 Huger, 1960 provoque une mortalité ra-
pide chez les jeunes larves d'Ag~o~ .6egetum (Lép. : Noctuidae) alors
que chez les larves âgées, cette mortalité s'étale dans le temps (HUGER,
1960) .

---

- 21 -
- No~~ma bomby~ réduit la fécondité chez les femelles de
Bombyx moki Linnaeus et d'Hyph~~aQun~aDrury (VEBER & JASIC, 1961).
- No~~ma yponomeuta~ Purrini, 1977 parasite le tissu adipeux,
l'intestin, les lymphocytes, les muscles et les cellules péritrachéales
de Yponom~uta padetta et Y. ~vonymetta (Lép. : Yponomeutidae) (PURRINI,
1977) .
- N. QakpoQ~a~ attaque chez les larves de NotoQettia uddman-
niana, les tubes de Malpighi, les glandes à soies, l'épithélium intestinal
et d'autres tissus. Dans la plupart des cas, cette espèce détruit complè-
tement les tissus infestés (LIPA, 1977b).
- N. ~~ett~ parasite les glandes à soie, les muscles,
les tissus nerveux, le tissu adipeux et le tube digestif de P~amyelo~ tnan-
~~etta
. Elle provoque une hypertrophie des cellules adipeuses et les
lobes du tissu adipeux, pleins de spores, prennent l'aspect d'une grappe
autour du tube digestif (KELLEN & al., 1977).
- N. po~phy~~ provoque une infestation généralisée chez
les larves de Po~phykinia ama6~a Eversman (Lép. : Noctuidae). Les organes
les plus touchés sont le tube digestif, les glandes à soie, les gonades
et les hémocytes. Ce parasite serait la principale cause de la mortalité
observée chez les P. ~~na en élevage à la station de Recherche de Regi-
na (Canada) (LIPA, 1977d).
- No~~ma ~nvad~n6 parasite surtout la paroi intestinale et les
tubes de Malpighi de Ca~a &tgulitetta et CadAa Qautetta. Des actions
phagocytaires des hémocytes ont été observées dans les tissus adipeux
parasités et autour des organes (tubes de Malpighi, glandes à soie et
trachées) infestés (KELLEN & LINDEGREN, 1973).
- No~~ma ~p. parasite les oeufs, les larves et les adultes
de MalaQO~oma am~Qanum. Dans les oeufs les spores se localisent dans le
chorion et le jaune d'oeuf mais également dans l'embryon. Chez les larves,
le parasite infeste le tube digestif, le tissu adipeux, l'hypoderme, les
glandes à soie, les tubes de Malpighi, le
tissu
nerveux, les muscles et
les gonades. Des actions phagocytaires des hémocytes ont été observées
dans le tissu adipeux parasité. A un stade avancé de l'infestation, les
larves sont bourrées de spores. Chez les adultes, les spores se concentrent
aussi dans les oocytes (NüRDIN, 1975).

---

- 22 -
- No~ema h~~othi~ infeste divers tissus des larves et
adultes d'Helio~ zea. Chez les larves, les spores sont fréquemment
observées dans les hémoc:ytes, les muscles, le tissus adipeux, le tube
digestif et les trachées. Les hémocytes infestés s'hypertrophient puis
dégénèrent tandis que les cellules de l'épithélium intestinal, hyper-
infestéessont détruites. Chez les adultes, le parasite se localise dans
le tissu adipeux mais aussi dans les ovaires et les testicules (LIPA,
1968c).
- No~ema g~l~eparasite divers tissus (tissu adipeux,
gonades, hémocytes et le~s glandes à soie) de Ga11..eJL.<.a meUoneU.a. Elle
cause finalement la mort: de ses hôtes (LIPA, 1977 c) •
- N. p.e.od<.a.e~ augmente l'activité de l'isoenzyme L D H -2 - 3
(Lactase déhydrogénase ·-2-3) du tissu adipeux des larves de dernier stade
de Gai1.eJUa meU.oneU.a E~t de BaJutthtta. bl!..a.6~-<'c..ae et ceci au 5è j our de
l'infestation (KUCERA & WEISER, 1975). Cette même espèce provoque égale-
ment une augmentation de~ l'activité de 3 enzymes intestinales des larves
de BaJutthlta bl!..a.6~-<'c..ae ; ces enzymes sont: l'alanine amino-transferase,
l'alkaline phosphatase E~t la protease. Cette augmentation est très nette
au 10è jour de l'infestation (KUCERA & WEISER, 1973 a et b, 1975).
- N. he.e.-<.otf~~ provoque des variations de taux d'acides
gras chez les larves et les nymphes d'Heliothio zea. En effet:
x les larves (de 4è au 6è stade) saines ont en moyenne une valeur calori-
que en acide gras de 39 ,,5:!,:3, 6 cal / gm de poids frais, alors que les larves
atteintes de N. he.e.-<.ot~~~ en ont en moyenne 79,8:!,:O,5 cal/gm de poids
frais.
x les nymphes mâles infE~stées ont en moyenne 77,9!8,2 cal/gm de poids
frais et les nymphes mâles saines ont 71,O!4,7 cal/gm.
x les nymphes femelles Dlalades ont en moyenne 85,2:!,:12,7 cal/gm de poids
frais alors que les nymphes femelles saines ont en moyenne une valeur ca-
lorique en acide gras dE! 62,4!7,1 cal/gm de poids frais.
Cette Microsporidie n'entraîne aucune variation significative de taux
d'acides aminés chez les larves ou les nymphes parasitées.

---

- 23 -
III - LA MICROSPORIDIE DE ch~to zaQQon~u~
A 1'1. R. A. T. de Montpellier où est élevée la pyrale du riz,
C~o ZaQQO~U6, il a été noté une mortalité exceptionnellement forte des
divers stades de développement. Les larves anormales (légèrement blanchâtres)
laissent échapper, lom des dissections, une quantité très importante de
corpuscules ovales isolés ; la coloration par la fus chine de Delamater qui
révèle dans chaque corpuscule deux noy~ux, établit, sans aucun doute, la
nature microsporidienne de l'agent pathogène responsable de la mortalité
observée dans les élevages. Les coupes histologiques des larves, des oeufs
et des adultes malades montrent que les spores sont présentes dans le tissu
adipeux, le muscle, les cellules péritrachéales, les ovarioles, les oeufs,
l'hypoderme, les tubes de Malpighi et dans les glandes séricigènes. Le ca-
ractère envahisseur de cette Microsporidie en fait une espèce intéressante
pour notre travail.

---

i
- 25 -
CHAPITRE II
PROBLËMES ÉCONOMIQUES LIÉS AUX HELIOTHIS
ET LUTTE CONTRE CES DERNIERS
Dévoreuses du feuillage et des organes fructifères d'un grand
nombre de plantes cultivées ou sauvages, les larves d'Helio~ posent
des problèmes agronomiques très importants et complexes du fait de leur ~m­
pact économique et des grands efforts déployés pour combattre le fléau qu'
elles représentent. Dans ce chapitre, nous résumerons les plus importants
problèmes liés à ces Noctuidae, notamment les conséquences économiques et
l'état actuel de la lutte contre elles. Nous insisterons surtout sur les
problèmes posés par He~ot~ ~geka, objet de notre étude.
l - PROBLËMES ÉCONOMIQUES LIÉS AUX HELIOTHIS
Le gen re He~o~ est cosmopolite, très fréquent dans les
zones tropicales, équatoriales et méditerranéennes. Ce genre est représenté
en Amérique du Nord par H. zea ; en Amérique du Sud par H. zea et H. geio-
topoeon ; en Europe par H. ~mige~a ; en Afrique par H. anmigeka, H. aô~ul­
ta, H. 6ieA:c..heJU. et H. todcü ; en As ie par H. ~geka et H. aô~ulta ; en
Australie et aux Philippines par H. anmigeka, H. aô~utta et H. punc..tige~a
aux Isles du Pacifique par H. ~geka, H. aô~ulta, H. pa~6~a, H. minuta,
H. c..on6U6a, H. hawctü..e~.i6 et H. p~da ; enfin au Canada par H. v~~~c..e~
(HARDWICK, 1965).

---

- 26 -
Toutes ces E!spèces causent des dégats plus ou moins importants
à leurs plantes hôtes.
- Les larves d'Ho viJtuc.enô sévissent entre l'Argentine et le
Canada sur le mais et surtout le tabac. Sur le jeune plant de tabac, les
chenilles percent les feuilles et les rendent inutilisables. Au Texas (USA)
cette espèce a détruit un champ de cotonnier à 25 % en 1970 ; au Mexique,
elle a posé de sérieux problèmes pour la culture du coton de 1950 à 1960
et même en 1970 (DAXL, 1977 ; HARDWICK, 1965 ; HILL, 1975).
- Aux U.S.A. ce sont les larves d'Ho zea. qui causent les dé-
gats au mais, au coton, il la tomate, au sorgho, à diverses variétés de ha-
ricots, à l'aubergine, au choux, au tabac, à la laitue, etc ... Cette espèce
a été également signalée sur les pastèques aux Isles Hawaï. Sur le coton,
les larves d'Ho zea. attaquent les boutons floraux et les capsules; sur le
mais, les larves se nourrissent d'abord des jeunes feuilles et lorsque les
épis apparaissent, elles migrent vers ceux-ci et se nourrissent des graines.
H. zea. est considérée, aux U.S.A., comme le plus dangereux déprédateur car
elle infeste un nombre impressionnant de plantes (20 environ) et a une aire
de répartition assez vaste (DAXL, 1977 ; HARWICK, 1965 ; HILL, 1975 et
OATMAN, 1978).
- H. PuncügeJta., endémique d'Australie, s'attaque surtout aux
Solanacées et aux Légumineuses (HARDWICK, 1965).
- H. a6~uttll vit des feuilles de tabac dans le Sud-Est asia-
tique, de tomate et de m,ais en Nouvelle Guinée (HARDWICK, 1965).
- Helio~ getotopoeon infeste le mais, la tomate, le tabac
et le lin (HARDWICK, 196.5)~
- Hetiothio aJtmigeJta. est l'espèce dont l'aire de répartition
est la plus étendue et dont les larves sont extrêmement polyphages.
Les
oeufs sont déposés sur diverses plantes et plus particulièrement sur le
mais, le coton, le tabac, le lin, les légumineuses ainsi que de nombreux
arbres fruitiers: pêcher, prunier, poirier, pommier, etc ... Selon POITOUT
(1972) les femelles déposent leurs oeufs de préférence sur les plantes qui
fleurissent ou sur celles dont la floraison vient d'avoir lieu. Sur le mais,
les jeunes larves gagnent le sommet de l'épi et dévorent les grains en for-
mation. Sur la tomate, les chenilles forent des galeries dans les jeunes
fruits qui cessent de croître et tombent. Sur le cotonnier, les larves at-
taquent les fleurs, les bourgeons et les fruits.

---

- 27 -
En France,
c'est le maïs et la tomate qui sont les plantes
hôtes (POITOUT, 1972).
En Afrique, différentes cultures d'intérêt
économique
sont
exploitées par les larves d'Ho anmigeka. Les plus importantes sont le co-
ton, le maïs, le tabac, le piment, la tomate, le sésame, l'aubergine et la
pomme de terre. En Côte-d'Ivoire, H. ~ge~a a été citée comme étant le
ravageur dominant de la culture cotonnière car plus d'un million d'oeufs à
l'hectare ont été dénombrés (HARDWICK, 1965 ; HILL, 1975 ; TUNSTALL, 1977 ;
VANDAMME & ANGELINI, 1968).
Dans les pays asiatiques (Chine, Inde, Ceylan, Vietnam, Japon,
etc ... ) c'est le cotonnier qui est fréquemment infesté (HARDWICK, 1965).
L'action dévastatrice des larves d'Ho anmigeka s'exerce
aussi en Océanie
(Australie, Philippines), en Europe de l'Est (U.R.S.S., Yougoslavie et Rou-
manie) (HARDWICK, 1965).
Notons enfin la présence d'Ho hawaiien6~ dans les Isles Hawaï
où elle pose également des problèmes économiques importants.
II - LUTTE CONTRE LES HELIOTHIS
Pour lutter contre les populations d'Helio~, plusieurs mé-
thodes ont été envisagées.
1) La lutte chimique
Les traitements chimiques constituent à l'heure actuelle le
moyen le plus employé pour réduire les populations d'Heliot~. Plusieurs
types d'Insecticides, notamment le D.D.T., l'endrine, l'endosulfan, le ce-
lathion, etc ... sont largement utilisés contre les Heliot~, surtout en
Afrique. Des résultats satisfaisants ont été obtenus, mais parallèlement,
des inconvénients sont apparus dans bien des pays. En effet, les insecti-
cides agissent non seulement contre les espèces nuisibles mais aussi contre
leurs parasites et prédateurs ainsi que de nombreux autres Insectes utiles.
Par ailleurs, l'épandage régulier d'insecticide peut provoquer l'apparition
de races résistantes; c'est le cas d'Ho zea devenue résistante aux insec-
ticides chlorés aux U.S.A. et au methyl-parathion au Nicaragua; c'est
aussi le cas d'Ho vi~~en6 devenue résistante à ces mêmes insecticides
aux U.S.A., au Pérou et au Mexique (DAXL, 1977). A cause de leur absence
de spécificité, l'usage des insecticides est de plus en plus évité.

---

- 28 -
2) La lutte biologique
A cause des méfaits des insecticides, la possibilité de limi-
ter la pullulation des Helio~ en utilisant des entomophages et des_ento-
mopathogènes a été envisagée dans plusieurs pays.
a) gti~i~~ti~~_~:~~~~~2~~g~~
Dans la littérature, on ne relève qu'un nombre peu impor-
tant d'entomophages employés contre ces He~ot~.
~ T~chog~ma ~nutum parasite des oeufs des H~ot~, a été testé
.1
dans des champs de maïs au Texas en 1933 contre H. ab~o!eta et en Virginie
en 1935 contre H. zea. Au Tennessee, 4000 individus ont été lachés par se-
maine et ceci pendant 4 semaines dans un champ de tomates pour venir à bout
des H. zea
mais comme au Texas et en Virginie, les résultats n'ont pas
été satisfaisants (HARDWICK, 19&5).
~ P~atkiphtep~ !eaviuoeulU6 (Hémiptère) importé du Pérou au Texas en
1941, o~uo ~~idio~uo
(Hétéroptère) importée d'Iowa et du Missouri à Hawaï
en 1951 et enfin Che!onuo nanay~ (Hyménoptère) importé de l'Inde à Hawaï
en 1957 pour lutter contre H. zea n'ont pas été efficaces (OATMAN, 1978).
Depuis les résultats positifs enregistrés aux U.S.A. dans
la lutte contre le hanneton japonais, Pop~a japo~ea, par traitement des
champs infestés à l'aide de spores deBa~uo pop~ae, l'attention des
chercheurs est attirée sur l'intérêt de certaines maladies d'Insectes en
défenses de culture. Mais le problème qui se pose, c'est la sélection des
germes. En effet, la sélection des germes doit se faire selon des critères
précis dont les plus importants sont la spécificicé vis à vis de l'espèce nuisi-
ble avec peu ou pas de pathogénicité à l'égard d'autres insectes, la pro-
duction en grande quantité des germes et la conservation de ces germes.
En ce qui concerne les Heliotw, un certain nombre de
germes ont été sélectionnés et testés. Il s'agit de BacLU..uo thwU.ng~euo~,
des virus de la
polyédrose nucléaire d'Ho ~ge~a et d'Ho zea et de
V~mo~ha neeatkix.
~ Les spores de B. thu~gie~~ ont été utilisées dans le champ de maïs,
aux U.S.A., contre H. zeQ~ mais les résultats obtenus n'ont pas été satis-
faisants car les dommages causés à ce champ de maïs n'ont pas été réduits
(HARDWICK, 1965).

---

- 29 -
X Des
polyédroses spontanées ont été observées dans des populations
naturelles d'Ho zea et d'Ho anmige4a dont elles limitent le développement.
A Bouaké (Côte d'Ivoire), en novembre 1970, a eu lieu une tentative d'ap-
plication du virus de la
polyédrose nucléaire d'Ho anmige4a en zones cul-
tivées ; malheureusement, le programme d'observations n'a pu être réalisé.
Mais en 1971, le vi rus de la polyédrose nuclaire d' H. zea importée des
U.S.A. et testée sur H. anrnige4a en comparaison avec le virus de la polyé -
drose nucléaire d'Ho a4mige4a, s'est montrée moins efficace que cette
dernière (DELATTRE,
1973). A Bébédjia (Tchad) en 1971, la
polyédrose
nucléaire d'Ho anrnige4a a été utilisée contre H. ~ge4a sur une parcelle
de coton. Une étude des populations des chenilles et des dégats en cours
de campagne a montré que le virus n'a aucune action apparente (DELATTRE,
1973) •
x FUXA et BROOKS (1979) ont utilisé, en Caroline du Nord (U.S.A.) des
préparations de spores de V~o4pha ne~x contre H. zea
et H. vi4e6-
eUh. Selon eux, la suspension de spores de V. nee~x mélangée à de la
farine de mais et répandue sur les feuilles de tabac à raison de 2,5.10 12
spores/ha, réduit sensiblement la densité de population d'Ho vi4e~een6
ainsi que les dommages qu'elles causent. La suspension de spores utilisée
seule contre H. zea sur le sorgho et le haricot à raison de 3,2.10 13 spores/
ha n'a pas réduit sensiblement la population de cet Insecte ainsi que les
dégats causés.
Le comportement des Insectes qu'il soit guidé par des sti-
mulii généraux, alimentaires ou sexuels, présente un grand intérêt pour la
maîtrise des populations de ceux-ci. L'utilisation du comportement sexuel
des Helio~ dans des programmes de lutte intégrée a été abordée à Bébédjia
(Tchad) par BRADER-BREUKEL (1970) pendant la campagne cotonnière de 1969,
il a d'abord utilisé des pièges individuels (sexuels) contenant une femelle
vierge, puis des pièges permanents (lumineux) à partir de fin août. Ces
pièges ont été placés dans la masse des cotonniers et en dehors des champs.
Pendant la troisième décade de juillet et durant le mois d'août, les captu-
res ont été assez régulières ; de septembre jusqu'à la fin de novembre,
elles étaient plutôt rares. L'expérimentation, commencée trop tard dans la
saison, ne lui a pas permis de tirer des conclusions sur les différences
de comportement des pièges par rapport aux champs de cotonniers.

---

- 30 -
La lutte
culturale (manipulations des dates de Semences et
recherche des variétés dE~ plantes résistantes) a été envisagée aux U.S.A.
pour tenter de réduire 1E~s dégats causés par H. ze.a (DAXL, 1977 ; HARDWICK,
1965) .
3) La lutte combinée
La combinaison des diverses méthodes de lutte
en vue de ré-
duire la population
des He.tio~~ dans les champs a retenu l'attention de
beaucoup de chercheurs.
A Bébédj ia (Tchad) en 1971, un essai en champ de coton combi-
nant la lutte culturale, la lutte microbio1ogique et la lutte chimique a
été réalisé. Les auteurs ont en effet utilisés les variétés "BJA" sélec-
tionnées pour la "résistance" aux chenilles des capsules, le virus de la
po1yédrose nucléaire d"H. aJl.m<.ge.Jta. et l'endrine. Ils ont obtenus les ré-
sultats regroupés dans 1E~ tableau ci-dessous.
Variétés
Trai temEmts
% capsules
Productivité
chenillées
kg/ha
B.J.A.
non traité
16,3
1390
chimiquE~
5,2
1658
Virus
15,6
1201
Virus + endrine
5,3
1504
On constate dans ce tableau,
l'efficacité évidente de l'endrine et du mé-
lange virus-endrine (DELATTRE, 1973).
Dans un essai réalisé à Bouaké (Côte d'Ivoire) en champs de
coton en 1971, à un témoin chimique étaient comparés
- la virose nucléaire d'Ho aJl.m<.ge.Jta
- la
po1yédrose nucléaire d'Ho ze.a
- BaULtU6 ~hwUYLgie.~,0.s
Ces différents germes ont été testés seuls, ou en combinaison
entre eux ou avec l'endrine seule ou avec l'endrine-D.D.T. Les résultats

---

- 31 -
obtenus par ces auteurs sont regroupés dans le tableau suivant
Traitements
Population d'
% capsules
Rendement
H. aJl.Ini.9e.Jta.
chenillées
kg/ha
aux 100 m2
VHZ
358
62,0
361
VHZ+endrine
335
42,4
1430
WZ+endrine+DDT
210
20,0
1958
VHZ+VHA
281
57, 1
552
VHA+B.t.
392
1051,0
610
VHA+endrine
297
40,1
1392
WA+endrine+DDT
184
18,9
1717
VHZ+VHA+B.t.
254
53,1
227
Endrine+DDT
180
21,4
1776
VHZ = Virus d'H.ze.a ; VHA = Virus d'Ho ~ge.~a
B. t • = Bacû..R..lk6 thwUngJ.e..YL6L6.
Ces résultats montrent la supériorité très nette des produits chimiques
(endrine + DDT et endrine seule), l'inefficacité de la polyédrose
nucléaire
d'Ho ze.a et la relative efficacité de la polyéè.rose
nucléaire d'Ho aAm/.ge.Jta.
et la faible action de B. thunJ.ngJ.e.nôL6 vis à vis d'Ho ~mJ.ge.~a (DELATTRE,
1973) .
III - CONCLUSIONS
Il ressort de ce chapitre que les Lépidoptères du genre He.iJ.o-
~ posent de sérieux problèmes économiques et agronomiques dans beaucoup
de pays. Pour limiter leur pullulation, on intervient souvent par la lutte
chimique ; cette méthode de lutte classique, largement pratiqu~, est suscep-
tible toute fois de provoquer l'apparition des races résistantes dans un
avenir plus ou moins lointain. De ce fait, la possibilité de lutter contre
les He.iJ.othL6 en utilisant des moyens biologiques non polluants et présen-
tant l'avantage d'agir sélectivement contre ces Insectes nuisibles est de
plus en plus envisagée.

---

2e PARTIE
Nosema manierae
n.sp.,
Parasite
de
Chilo zacconius Blez.,1970
Et son hôte expérimental,
Heliothis armigera Hübner,1808

---

- 35 -
CHAPITRE 1
L'HÔTE EXPÉRIMENTAL:
HELIOTHIS ARMIGERA HUBNER, 1808
La souche d'Heliot~ aromige~ qui a servi à nos expériences nous
a été fournie par Messieurs COUILLOUD et GIRET, Chercheurs au Laboratoire
d'Elevage et de Nutrition des Insectes de la section I ..R.C.T. du G.E.R.D.A.T.
à Montpellier.
l - ÉLEVAGE D'Hel~oth~~ a~m~ge~a
La technique d'élevage d'Ho aromige~ retenue dans notre Laboratoire.
est la technique classique utilisée au G.E.R.D.A.T. L'ensemble de l'élevage est
mené dans les conditions suivantes :
- température : 25° C - 27° C
- humidité relative
70-75 %
- photopériode : 12 h, scotopériode
12 h.
1°) Composition et préparation du milieu nutritif
Le milieu nutritif artificiel utilisé pour l'alimentation des chenil-
les est de composition relativement simple. Il s'agit d'une formule mise au point
au G.E.R.D.A.T. pour l'élevage spécifique des Hetiot~. La formule employée est
la suivante :
- support
eau
388 cc
Agar
1 1.4 g

---

- 36 -
PLANCHE 1
Elevage d'Ho anmigena Hübner.
Figure 1
Bottes-pondoirs.
Figure 2
Bottes d'incubation.
Figure 3
Bottes de dimension 260 x 130 x 77 mm servant à l'élevage
des larves âgées.

---

PLANCHE 1

---

- 37 -
- Constituants alimentaires et nutritionnels
Farine (semoule) de mais
63,9 g
Germe de blé
16
g
Sels minéraux
5
g
Levure de bière
17,1 g
Vitamine "Diet fortification mixture"
5
g
Acide ascorbique
2,3 g
Choline chlorure
2,5 g
- Agents antimicrobiens
Nipagine (Parahydroxybenzoate de methyl)
0,6 g
Acide benzoique
0,7 g
Chlorhydrate d'auréomycine
0,05 g
Sont mélangés à sec: semoule de mais, germe de blé, levure de bière, vita-
mine, sels minéraux, nipagine, acide benzoique et chlorhydrate d'auréomycine.
Dans un peu d'eau, prélevée sur la quantité totale, sont dissouts : acide
ascorbique et choline chlorure. On verse l'agar dans l'eau chauffée préala-
blement à 60 0 et on porte cette bouillie à l'ébullition tout en agitant. On
laisse refroidir l'eau et l'agar jusqu'à 55 0 C et on ajoute alors, tout en
remuant de plus en plus fort et de plus en plus vite, le mélange sec des pou-
dres ainsi que la solution des deux produits. Le mélange pâteux refroidi
jusqu'à 45 0 C est coulé rapidement dans des boîtes en plastique. Ces boites
de milieu sont stockées au réfrigérateur.
2°)
Technique d'élevage
De nombreux auteurs ont décrit des méthodes d'élevage pour H. aAmi-
g~a
Vandamme et Angelini (1968) ; Angelini et Labonne (1970)
Poitout et
Bues (1970) ; Poitout et Bues (1974). La technique que nous avons employée
dérive de ces diverses méthodes ; des modifications ont été apportées par
Couilloud et Giret (1978) pour permettre un élevage collectif de tous les
stades larvaires, de diminuer les manipulations et d'augmenter le rendement.
Les papillons d'Hetio~~ aAmige~ sont élevés par groupe de
5 couples dans des boîtes-pondoirs cylindriques de 115 mm de diamètre et de
215 mm de hauteur en polystyrène transparent blanche. Une gaze, maintenue
tendue par le couvercle de la boite, sert de support de ponte. De l'eau sucrée
à 10 % est offerte aux insectes dans une boîte-abreuvoir en plastique de 28 x
35 mm munie d'un coton dentaire. Une lame de carton, placée verticalement et
en travers dans la boîte-pondoir, sert de support de repos (Planche l, fig.
1).
Quelques oeufs sont pondus sur l'abreuvoir et sur la lame de carton. Mais
les femelles déposent la grande majorité de leurs pontes sur la gaze. Les
oeufs sont isolés. Tous les jours, la gaze est prélevée et remplacée.

---

- 38 -
PLANCHE 2
Elevage d'Ho ~mige~ Hübner.
(suite)
Figure 4
Boîtes de nymphose ouvertes, montrant les larves âgées.
Figure 5
Boîtes où à lieu l'émergence des adultes.
Figure 6
Elevage en boîte individuelle.

---

PLANCHE 2

---

- 39 -
b) .!g~!!bati~!!~~L~~!!fs
La gaze de ponte prélevée chaque jour est placée à la partie supé-
rieure d'une boîte en plastique cylindrique de 105 mm de diamètre et de 73
mm de hauteur (Planche 1 ; fig. 2) ; elle est maintenue en place par le cou-
vercle grillagé de la boîte. Un ou deux jours avant l'éclosion, les pontes
noircissent du fait de l'apparition des capsules céphaliques foncées des fu-
tures larves.
Le milieu nutritif artificiel, en prévision des éclosions est dé-
posé sous forme de cubes dans le fond de la boîte-éclosoir ; les chenilles
nouvellement nées commencent à coloniser le milieu environ 48 h après leur
éclosion. Les jeunes chenilles sont élevées de cette manière pendant les
premiers stades larvaires. Lorsque la densité des chenilles le nécessite, ces
dernières sont transférées dans des boîtes de volume plus important : soit
260 X 130 X 77 mm, soit 288 X 278 X 90 mm dont les couvercles sont toujours
grillagés sur le maximum de leur surface (Planche 1 ; fig. 3). Le milieu est
toujours présenté sous forme de cubes répartis sur l'ensemble du fond de
boîtes. Les chenilles sont nourries tous les 2 ou 3 jours.
A partir du 3è ou 4è stade, les larves sont transférées dans des
boîtes de dimensions 260 X 130 X 77 ou 288 X 278 X 90 mm spécialement prépa-
rées pour la nymphose. Dans le fond des boîtes, on dispose une couche de ver-
miculite d'une épaisseur d'environ 3 cm recouverte par une feuille de papier
filtre de la dimension de la boîte. Le milieu nutritif est déposé sur ce pa-
pier (Planche 2 ; fig. 4). Au terme de leur développement, les chenilles pénè-
trent dans la vermiculite où elles façonnent une loge de nymphose. En fin de
nymphose, les chrysalides sont enlevées de la vermiculite et mises en boîtes
collectives où à lieu l'émergence des adultes (Planche 2 ; fig. 5) ; ceux-ci
sont relevés tous les jours et mis dans des boîtes-pondoirs. Notons par
ailleurs que l'élevage des larves d'Ho akmige~ que nous avons réalisé pour
nos expériences, s'est reposé sur le principe d'un élevage individuel pendant
une partie du développement. Les chenilles sont placées individuellement dans
des boîtes rondes de 45 X 15 mm, en plastique, dont le couvercle est grilla-
gé (Planche 2 ; fig. 6) ; on place simultanément un cube du milieu nutritif.
Elles sont ensuite renourries tous les deux ou trois jours. La nymphose a
lieu dans une loge façonnée dans les restes de milieu nutritif non consommés
mélangés aux éxcréments. Les boîtes ayant servi pour l'élevage sont trempées

---

- 40 -
PLANCHE 3
Oeufs d' H. cvr.m-i.ge.Jta. en microscopie à balayage.
Figure 7
Oeuf d'Ho cvr.m-i.ge.~a. La surface du chorion est parcourue par
plusieurs côtes (X 187).
Figure 8
Région micropylaire d'un oeuf d'Ho cvr.m-i.ge.Jta. (X 1440).
Abréviations
C = côtes
R = rosette·
R.M
région micropylaire.

---

PLANCHE 3

---

- 41 -
pendant 24 h dans de l'eau de javel dilué puis lavées, rincées et placées
pendant 4 jours à l'étuve assurant une température de 45° C.
II - DESCRIPTION DES DIFFËRENTS STADES DE DËVELOPPEMENT
Les différents stades de développement d'Ho ~geka ont été
briévement décrits par plusieurs auteurs: HARDWICK (1965), HILL (1975),
POITOUT (1972), TUNSTALL (1977). Nous complétons ces descriptions par une
étude de la chétotaxie et des pièces buccales des différents stades larvai-
res. Les quatre étapes du développement sont étudiés successivement: oeuf,
chenille, chrysalide et papillon.
1°) Les oeufs (Planche 3, fig. 7 et 8)
Les oeufs d'Ho ~9eka sont entourés d'un chorion épais dont la
surface est parcourue verticalement par plusieurs côtes bien apparentes
(Planche 3, fig. 7). Ces côtes dessinent, au pôle micropylaire, une rosette
qui entoure le micropyle (Planche 3, fig. 8). Ces oeufs sont subsphériques
et mesurent 0,4 à 0,5 mm. Ils sont collés isolément au support. De couleur
jaunâtre à l'oviposition, les oeufs fécondés prennent 24 heures après leur
émission une couleur brune, puis à la fin du développement embryonnaire, la
capsule céphalique sombre de la chenille apparaît par transparence. L'incu-
bation des oeufs dure 2 à 3 jours.
2°) Les chenilles (Planche 4, fig. 9)
L'état larvaire d'Ho aromige~a comprend 5 à 6 stades (observations
personnelles). Selon POITOUT (1972), le nombre de stades larvaires varie
suivant les individus et, pour une population donnée, suivant l'alimentation
et la température. Cet auteur a constaté qu'à la température de 25° C, sur
graines de pois, 30 % des larves passent par 5 stades, 69 % en ont 6 et 1 %
7 ; sur un milieu artificiel à base de feuilles de chou, de graines de maIs,
il arrive que 95 % des chenilles passent par 5 stades. Pour identifier les'
larves des différents stades, aux caractères généraux (dimension des capsu-
les céphaliques, taille des larves), nous avons ajouté la chétotaxie com-
plète de chaque stade.
La larve nouveau-née est de couleur grisâtre et au terme de ce
premier stade elle mesure environ 2,90 mm. La calotte céphalique (Pl. 5,

---

- 42 -
PLANCHE 4
Différents stades de développement dlHeliot~ anmigeka Hübner.
Figure 9
Larves de dernier stade (X 2,5)
Figure la
Nymphes (X 2,5)
Figure Il
Adultes (X 2)

---

PLANCHE 4

---

- 43 -
fig. 18) est noir-brun et porte plusieurs soies ; la plaque prothoracique
et l'écusson anal sont brun-sombre. Les segments thoraciques portent chacun
une paire de courtes pattes articulées et terminées par une griffe ; ces
segments portent également plusieurs soies dont la distribution varie d'un
segment à l'autre: le prothorax porte 20 soies (Pl.~5, fig. 12), le méso-
thorax 16 soies (Pl. 5, fig.
13) et le méthathorax 16 soies (Pl. 5, fig.
14).
Les segments abdominaux, au nombre de Il dont les deux derniers sont soudés,
portent plusieurs soies inégalement réparties : le 1er est recouvert de 18
soies (Pl. 5, fig. 15), le 2è de 20 (Pl. 5, fig.
16), les 3è, 4è, 5è et 6è
segments portent chacun 12 soies et une paire de fausses pattes non arti-
culées, munies chacunes d'une rangée de 5 crochets disposés en arc (Pl. 5,
fig.
17). Les 7è et 8è segments portent chacun 16 soies (Pl. 5, fig.
19) ;
le segment anal (Pl. 5, fig. 20) porte une paire de fausses pattes terminées
par une rangée de 6 petits crochets (Pl. 5, fig. 21). Les 8 premiers segments
abdominaux portent tous 2 paires de stigmates ovales.
Les larves de 2è stade sont légèrement jaunâtres; leur calotte
céphalique est brun-foncé alors que l'écussion prothoracique et anal devien-
nent ûn peu plus clairs. Les sclérites sur lesquels sont implantées les soies
sont sombres et bien visibles.
La chétotaxie des L
est la même que celle des LI ; les pattes abdo-
2
minales sont munies d'une rangée de 6 crochets tandis que les pattes anales
en possède 8 disposés en arc (planche 6, fig. 22 et 23).
La capsule céphalique des L
est brun-clair, ma~s le clypeus
3
reste brun foncé. Leur corps est brun-orangé et les sclérites portant les soies,
de couleur brun-foncé apparaissent nettement sur tout le corps de la chenille.
Sur la face dorsale et sur les flancs de ces larves apparaissent de fines
bandes longitudinales blanches. Les fausses pattes abdominales sont terminées
par une rangée de 12 crochets (Planche 6, fig. 24) alors que les anales pré-
sentent une rangée de 16 crochets (Planche 6, fig. 25). La répartition des
soies sur le corps des larves de 3è stade est la même que celle observée chez
les larves de 1er stade.

---

- 44 -
PLANCHE
5
Chétotaxie des larves de premier stade d'Ho ~ge~a.
Figure 12
Répartition des soies sur la moitié droite du prothorax.
Figure 13
Répartition des soies sur la moitié droite du mésothorax.
Figure 14
Répartition des soies sur la moitié droite du métathorax.
Figure 15
Répartition des soies sur la moitié droite du premier seg-
ment abdominal.
Figure 16
Répartition\\des soies sur la moitié droite du deuxième seg-
ment abdominal.
Figure 17
Répartition des soies sur la moitié droite du troisième
segment abdominal.
Figure 18
Capsule céphalique.
Figure 19
Répartition des soies sur la moitié droite du septième seg-
ment abdominal.
Figure 20
Répartition des soies sur les neuvième et dixième segments
abdominaux.
Figure 21
Crochets des pattes anales.

---

PLANCHE 5
illl~ll i@
I - - - t
"
\\5mm
.....---
O.70mm

---

- 45 -
La couleur générale de la capsule céphalique des larves de ce
stade est orangée et le clypeus brun-foncé. Le tronc grisâtre ou verdâtre
est parcouru, dorsalement par plusieurs bandes blanchâtres fines et par deux
bandes sombres séparées par une fine bande blanchâtre et latéralement par une
bande blanchâtre large. L'écussion prothoracique est brun-foncé. La distri-
bution des soies sur le prothorax est différente de celle observée chez les
trois premiers stades car, ici, on ne note que 16 soies sur le prothorax
(planche 6, fig. 26). Les pattes abdominales possèdent une rangée de 15
crochets (planche 6, fig. 27) tandis que les anales
possèdent une rangée
de 18 crochets (planche 6, fig. 28).
• 1!!:~~_~L~~15_i~l~~~~_2L.
Les larves de 5è stade sont grisâtres, verdâtres ou encore
jaunâtres. Sur la face dorsale on note plusieurs petites bandes longitudi-
nales sombres séparées par une ligne blanchâtre, les flancs sont parcourus
par une bande blanchâtre large. La capsule céphalique est orangée et l'écus-
son prothoracique est brun-foncé parsemé de petits points blanchâtres. Sur
les pattes abdominales, on voit 16 crochets (planche 6, fig. 29) et sur les
anales 19 (Planche 6, fig. 30). La chétotaxie est la même que chez les L4
Au terme de leur croissance, les larves d'Ho akmige~ sont
grisâtres, jaunâtres ou encore verdâtres. La capsule céphalique, de
couleur orangée, est globuleuse et porte plusieurs soies ; sur les genae
se trouvent les stemmates au nombre de 6.
Les antennes possèdent 3 articles, le dernier est très court et
porte 2 soies; une longue et une courte. Le labre transversal et aplati,
est échancré en son milieu; il porte 6 paires de soies sur la face dorsale.
Chacune des maxilles se compose d'un cardo, d'un stipe portant deux soies
et d'une partie libre comprenant deux éléments successifs en forme d'anneaux
incomplets et de deux petites pièces terminales: l'une externe, est le
palpe maxillaire biarticulé, l'autre interne, est le lobarium. Les mandibules
de couleur brune, possèdent une pointe à 4 dents noires.
Le labium comporte un submentum, un postmentum et un prémentum.
Les deux premiers sont soudés aux maxilles, le deuxième libre est formé d'un
sclérite basilaire, d'une filière à la forme d'un tube allongé et pointu

---

- 46 -
PLANCHE6
Chétotaxie des larves de 2è, 3è, 4è, 5è et du dernier stade
d' H. aJtrrK.ge.tr.a..
Figures 22 et 23 : Crochets des pattes abdominales (fig. 22) et des
pattes anales (fig. 23) des L2.
Figures 24 et 25 : Crochets des pattes abdominales (fig. 24) et des
pattes anales (fig. 25) des L3.
Figures 26, 27 et 28 : Répartition des soies sur la moitié droite du
prothorax (fig. 26) et crochets des pattes abdominales (fig.
27) et anales (fig. 28) des L4.
Figures 29 et 30 : Crochets des pattes abdominales (fig. 29) et des
pattes anales (fig. 30) àes L5.
Figures 31 et 32 : Crochets des pattes abdominales (fig. 31) et des
pattes anales (fig. 32) des larves de dernier stade.

---

PLANCHE 6
O.70mm
>-----<
l~llÜ ~
@
@
21M1
l - - - t
2mm
> - - - - - - 0

---

- 47 -
à son extrêmité et de deux palpes labiaux courts composés de 2 articles
portant chacun une soie à son extrémité. Les segments thoraciques portent
chacun une paire de pattes brunes présentant une griffe et plusieurs soies.
L'abdomen porte 4 paires de fausses pattes ornées chacune d'une
rangée de 18 crochets (planche 6, fig. 31) et une paire de pattes annales
portant une rangée de 22 crochets disposés en arc (planche 6, fig. 32).
De l'éclosion à la chrysalide, les larves d'Ho anmige~a effectuent
comme nous l'avons signalé plus haut, 5 à 6 mues. A chaque mue, les chenil-
les augmentent de taille et rejettent leur capsule céphalique; la longueur
des larves
,la largeur des capsules céphaliques et la durée de vie des
différents stades larvaires sont représentées avec leur écart-type
dans le
tableau 3.
3°) Les chrysalides (Planche 4, fig. 10)
Les chrysalides d'Ho anmige~a sont de la catégorie dite "obtectée"
elles sont recouvertes d'une cuticule de couleur brune. La segmentation est
bien visible sur la tête, le thorax et l'abdomen; mais ces trois parties
sont entièrement soudées entre elles ; seuls les derniers segments abdominaux
sont mobiles.
• La tête. Sur la face ventrale on peut distinguer: le clypeus, les yeux
grands et bien délimités, les deux antennes qui s'étendent entre les fourreaux
des ailes antérieures et les gaines des pattes et
la gaine de la trompe. Sur
la face dorsale n'apparaît que le vertex.
• Le thorax. Les segments thoraciques sont cachés ventralement et latéra-
lement par les ailes et les appendices mais ils sont bien distincts du côté
dorsal. Comme chez les imagos, le prothorax est réduit tandis que le méso-
thorax est très développé. Les pattes sont facilement identifiables sur la
face- ventrale.
En partant de la ligne médioventrale, on trouve: la trompe, la coxa
antérieure, une patte antérieure, une patte médiane, une antenne et une aile
antérieure dont l'extrémité distale atteint le voisinage du bord postérieur
du 4è urite. Les pattes postérieures sont cachées par les ailes antérieures.
Quant aux ailes postérieures, elles ne sont visibles que sur la face dorsale.
• L'abdomen comprend la segments bien délimités, sauf les derniers. Sur la
face latérale on voit 6 paires de stigmates s'ouvrant au sommet de petites

---

dernier
STADES
LARVAIRES
I
II
III
IV
V
stade
cycle à
Longueur
2.71:!;0,21 4, 95:!;0, 13 9,85:!:0.38 18, 7:!: 1,7
-
33,1:!:0,83
5 mues
moyenne
des larves
cycle à
(en mm)
2,71:!:O,21 4, 95:!:0, 13 9,85:!:0,38 14.8:!;0,5 tO,65:!:O,18
6
33,12:°,83
mues
cycle à
Largeur
0.27:!:0,02 0,47:!:0,03 0,79:!:0,08 1,39!0,03
-
2.59!0.08
.p-
5 mues
oo
moyenne des
capsul es
cycle à
céphaliques
0.27:!:0,02 0,47:!:0.03 0, 79:!:0,08 1,18:!;0,03 1,79:!:0,01 2,59:!:0,08
6 mues
(en mm)
cycle à
Durée moyen-
3.092:0.41 2,87:!:0,30 2.192:0,43 2.97:!:0,21
-
3,28:!:0.8
5 mues
ne de vie
(en jours)
1
cycle à
3.092:°,41 2,87:!:0,30 2, 19:!:0, 37 2,412:°,37 2,392:0,38 3.282:0.8
6 mues
TABLEAU 3
Taille, largeur de la capsule céphalique et durée de vie des larves
d ' H. Mm{.g etz.a. •

---

- 49 -
éminences. Les 5è, 6è et 7è segments portent à leur bord antérieur de peti-
tes dents réparties sur toutes les faces. Sur le côté ventral, le 9è urite
de la chrysalide mâle porte un orifice génital représenté par une fine dé-
pression encadrée de deux saillies arrondies, sur le 10è urite se trouve
l'anus représenté par un sillon longitudinal. Les 9è et 10è urites de la
chrysalide femelle présentent un contour irrégulier comme s'ils avaient
été étirés antérieurement sur la ligne médioventrale . Le sillon génital
est situé au sommet de l'angle saillant du 9è urite alors que l'orifice anal
est situé sur le 10è urite. Chez le mâle comme chez la femelle, sur le 10è
urite prennent directement naissance deux épines ou crémasters.
4°) Les adultes (Planches 4, fig. Il)
Ce sont des papillons de 35 à 40 mm d'envergure. Le corps est di-
visé en trois parties : la tête qui porte les antennes, les yeux et la bou-
che avec les pièces buccales, le thorax est muni de trois paires de pattes
articulées et de deux paires d'ailes, l'abdomen est dépourvu d'appendices.
Le mâle est gris-vert alors que la femelle est brun-orangé. Les
ailes antérieures sont ornées, le long de leur marge extérieure d'une ligne
,
de 7 à 8 points noirâtres et vers leur tiers terminal, d'une bande brune
transverse marquée de points clairs à centre noir. Les ailes postérieures
sont claires, marginées de jaunâtre et traversées d'une large zone foncée.
III - BIOLOGIE DES H. a~m~ge~a
La biologie des populations naturelles d'Ho ~g~ a été étudiée
par beaucoup d'entomologistes dont: HARDWICK (1965), HILL (1975), POITOUT
(1972), TUNSTALL (1977). Il ressort de ces études que les adultes ont des
moeurs nocturnes. Ils se nourrissent du nectar des fleurs et déposent les
oeufs sur diverses plantes, plus particulièrement sur le mais, la tomate,
le coton, le tabac, le lin. Les oeufs sont déposés de préférence sur des
plantes qui fleurissent ou sur celles dont la floraison vient d'avoir lieu.
Les données laissent à penser que les femelles choisissent des plantes par-
venues à un stade végétatif particulier.
Les chenilles néonates parcourent leur support pendant un laps de
temps relativement bref en mordillant par places les soies, s'il s'agit de
mais, ou l'épiderme ~'il s'agit de tomate ou de cotonnier. Peu de temps
après leur naissance, elle pénètre à l'intérieur de la plante hôte. Sur le

---

- 50 -
PLA N CHE 7
Génitalia mâle et femelle en microscopie à balayage d'Hetio~
(= Hetieov~pal
~geAa.
Figure 33 : bourse séminale et bourse copulatrice (X 57).
La bourse séminale est spiralée.
Figure 34 : Pénis (X 24).
Remarquez que le pénis est pourvu d'épines (flèches).
Abréviations
B.e.
bourse copulatrice; B.E. = bulbe éjaculateur
B.S. = bourse séminale; P = pénis.

---

PLANCHE 7

---

- 51 -
mais, les jeunes larves, sous l'abri des spathes, gagnent le sommet de l'épi
et dévorent les grains en formation; sur la tomate, les chenilles forment
une galerie dans les jeunes fruits et sur le cotonnier, elles attaquent les
fleurs et les bourgeons. Arrivée au terme de leur développement, les larves
s'enfoncent dans le sol pour se nymphoser. La vie de l'Insecte dure environ
7 semaines dont deux à trois jours pour l'incubation des oeufs, une quin-
zaine de jours à l'état de larve, une quinzaine de jours au stade chrysalide
(chez la femelle, la durée du stade chrysalide est légèrement plus courte
que chez le mâle) et une vingtaine de jours au stade adulte. L'accouplement
et la ponte ont lieu 2 à 4 jours après l'apparition des adultes. La fécon-
dité des femelles est remarquable, car chacune peut pondre plus de 2000 oeufs.
IV - POSITION SYSTtMATIQUE
Signalé sous le nom de Noc:tua. baJtbaJta. (Fabricius, 1794) puis de
Noc:tua ~g~ (Hübner, 1808), entre autres, cette Noctuelle a été nommée
He~o~ ~ge~ par Treitschke en 1827 (Hardwick, 1965). Pendant des an-
nées, plusieurs Noctuelles faisant partie de ce que Hardwick a appelé le
"complexe des corn-earworm" seront considérées comme appartenant toutes à
cette seule et même espèce cosmopolite. Ce n'est qu'à partir de 1953 que
des séparations ont été faites et six espèces ont été alors reconnues :
Hetiot~ zea (Boddie, 1850) en Amérique; H. getotopoeon (Dyar, 1921) en
Amérique du Sud; H. anmKg~a et H. a6~utta (Guenée, 1852) en Afrique, Asie
et Europe; H. punctige~ (Wallengren, 1860) en Australie ; et H. haw~en­
~~ (Quaintance et Brues, 1905) aux Isles Hawai.
En 1965, HARDWICK après avoir décrit Il espèces et deux nouvelles
sous-espèces, montre que les Insectes appartenant
au ~omplexe des corn-
earworm" sont assez différentes sur le plan taxonomique de l'espèce type du
genre Hetiot~ (He~t~ dip~aeea L.). Pour désigner ce groupe, il crée
un nouveau genre, Helieov~pa, en tenant compte de la présence d'écailles
spécialisées sur la face inférieure des fémurs des mâles
et de la struc-
ture des appareils génitaux mâles et femelles.
- Chez les Hetiot~ : absence d'écailles spécialisées, pénis dé-
pourvu d'épines ou cornuti (planche 8, fig. 35), bourse séminale non spi-
ralée (planche 8, fig. 36).

---

- 52 -
PLANCHE
8
Schémas théoriques des génitalia mâle et femelle chez les genres
Hetio~ et H~eove~pa.
Figure 35 : Génitalia mâle d'Hellot~ dip~aeea. Le pénis est dépourvu
d'épines.
Figure 36 : Génitalia femelle d'Ho dip~aeea. La bourse séminale n'est pas
spiralée.
Figure 37 : Génitalia mâle d'H~o~ (= H~eov~pal
anmi9~a. Le pénis
est pourvu d'épines.
Figure 38 : Génitalia femelle d'Hello~ (= H~eove~pa)
anmige~.
La bourse séminale est spiralée.
Abréviations : B.C. = bourse copulatrice
B.E. = bulbe éjaculateur ;
B.S. = bourse séminale; C.C.
canal copulateur; C.E. = canal
éjaculateur ; C.S. = canal séminal; P = pénis.
Remarques
Les figures 35 et 36 sont de Hardwick, 1965.

---

PLANCHE 8
p
e.e ---------1...-'
':":'roIII--- B. 5
e.E
B.e ---4~\\i:':.
E
E
N
p
: : : ' l 4 - - - - B . 5
B.e
B.E
e.5-_~
\\'.+0....- - - - - e.E

---

- 53 -
- Chez les HeliQove~pa : présence d'écailles spécialisées, pénis
pourvu d'épines (planches 7 et 8, fig. 34 et 37), bourse séminale spiralée,
alternativement dilatée et étranglée (Planches 7 et 8, fig. 33 et 38).
Malgré ces différences, POITOUT (1972) signale que ce nouveau genre
a été aussitôt mis en synonymie avec Helio~ par BOURSIN en 1965. Depuis
lors, de nombreux auteurs continuent d'employer le nom générique d'He~ot~,
ce que nous ferons continuellement dans ce travail.

---

- 55 -
CHAPITRE
II
LAM l C ROS paR l DIE PAR A S l T E
NOSEMA. MANIERAE N. SP.
La Microsporidie de Chito zacconiuo a été étudiée chez son hôte
d'origine et chez son hôte expérimental, Helio~ anmige4a. Les deux tech-
niques classiques ont été utilisées.
- La microscopie photonique, essentiellement pour suivre le cycle de dé-
veloppemen t ;
- La microscopie électronique, pour observer et tenir compte de la struc-
ture fine des différents stades de développement.
l -
ET UD E DUCY C LED E DÉ V ELa P P E MEN T (Observations
en microscopie photonique).
1°/ Méthodologie
a) ê~E_!~~~E~~l_~!~~~~.- Le parasite est séparé de l'hôte
par dissection, placé entre lame et lamelle, puis observé au microscope photo-
nique à fort grossissement. Cet examen permet les mensurations des spores.
b) ê~E_!~!~Ei~!_ii!~.- La méthode la plus suivie est celle
des frottis humides
utilisée pour mettre en évidence les noyaux des spores
d'une part, pour visualiser les stades jeunes d'autre part. Nous avons employé
plusieurs colorations :

---

- 56 -
- la coloration de Gi~, dont le but est de colorer les noyaux et de
mieux apprécier la topographie des cellules. Après avoir séché les frottis
pendant 30mnà 60°C, on dégraisse à l'éther 10 mn et on fixe au méthanol
10 mn également; les lames sont ensuite lavées à l'eau distillée et placées
dans une cuve à rainures contenant une solution fraichement préparée de Giemsa
à 5 %, pendant 12 heures environ
on monte ensuite au baume du Canada. Les
résultats sont très bons.
- la réaction de Feulgen (selon GABE, 1968 et MA.~TOJA, 1967). Utilisée
pour mettre en évidence les noyaux des stades microsporidiens les plus jeunes,
la réaction de Feulgen n'a pas été concluante.
- la coloration! l 'hématoxyline, modifiée selon HARRIS
(ZIZKA et coll.,
1979), employée pour colorer les spores et les noyaux. Les lames sont séchées
à l'étuve à 120° C pendant 30 mn, puis passées successivement dans les liqui-
des suivants :
Ether .........••.•......••.. 10 mn
Fixateur de Carnoy ........•. 15 mIl
Eau distillée .•••..••..•.•.. rinçage
Mé thano l
...••..•.•••.••..••. 10 mn
Hématoxyline de Harris .....• 12 heures
Eau courante ..••...••.••.... 10 mn
Eau dis tillée ...•.•.•.•.•••• nnçage
Montage au baume du Canada.
Les noyaux des spores varient du bleu-sombre au rouge.
- la Fuchsine basiqul:' de Delamater (selon GABE, 1968 et MARTOJA, 1967)
utilisée pour mettre en évidence les noyaux des spores, colorés en rouge.
2°/ Les différents stades du cycle
Le cycle de développement des Microsporidies est aujourd'hui mieux
connu, ses différents aspects ayant été mis en évidence. Deux phases le ca-
ractérisent : la mérogonie (ou schizogonie) et la sporogonie. Des frottis de
tissu adipeux ou de tube digestif de larves microsporidiosée
colorés par le
Giemsa, ont révélé plusieurs stades du cycle chez Chifo ZaQQoniU6 et Hetio-
tYviA a.Jl.mi.9e.Jta. •

---

- 57 -
La mérogonie débute au moment où le sporoplasme se divise dans la'
cellule-hôte. Durant la mérogonie, plusieurs formes de mérontes ont pu être
observées .
• Mêrontes binucléés : ce sont des éléments ovoides, globuleux, mesurant
3,4!0,3 pm de diamètre. Les noyaux sont relativement gros et, colorés par le
Giemsa, apparaissent de couleur rouge, le cytoplasme étant bleu clair .
• Mérontes tétranucléés (pl. 9, fig. 41)
: ce sont des éléments sphériques
dont le diamètre moyen est de 4,8!0,5 pm. Les noyaux sont plus gros et dispo-
sés par paires. Cette deuxième catégorie de mérontes peut également être inter-
prétée comme des images de division.
Les deux types de mérontes s'observent surtout chez les larves infes-
tées depuis 48 heures.
Telle qu'elle vient d'être décrite, la mérogonie est comparable à
celle décrite chez No~ema hetio~hi~ (KRAMER, 1959). Par contre, malgré nos
nombreuses observations, nous n'avons jamais observé d'images pouvant faire
penser à une "double" mérogonie ainsi qu'elle a été vue chez No~ema bomb!fw
(WEISER, 1970) et No~ema ~vade~ (KELLEN et LINDEGREN, 1973 b) : pour ces
deux espèces, la mérogonie de premier type est caractéris~e par des noyaux
comptacts, fortement colorés ,(48 à 72 heures après l'infestation) ; dans les
mérogonies de deuxième type, les noyaux sont vacuolaires (au minimum, 72 heu-
res après l'infestation).
La dernière mérogonie aboutit à la formation des sporontes (pl •• 10,
fig. 43). Le sporonte mesure en moyenne 8,5!0,3 pm de long sur 3,8!0,1 pm
de large et présente un diplocaryon. Après division, les noyaux migrent dans
des directions opposées, vers l'extrémité du sporonte. Une seule division bi-
naire du sporonte (pl. Il, fig. 46) donne deux sporoblastes binucléés (diplo-
caryon), allongés et fusiformes, mesurant 6,8!0,4 pm sur 2,9!O,5 ~m (Pl. 12,
fig. 48). Le sporoblaste évolue ensuite en spore.

---

- 58-
PLANCHE 9
Méronte et mérogonie de NO.6ema. ma.rU.vr.a.e.
Fig. 39
Méronte (X 32 000). Sur le diplocaryon, les pores nucléaires
sont indiqués par des flèches.
Fig. 40 et 41 : Deux aspects de la mérogonie avec mérontes à deux diplo-
cayrons (X 24 000). Dans le cercle, le même stade VU en micros-
copie photonique (X 712).
Abréviations
Di = diplocaryon
E
= ergastoplasme
M.R.= mitochondries de l'hôte
M. U. = me:mbrane unitaire du méronte
Ri = ribosomes
V.G.= vacuoles golgiennes

---

PLANCHE 9
..,
.r
,10
~~,
~.""
•.~
... ~..'~. ': ~.", ~
'~',
:..,
',"
',.
.1 .~~'" "
-,

---

- 59 -
c) b~~-!E2E~~ (Pl. 15, fig. 55)
Les spores obtenues après infestation des larves d'H~o~ ~9~
sont ovales et mesurent 4,2 à 5,1 pm de long sur 1,7 à 2,5 pm de large (moyenne
4,11!0,32 pm x 2,41!0,IS ~m). Chez C~o z~eeo~U6, la moyenne est 4,05!0,41
sur 2,43:0,14 pm). L'histogramme de fréquence pour la longueur et la largeur
des spores chez H. ~g~ est donné sur la figure 56. La fuchsine basique
de De1amater permet de mettre en évidence les deux éléments du dip10caryon ;
il s'agit là d'un caractère de No~ema. Nous avons essayé d'obtenir, sans suc-
cès, 1 '.évagination du filament polaire, aucun des produits utilisés ne s'
étant révélé efficace.
Sur le schéma de la figure 57, sont résumées les différentes étapes
de ce cycle de développement.
D'une manière générale, le cycle observé chez la Microsporidie de
H~~ anmigena et Chiio zaceo~U6 rappelle les structures des No~ema des
Lépidoptères et d'autres
Arthropodes (ainsi, plus particulièrement, No~ema
j~ chez le Dip10pode ViploiulU6 londine~~, décrite par WILSON, 1971).
II -
E T UD EDE SUL T RAS TRU CT URE S DES D l F FER E N T S
ST AD E' S DUC y C LED EDE V E L 0 P P E MEN T
1°/ Méthodologie
ttObservations en microscopie électronique à transmission
Les opérations classiques ont été menées suivant le schéma
ci-après;
- Fixation à l'acide osmique tamponné selon PALADE (1952) (pH 7,4), pendant
heure à 0° C. La fixation par l'acide osmique a été utilisée seule ou précé-
dée d'une pré-fixation au glutaraldéhyde à 2,5 % dans le tampon cacodylate de
sodium (0,4 M), l'acide osmique étant alors tamponnée par le même cacodylate.
- Déshydratation ~ pré-inclusion : après passage dans la série des alcools
(30°,50°, 70°, SO°, 90°, 100°), les pièces sont placées dans des bains de
spurr à concentration progressivement croissante (par rapport à la teneur en
alcool).
- Inclusion et coloration : après inclusion dans le spurr, les coupes sont
effectuées avec l'ultramicrotome Porter-Blum, recueillies sur des grilles de

---

- 60 -
PLANCHE 10
Sporontes de No~ema man~e~ae
Fig. 42 et 43 : Deux aspects des sporontes (X 32000). Sur la figure 43,
dans le cercle l• un sporonte vu en microscopie photonique (X 712).
Les pores nucH;aires sont indiqués par des flèches.
Abréviations
C.H.
cytoplasme de l'hôte
Di
= diplocaryon
E
l~rgastoplasme
Nu
= nucléole
P.S. = paroi du sporonte
Ri
ribosomes
V.G. = vacuoles golgiennes

---

PLANCHE 10

---

- 61 -
cuivre, colorées par l'acétate d'uranyle saturé dans l'alcool à 50° , puis
contrastées au citrate de plomb selon REYNOLDS (1963).
- Observations effectuées au microscope ZEISS EM 9 A de notre laboratoire.
4t0bservations en microscopie électronique à balayage.
La microscopie électronique à balayage permet de mettre en évidence
la structure externe du matériel étudié. Nous avons opéré suivant le schéma
habituel.
- Fixation. Il est nécessaire d'obtenir une fixation instantanée des surfa-
ces et le respect des volumes. Pour ces raisons, nous avons utilisé de l'acide
osmique tamponnée selon PALADE (1952) (pH 7,4). Les spores ont été étalées sur
un fragment de lamelle, puis séchées et fixées pendant 1 heure à DoC.
- Déshydratation. Après fixation, les pièces sont lavées à l'eau distillée
et passées dans les séries des alcools 30°,50°, 70°,80°,90°, 100°.
- Point critique.
Le point critique a pour but de remplacer l'eau contenue
dans les pièces par un fluide dont on provoquera le départ en contournant le
point critique, ce qui évite les phénomènes de tensions superficielles. Le
fluide utilisé, dans notre cas, est le COZ' L'élimination du COZ s'est faite
dans une chambre métallique, en forme de cylindre, dans laquelle on peut con-
trôler les conditions de températures et de pression qui régissent la courbe
d'interphase du COZ' L'appareil à point critique utilisé est celui du Labora-
toire de Microscopie Electronique de l'Université des Sciences et Techniques
du Languedoc.
- Métallisation. Après le point critique, c'est-à-dire
la déshydratation,
les pièces sont collées sur des supports métalliques puis revêtues d'une couche
d'or.
- Observations. Elles ont été faites avec le microscope JEOL JSM 35 du Labo-
ratoire de Microscopie électronique de l'U.S.T.L.
2°; Observations
Les mérontes sont des éléments cellulaires plus ou moins sphériques
avec deux noyaux associés en un diplocaryon (Pl. 9, fig. 39). Un nucléole est
souvent visible dans chaque noyau, l'enveloppe nucléaire présente des pores

---

- 62 -
PLANCHE Il
La sporogonie chez No~ema manie~ae
Fig. 44. 45 et 46 : Quelques images de la sporogonie (X 24000~ Sur la
figure 46. dans le cercle, une image de sporogonie vue en mi-
croscopie photonique (X 712).
Abréviations
C.R. = cytoplasme de l'hôte
Di
diplocaryon
E
= ergastoplasme
Ri
ribosomes

---

Pl ANCHE 11

---

- 63 -
relativement nombreux. Les organites cytoplasmiques ne sont représentés que
par des ribosomes uniformément répartis et quelques saccules et vésicules
ergastoplasmiques surtout concentrés autour du diplocaryon. De très rares
vacuoles golgiennes apparaissent en fin d'évolution. Les mérontes sont limités
par une membrane plasmique directement en contact avec le cytoplasme, peu dé-
gradé, de la cellule-hôte.
Les structures observées ici différent profondément des descriptions
de MILNER (1972) chez No~~a whitel: ergastoplasme plus abondant, en saccules
applatis, et paroi épaissie. Les mérontes décrits par MILNER sont-ils réelle-
ment des mérontes ? Par contre, nos observations concordent avec celles de
YOUSSEF et HAMMOND (1971) chez No~~a ap~ et de CANNING et SINDEN (1973) chez
No~~a a.lgvw.e.. La pauvreté en organites cytoplasmiques des stades "mérontes"
(ou schizontes) se retrouve chez bien d'autres Microsporidies appartenant à
des genres différents : Tuz~a de.b~ie.uxi (LOUBES et MAURAND, 1976), O~e.­
JteA-Ul. c..aJtc-i.nA. (vrVARES, BOUIX et MANIER, 1977), AmeAon. pulv~ (VIVARES, 1978),
Bac..ule.a daphniae. (LOUBES et AKBARIEH, 1978). Il est autorisé de conclure que,
aussi bien que la membrane plasmique limitante, la pauvreté en inclusions cyto-
plasmique constitue un bon critère de reconnaissance des stades mérontes. Par
ailleurs, dans certains cas, des difficultés peuvent surgir: ORMIERES, LOUBES
et MAURAND (1977) souligne que, chez Pe.Jte.zia larLkeAte.Jtiae., les stades mérogo-
niques peuvent être limités par une membrane unitaire ou une enveloppe plus
complexe, épaissie.
Quelques images de divisions mérogoniques sont visibles et rappellent
les figures observées en microscopie photonique. Dans les plasmodes à deux di-
plocaryons, il faut noter une plus grande abondance de ribosomes libres, les
autres organites cytoplasmiques restant toujours aussi clairsemés. Les plaques
fusoriales (= centres cinétiques) n'ont pu être analysées avec précision (Pl.
9, fig. 40 et 41).
Les sporontes sont des éléments arrondis, à paroi légèrement ondulée
et plus ou moins décollée du cytoplasme-hôte (Pl. la, fig. 42 et 43). Leur
différenciation est marquée par une réorganisation très nette de l'enveloppe
qui s'épaissit. Cet épaississement est progressif, évolution déjà remarquée
par YOUSSEF et HAMMOND (1971) chez No~~a ap~ où deux couches sont visibles.
D'autre part, le contenu cytoplasmique présente un important remaniement de
l'ergastoplasme qui se groupe en saccules aplatis, bien plus nombreux que dans
le méronte, mais toujours disposés au voisinage du diplocaryon. Le reste du
cytoplasme est occupé par des ribosomes libres et, ça et là, quelques vacuoles
golgiennes.

---

- 64 -
PLANCHE 12
Sporoblastes de No~ema manie~ae
Fig. 47 et 48 : Deux espects des sporoblastes (X 24000). Sur la figure 48,
dans le cercle, un sporoblaste vu en microscopie photonique (X 712).
Abréviations
Di
Diplocaryon
E
= ergastoplasme
F.p
filament polaire
M.R
mitochondries de l'hôte
Ri
ribosomes

---

PLANCHE12

---

- 65 -
Annonciatrices de l'unique division sporogonique, les plaques fuso-
riales se différencient. Elles ont une structure classique, très comparable à
celles décrites chez Ambtyo~po~ b~cteata (VAVRA, 1965) et, surtout chez
Tuzetia debaih~euxi (LOUBES et MAURAND, 1976). Dans une invagination plus ou
moins profonde de l'enveloppe nucléaire, un disque cytoplasmique, opaque aux
électrons, se forme, bordé par un amas granulaire intranucléaire.
La sporogonie est de type disporoblastique, une division binaire du
sporonte donnant naissance à deux sporoblastes. Nous avons pu observer plusieurs
images de cette division sporogonique où il est aisé de retrouver les caractè-
res ultrastructuraux du sporonte mais où la forme annonce déjà les sporoblastes
(pl. Il, fig. 44 et 46).
Les sporoblastes (pl. 12, fig. 47 et 48) sont plus petits que les
sporontes, légèrement plus allongés mais présentant les mêmes caractéristiques
générales (entre autres, présence d'un diplocaryon). Ce stade est souvent sou-
ligné par une accumulation périphérique de mitochondries de la cellule-hôte.
Le cytoplasme devient plus opaque aux électrons, ce qui s'explique par une grosse
augmentation du nombre des ribosomes. L'évolution du sporoblaste débute par la
genèse du filement polaire avec, à l'origine, une concentration de saccules
et de vésicules d'origine golgienne (pl. 13, fig. 49). Dans un premier temps,
une vacuole apparaît au contact du Golgi: la vacuole commune du filament (pl. 13
fig. 49). En s'allongeant, cette dernière servira de matrice aux parties inter-
nes du filament. L'individualisation préalable d'une vacuole a déjà été relevée
par plusieurs auteurs: BERREBI (1978) chez Gtugea athe~ae, LOUBES et
MAURAND (1976) chez Tuz~a deb~~euxi. Par la suite, le filament s'allonge
par son extrêmité postérieure, où les vacuoles golgiennes sécrètent les couches
internes, et commence à se spiraliser. Dans la partie antérieure de la vacuole
d'origine qui reste renflée, se forment le sac polaire et la capuchon polaire,
ce dernier dense aux électrons (pl. 13, fig. 50 et 51). Dans le sac polaire,
l'axe sombre du filament (pl. 14, fig. 54) se termine par une sphère portant
une couronne équatoriale inclinée vers l'arrière (pl. 13, fig. 51). Ces for-
mations sont tout à fait comparables au sac polaire et au capuchon polaire dé-
crits chez Tuzetia deb~~eu~, par LOUBES et MAURAND (1976).

---

- 66 -
PLANCHE 13
Formation du filament polaire
Premiers stades
Fig. 49 : Stade initial avec formation de la vacuole commune du filament
à partir des vésicules golgiennes (X 24000)
Fig. 50 et 51 : Stades plus avancés avec différenciation antérieure du sac
et du capuchon. polaires (X 32000).
Abréviations
C.R.
cytoplasme de l'hôte
C.P.
capuchon polaire
Di
diplocaryon
E
ergastoplasme
F.P.
filament polaire
M.R.
= mitochondries de l'hôte
S.P.
sac polaire
S.P.R.
sphère interne du sac polaire avec
couronne équatoriale
V.C.F.
vacuole commune du filament
V.G
vacuoles golgiennes

---

PLANCHE13
l '
.t,.
... b'Co."...,.

---

- 67 -
L'origine golgienne du filament polaire de la spore des Microsporidies
est aujourd'hui admise par tous les auteurs ; pour le seul genre NOJema, on
peut citer les descriptions afférentes à N. ap~ par YOUSSEF et HAMMOND (1971),
N. aigenae par CANNING et SINDEN (1973), N. b~Ji par LIU et MAC EWEN (1977),
N. lymantkiae (organite en nid d'abeille) par SAFTOIU et COLOIANU-IORDACHEL
(1978). Il n'est pas possible d'indiquer ici, si comme chez Tuzeti4 deb~ieuxi
(LOUBES et MAURAND, 1976), le filament polaire a une origine double: sac polai-
re dérivant d'une sphère dense aux électrons, filament sensu-stricto de l'en-
semble des éléments golgiens.
La polarisation des divers éléments du sporoblaste est un des carac-
tères importants de la sporogenèse. La jeune spore (pl. 15, fig. 55) montre
déjà les grands traits de l'organisation sporale. Dans la spore mûre, le fila-
ment polaire effectue douze tours de spire, environ. Autour de l'endospore,
l'exospore s'organise, sans présenter d'ornementation particulière. Entourant
la partie antérieure axiale du filament polaire, le polaroplaste est très va-
cuolaire. Dans la moitié inférieure de la spore, le diplocaryon est toujours
très nettement visible et marque l'emplacement du sporoplasme. Enfin, tout à
fait postérieurement, quelques granules sombres sont parfois visibles et peu-
vent être interprétés comme un reliquat golgien.
III - DIS eus S ION ET PO S l T ION S YS T E MAT l QUE
La Microsporidie rencontrée chez Chito zacconiuJ et transmise expé-
rimentalement à Hetio~ ~g~a répond à la définition :
- apansporoblastique
- monomorphique
- disporée (sporogonie par division binaire du sporonte)
- diplocaryon dans tous les stades
- infestation diffuse de la cellule-hôte.

---

- 68 -
PLANCHE 14
Formation du filament polaire
2 ': suite de l'évolution
Fig. 52 et 53
Deux spCiroblastes âgés eX 24000).
Fig. 54
Détails de la partie antérieure du filament polaire eX 48000)
Abréviations
A
= axe sombre du filament polaire
C.R = cytoplasme de l'hôte
C.P = capuchon polaire
Di
= diplocaryon
E
= ergastoplasme
F.P = filament polaire
Ri
ribosome
S.P = sac polaire

---

PLANCHE14

---

- 69 -
Il s'agit là d'un ensemble de caractères permettant de définir le
genre No~ema NAEGELI, 1857 (SPRAGUE, 1977 a et 1978) auquel on peut la rat-
tacher sans ambiguité.
Les No~ema sont essentiellement parasites de Lépidoptères chez les-
quels soixante et onze espèces ont été décrites d'après SPRAGUE (1978) ; nous
avons pour notre part dénombré soixante dix neuf espèces (cf. annexe). De
nombreuses espèces (une quarantaine environ) ne peuvent en aucun cas être rap-
prochées de la Microsporidie de Chito zaeeoniU6 soit parce qu'elles ~ont insuf-
fisamment décrites soir parce qu'elles n'ont jamais été nommées.(annexe J) ~
Une dizaine d'espèces ont des spores nettement plus grandes (longueur
supérieure à 5 pm
(anne~ 2~.C'est le cas de No~~ma !ymant~e, parasite de
Lyma~ ~p~, dont les spores ont de 5 à 6 pm,de longueur, et de No~ema
~6~ta, parasite de CnambU6 boni6at~, dont les spores peuvent atteindre
8 ~m de longueur. D'autres ont des spores nettement plus petites (2,1 à 3,1 ~m
pour NO.6ema thOm6oni, 2,8 à 3,3 pm pour No.6ema peJUc1Jwma~, 3,63 pm pour No~~ma
:tJU.c.hop.tUô-i.a~).. (a:nnw. .3) •
Certaines espèces peuvent être rapprochées par la taille et la forme
de leurs spores mais ont toujours une localisation dans l'hôte beaucoup plus
étroite : No~ema !otm~e parasite les tubes de Malpighi de T..[n~o!a b~~e!!a
plus rarement les glandes séricigènes, No.6ema to~~ parasite le corps adi-
peux de To~x v~diana No~ema zwoe!6eJU parasite le tube digestif de E~o­
g~t~ !an~~ ~anDPSe 5}. Beaucoup ont également des caractéristiques de
leur cycle de développement (forme et structure nucléaire des mérontes, sporon-
tes et sporoblastes) nettement différents, comme No~ema bomby~, No~ema ~­
poc.ap.6ae, NO.6ema 6uml6~a~, No~ema -i.nvadeno ou encore No~ema plodiae (annexe
6) •
Le tableau nO 4 indique la répartition des No.6ema décrites jusqu'à
ce jour dans les genres chito et H~oth.<:.6. Dans les conditions naturelles,
seulement deux espèces ont été signalées : No~ema bomby~ chez Chito .6..[mp!ex,
No~ema h~tM~ chez H~o~ a.tl1YIi-geJta (=H. zea}, H. v.ût~eert6. Leurs carac-
téristiques sont très éloignées de la No~ema considérée dans ce travail. Les
trois autres espèces ne sont connues qu'à partir d'infestations expérimentales.
V~o~pha nee~x (KRAMER, 1965) a également été transmise expérimentale-
ment à H~o~ v.ût~eeno.

---

- 70 -
PLANCHE 15
Sporog,enèse de Nol.>ema. ma.nieJta.e
Fig. 55 : Spore immature (X 32000). Dans le cercle, spores vues en
microscopie photonique (les diplocaryons sont 'indiqués par des
flèches) (X 712).
Abréviations:
Di = diplocaryon
E.S = enveloppe sporale
F.P = filament polaire
P
polaroplaste
R.G = reliquat golgien (?)

---

PLANCHE15

---

Taille et forme
Microsporidie
Hôte
Localisation dans
Caractère du cycle
Hetiot~ ou ChLlo
l'hôte
des spores
No-6ema in6e6ta
Hetiothi-6 phloxophaga
tissu adipeux
mérontes binucléés
5-8 pm x 2-3 pm
HALL, 1952
(expérimental) USA
sporontes allongés
avec deux ou quatre
noyaux
No-6ema ga6Ü
He-lio~ ze.a
tube digestif d'
sporoplasme binuclé:
4,16 pm x 2,29 pm
(MAC LAUGHLIN,1969)
Hetio~ v-Ur.e6ee.n-6
abord, puis infes-
diplocaryon - deux
(larve)
STREETT, SPRAGUE et
(expérimental) USA
tation généralisée
sporoblastes binucléés
ovoïdes
HARMAN, 1975
par sporonte
N0-6 e.ma -6 phingifu
He-liot~ ze.a
tube digestif d'
mérontes avec 1 à 8
4 , 3 pm x 2, 2 }lm
BROOKS, 1970
He.tiot~ v-Ur.e6ee.n-6
abord, puis infes-
noyaux, souvent binu-
ovocylindriques
(expérimental) USA
tation généralisée
cléés - sporontes bi-
nucléés (7)
......
No-6e.ma hetiothifu
He.tiot~ Mmig eJta
infestation géné-
mérontes binucléés ou
2,5-5,5 pm x 1,7-2 pm
LUTZ et SPLENDORE,
(= ze.a)
ralisée
tétranucléés - sporo-
1904
Hetiothi-6 ze.a
blastes binucléés
Hiliot~ v-Ur.e6ee.n-6
(naturel) Brésil,USA
No-6e.ma bombyw
CWo -6impie.x
tube digestif d'
espèce type du genre-
3-4 x 1,5-2 pm
NAEGELI, 1857
abord, puis infes-
mérontes tétranucléés
ovales
tation généralisée
avec micronoyaux et
macronoyaux - sporontes
fusiformes.
Tableau n° 4
No-6e.ma décrites dans les genres Hetiot~ et CWo.

---

- 72 -
N
%100
10
o
1
2
3
4
5
6
JJm
largeur
'....-.....
;::::::=::
longueur
.:.:.:.:.:
Figure 56
Histogramme de fréquence des largeurs et longueurs
des spores de N. manienae recueillies chez Ch. zae-
eOI1,Ùt6.

---

- 73 -
2
1
1
1
1
1
1
1
1
1
4
1
1
1
8
7
6
Figure 57 : Schéma du cycle de développement de No~ema mani~e.
1 : Méronte à 1 diplocaryon ; 2 : Méronte à 2 diplocaryons ; 3
Sporonte
arrondi à 1 diplocaryon, la membrane cytoplasmique est épaisse
4,5 et 6
sporontes allongés à 2 diplocaryons et division sporogonique ; 7 : sporo-
blastes ; 8 : spores mûres.

---

- 74 -
L'ensemble des caractères particuliers de la Microsporidie de Chlio
zQeeoniuo, étudiée dans notre travail, permet de créer pour elle une espèce
nouvelle que nous nommons No~emQ m~~Qe en hommage à Mademoiselle Jehanne-
Françoise MANIER, Maître de Recherche au C.N.R.S.
/
7
/
NMemQ m~~e n. sp.
/
..:.../_----------_/
Hôtes
(naturel)' chlio zQeeorUuo (élevage du GERDAT, Montpellier, France -
souche en provenance de Bouaké, Côte d'Ivoire).
(expérimental) Hel.-iot'U6 iVlJTli9~i Chlio piVLteUuo.
P..t~ b/tM~..teQe
ChJr..IJ~OdUUA cJute.e...t:t~ ; ChJr..yptoph.teb..tQ ieu.eotltuQ.
Infestation: généralisée, à partir du tube digestif.
Caractères du cycle: mérontes binucléés et tétranucléés ; sporontes (8,2-8,8 ~m
x 3,7-3,9 ~m), ovales, se divisant en deux sporoblastes (6,4-7,2 pm
x 2,4-3,4 ~m), par division binaire.
Caractères des spores
ovala~res, 3,69-4,43 pm x 2,23-2,59 ~m (chez Chlio
ZQC.c.oniuo }.

---

-
75 -
IV - V A RIA T I aND ELA TAI L LED E S spa RES
D E
NOSEMA MANIERAE E N FaN C T I aND E SES H ÔTE SET
p RaB LEM EDE SAS PEe I FIC I T E
1°/ Variation de la ta·rlle des spores de N. mroU.Vt.a.e
a) ~!h2~=~_~~!~!=rEr~!~!!~~.-
Les méthodes statistiques permettent d'analyser les résultats obte-
nus. Chaque échantillon est caractérisé par 3 paramètres
- le nombre de valeurs mesurées
- la moyenne de ces valeurs
- la variance des mesures
Pour comparer deux échantillons, il suffira donc de comparer leur
moyenne. La comparaison entre deux moyennes ml et m
sur nI et n
cas, est
Z
Z
basée sur l'écart-standard de la distribution des différences des moyennes,
symbolisé par sd :
sd
où
et
désignent les variances estimées.
si la différence d entre les deux moyennes est plus grande que 2 sd,
cette différence est significative au seuil de 5 %. Si
d <2sd,
la diffé-
rence entre les deux moyennes n'est pas significative.
On peut exprimer la même démarche en se servant de sd pour calculer
d
l'écart-réèuitE'
, c'est-à-dire le rapport:
E = -
sd
si
E est) 2, la différence est significative au coefficient de sé-
curité de 95 %
si E est)
2,6, elle est significative au coefficient de
sécurité de 99 % ; siE < 2, la différence n'est pas significative (SCHWARTZ,
1963).
Nous faisons remarquer que les spores sont mesurées au micromètre
oculaire.

---

- 76 -
L'étude de la variation de la taille et de la forme des spores de
No~ema m~~ae transmise expérimentalement par voie orale aux larves d'Ho
~gena, de Chilo p~e11~U6, de Pie~ b~~~ieae, de Ch~yptophlebia leueo-
~eta et de C~~odei~ (~haleit~ a donné les résultats consignés dans le
tableau nO 5, ci-dessous
Longueurs (en l1m)
Largeurs (en }lm)
Diffé-l
R
rence
è
Hôtes
Varian
Varian
entre
f
moyennes
Nb
moyennes
Nb
ces
ces
iL et l
1
C. zaeeorUU6
4,05 (0= 0,41 ) 0,160
92 2,43(0= 0,14) 0,019 103
1 ,62
2
H. a.Jtrn,[g eJta.
4,11(0= 0,32) 0,102
87 2,41(0= 0,18) 0,032
77
1 ,7O
3
P. b~~ieae
4,21(0= 0,22) 0,048
98 2,42(0= 0,10) 0,010
69
1,85
4
C. pMteUU6
4,19(0= 0,34) 0, 115
112 2,29(0= 0,25) 0,078
99
1 ,9O
5
Ch. leueo:tJteta 4,12(0= 0,36) 0,129
78 2,40(0= 0,12) 0,014
79
1, n
6
Ch.
c."aleite~ 4,21 (0= 0,27) o,on
65 2,35(0= 0,16) 0,025
73
1,86
Tableau nO 5
Tailles des spores de N. marUeJta.e chez ses différents
hôtes expérimentaux.
En comparant la moyenne des tailles de spores recueillies chez Ch.
zaeeorUU6 à celles des spores isolées chez les autres Insectes (tableau nO 6),
nous constatons que :
- les longueurs et les largeurs des spores de N. manienae recueillies chez
Ch. zaeeorUU6 et H. ~gena ne diffèrent pas significativement.
- chez P. b~~ieae, la longueur des spores diffère significativement de
celle des spores isolées chez Ch. zaeeoniU6 ; les largeurs sont par contre
semblables.
- entre les spores isolées chez Ch. zaeeorUU6 et chez Ch. p~ettU6, les
longueurs et les largeurs diffèrent significativement.
- il n'y a aueune différence significative de taille entre les spores pro-
venant des larves de Ch. leueo:tJteta et celles des larves de Ch. zaeeoniU6.
- la longueur et la largeur des spores provenant des larves de Ch. e~ci­
te6 et des larves de Ch.zaeeoniU6 diffèrent significativement.

---

- 77 -
1,
1,8
F.A
1,7
1,6
F.Q
1,5
1,4
,
,
,
i
1
2
3
4
5
6 R
Figure 58
Variation de la forme des spores de N. m~ni~e
en fonction de l'hôte.
Abréviations: F.A. : forme allongée; F.O. : forme ovorde
L-l : différence entre longueur et largeur ;
R : référence (voir tableau 5) .

---

- 78 -
--Tailles
Différence entre les
sd (en pm)
comparées
moyennes des tailles
(l)
(~)
longueur
largeur
longueur
largeur
1-6
0,06
0,013
0,053
0,028
1-3
0,22
0,010
0,046
0,018
1-5
0,14
0,14
0,052
0,031
1-2
0,07
0,03
0,058
0,019
1-4
0, 16
0,08
0,053
0,022
Tableau nO 6 : Comparaison des tailles de spores de N. maniekae.
recueillies chez les différents hôtes espérimentaux.
(1) voir
les références du tableau nO 5
sd = écart-standard de la distribution des différences des
moyennes.
Dans trois cas étudiés, nous constatons que les deux paramètres, lon-
gueur et largeur des spores, varienlt soit en même temps (chez Ch. c.a1..cUUJ et
chez Ch. p~ellU6) soit séparemment ~hez P~e~ b~~~c.ae). De ce fait, la
différence entre ces deux paramètres est également variable (tableau nO 6,
figure 58) ; or cette différence traduit une modification de la forme des spo-
res car, plus elle est grande, plus la spore est allongée et inversement si
elle est petite, la spore est plus ou moins arrondie. On peut donc dire que
chez certains hôtes, la taille et la forme des spores de N. maniekae varient
significativement. Ces résultats confirment les observations faites par LIPA
(1968), WEISER et COLUZZI (1972). Par contre, chez H. ~geka et chez Ch.
leuc.o~eta, la taille et la forme des spores de N. maniekae ne varient pas
significativement.
A la lumière de ces résultats, nous pensons que, concernant les No-
~ema des Lépidoptères, la taille et la forme des spores ne peuvent être uti-
lisées comme critères systématiques qu'avec de grandes précautions.

---

- 79 -
2°/ Problème de la spécificité des No~ema de Lépidoptères
Un des principes fondamentaux de la lutte biologique est d'utiliser
des agents aussi spécifiques?~gssible de façon à n'atteindre que le ravageur.
Dans ce contexte, nous avons transm~expérimentalement par voie orale
les
spores de la No~ema de Ch. zacconiu& à plusieurs espèces d'Insectes afin de
délimiter la spécificité de cette Microsporidie. En raison de son intérêt po-
tentiel en pathologie comparée, l'examen de la spécificité a également pour
but d'établir si la multiplication de ce Protozoaire peut présenter des dan-
gers d'infection des élevages de différentes espèces d'Insectes conduits dans
les laboratoires de l'I.R.C.T. et de l'I.R.A.T. au G.E.R.D.A.T. de Montpellier.
Cas de
Insectes
Nb d'
Nosé-
Tissus infestés
Provenance
essais mose
Il LEPIDOPTERES
famille des Pyralidae
ChJ.1.o pa.tr.:tell..u&
20
20
Tissu adipeux, paroi du
IoR .A. T.
tube digestif, tubes de
(GERDAT, Mont-
Malpighi, muscles, glan
pellier)
de salivaire, trachée.
famille des Noctuidae
I.R.C.T.
H. a.tr.nIig eJr.a.
11
11
voir "étude histopatho-
(GERDAT Mont-
logique" page 159.
pellier)
famille des Pieridae
Piew btr.aMicae
13
9
Tube digestif, tubes de
Hontpellier
Malpighi, muscles, tra-
chée, tissu adipeux.
famille des Tortrici
dae
I.R.C.T.
(GERDAT Mont-
Chtr.yp:toph.e.ebia
22
17
tube digestif, trachée
pellier)
.te.ucobte:ta
tissu adipeux .
famille des Plussicae
Chtr.y~oduw
43
32
Tube digestif, tissu
I.N.R.A.
chlttWe-tl
adipeux.
(Avignon)
III COLEOPTERES
famille des Chryome-
lidae
GaieJr.uceUa .tu:teo.ta
39
a
Montpellier
Chtr.YM me1.a a.mVlica-
na
28
o
Montpellier
Tableau n° 7
Sensibilité des différentes espèces d'Insectes à
N. manie~ae.

---

- 80 -
Il ressort de ces résultats que la NoJema de C~O zaeeoniuJ n'est
pas spécifique des larves et adultes de ce Lépidoptère. Elle se développe
chez d'autres espèces de Lépidoptères appartenant à des familles distinctes.
Par contre, les deux Coléoptères testés n'ont montré aucune sensibilité à
la Microsporidie.
Sur la spécificité des Microsporidies d'Insectes, les données de la
littérature sont contradictoires. On trouve tous les cas depuis les espèces
susceptibles de se développer dans un grand nombre d'hôtes différents jusqu'
aux espèces strictement spécifiques. Ainsi NoJema loeuJtae, isolée chez Lo-
euJta mig~~a a été transmise à 31 espèces d'Orthoptères (SPRAGUE, 1977 b).
N. ~vaden4, trouvée chez Ca~ 6igutiella et Ca~ eantella a été transmise
expérimentalement à Gall~a mellonella, Plo~a int~punetella, EpheJtia
elutella et P~amyelo~ ~itella (KELLEN et LINDEGREN, 1973)
N. nonag~ae
a été trouvée chez Nonag~a typhae, N. eannae, SeJia veJpi6o~, S. eutiei-
6o~ et S. Jpheei6o~ (SPRAGUE, 1977 b) ; PleiJtophoka eutieiJ a été dé-
crite chez Culex pipienJ, mais aussi chez C. 6~gan4, AnopheleJ gambiae, A.
Jtephen4i, A. albimanuJ et CufiJeta longi~eolata (WEISER et COLUZZI, 1972) ;
chez
NoJema whitei, isolée/le Coléoptère T~bolium eaJtaneum/a été transmise à des
Insectes aussi différents que Teneb~o molito~ (Coléoptère), Gall~a mello-
nella
(Lépidoptère) et Bombyx mo~ (Lepidoptère) (FISCF~R et SANBORN, 1962).
D'autres Microsporidies par contre ne se développent que chez un seul hôte.
C'est le cas de Theloh~ta (= P~elohania)
leg~ qui ne se rencontre que
chez AnopheleJ maeulipeniJ (WEISER, 1963), de Thelohania opaeita chez Culex
pipienJ (wtISER, 1963), de NOJema tho~oni chez Cho~toneUka eon6lietana
(WILSON et BURKE, 1971) et de NOJema zwoel6e~ chez E~gogaJte~ laneJ~
(WEISER, 1957). Dans la littérature, nous n'avons noté aucun cas de dévelop-
pement de Microsporidie de Lépidoptère chez les Coléoptères. Nos observations
confirment ces données de la littérature.
Il apparaît que les Microsporidies des Insectes, bien que certaines
présentent une spécificité parasitaire assez faible,ne peuvent se développer
que chez certaines espèces dont la sensibilité à la maladie est probablement
fonction des critères physiologiques, car la spécificité chez les Microspori-
dies réside en deux points
1 1 évagination de la spore qui peut nécessiter des conditions qui ne sont
réunies que chez l'hôte approprié;

---

- 81 -
- le sporoplasme injecté qui ne survit que chez l'hôte approprié; autrement
il peut être détruit par les systèmes de défense ou par des conditions physi-
co chimiques défavorables.
Dans tous les cas, le phénomène paraît avoir lieu au moment de l'
évagination.
V-ETUDE DU POUVOIR DE CONSERVATION DE LA-
v~t RU-L-E-N CE PE LAM l C ROS P 0 R l DIE D E CH. ZACCO-
NIUS VIS À VIS DES L A RV ESD' H. ARMIGERA.
Le rôle d'une maladie parmi les facteurs de régulation d'une popula-
tion et par suite, l'intérêt de cette maladie comme agent de lutte biologique
dépendent des possibilités de conservation du germe qui la cause. Nous avons
alors abordé ce problème en étudiant le pouvoir de survie et de conservation
de la virulence des spores de la Microsporidie de Ch. zacco~~ en fonction
de la température du milieu dans lequel les spores peuvent être conservées et
de la retransmission du germe chez son hôte.
1°/ Conservation sous forme de suspension dans lleau distillée
6
La suspension de spores de concentration 1,97.10
spores/ml qui nous
a servi dans cette expérience a été obtenue à partir de broyat de larves de
Ch. zacco~U6 malades. Cette suspension est répartie dans 3 flacons qui sont
placés pendant 15 mois aux températures suivantes: - 10°C (congélateur),
+ 4° C (réfrigérateur), +25-27° C (cellule d'élevage). Tous les 3 mois, le
contenu des 3 flacons est administré par voie orale à des larves de 3è stade
jeunes élevées individuellement. Pour chaque température et pour chaque es-
sai, un lot témoin
a été constitué.
Les résultats regroupés dans le tableau nO 8 montrent qu'en milieu
liquide, No~~a manie~e ne survit pas aux basses températures (-10° C) alors
qu'elle garde sa virulence à + 4°C et à 25-27° C.
Les larves ayant échappé à l'action de la Microsporidie ont effectué
leur nymphose et le devenir de ces nymphes a été suivi. Nous avons alors noté
que les nymphes issues des larves infestées avec les suspensions de spores
conservées à 25-27° C sont toutes mortes de microsporidiose alors que la ma-
jorité des nymphes provenant des larves infestées par des spores gardées à

---

- 82 -
-10° C ont donné des imagos sains (voir tableau n° 9).
O
T
- looe
+4°C
+ 25-27° e
Délais
T
l
T
l
T
l
(mois)
N
M
N
M
N
M
N
M
N
M
N
M
3
5/30
0
11/30
5
4/30
0
25/25
22
5/20
0
15/20
11
6
3/20
0
2/20
0
5/20
0
20/20
18
3/20
0
16/20
12
9
5/25
0
6/25
0
3/25
0
30/30
26
6/25
0
23/25
18
12
3/25
0
4/25
o (/15 0 25/25 23 5/25 0 19/25 13
15
6/20
0
3/25
o 2/25
0
25/25
19
2/25
0
20/25
14
Tableau nO 8 : Nombre de larves mortes de microsporidiose.
l = larves infestées ; M = cas de microsporidiose ; N • nombre de larves
mortes; T = témoins.
O
T
- looe
+ 4°C
+ 25-27° C
Délais
NC
M
N.A.
NC
M
N.A.
NC
M
N.A.
(mois)
3
6/19
1
5 ef'+ 8 0
0
0
0
5/5
5
0
+
6
7/18 ' 0
7 cf'+ 4 ç
0
0
0
4/4
4
0
9
3/19
0
9 ef'+ 7 ç
0
0
0
2/2
2
0
1
12
6/21
a 6 cf'+ 9 ç
0
0
0
6/6
6
0
15
4/22
a 11 r?+ 7 ç
0
0
0
5/5
5
0
Tableau nO 9 : Nombre de nymphes mortes de microsporidiose.
M = cas de microsporidiose ; N.A. = nombre d'adultes obtenus
N.C. =
nombre de chrysalides obtenues.
2°/ Conservation dans les cadavres
Les larves de Ch. zaeeoni~ tuées par la microsporidiose ou très
malades ont été mises dans des flacons de verre et placés pendant toute la
durée de l'expérience à -10°C, +4° C et + 25-27°C. Pour chaque essai, nous
broyons 5 à 8 larves dans l'eau distillée ;le broyat est ensuite filtré et
le filtrat obtenu est centrifugé et le surnageant est administré, après le
comptage des spore~ le même jour aux larves de 3è stade
d'Ho anmigeka par

---

- 83 -
voie orale. Les essais ont duré douze mois et les mortalités larvaires obte-
nues sont regroupées dans le tableau nO 10. Il ressort de ces résultats que
les individus morts à la suite de leur infestation avec des spores issues des
larves conservées à +4° C et à 25-27° C présentent toutes des cas de micros-
poridiose, alors que 4 cas seulement de microsporidiose ont été notés chez
les larves infestées avec des spores issues de larves conservées à -10°C.
O
T
-10°C
+4° C
+ 25-27° C
Délais
Doses
Doses
Doses
N
M
N
M
N
M
(mois)
(spores/ml)
(spores/ml)
(spores/ml)
5
7
5
3
2,3.10
8/25
3 1,9. 10
30/30
28 1,8,10
27/35
21
7
4
7
6
1,5.10
4/20
1 1,31.10
19/25
15 2,6.10
16/20
11
6
4
6
9
3,01.10
6/25
0 2,03.10
22/25
18 3,1.10
23/25
16
6
6
7
12
2,8.10
5/20
0 1,7.10
19/20
17 3,6.10
17/20
15
Tableau nO 10 : Nombre de larves mortes de microsporidiose.
M = cas de microsporidiose ; N = nombre de larves mortes.
Des cas de nymphoses ont été également notées mais, nous avons cons-
taté qu'aucune des nymphes infestées au stade larvaire avec la suspension de
spores provenant des cadavres gardés à + 4°C et à 25-27° C n'a donné d'imagos.
La plupart des nymphes traitées à l'état larvaire avec des spores recueillies
de
cadavres gardés à -10°C ont subi la mue imaginale (tableau nO Il).
O
T
- 10°C
+4° C
25-27° C
Délais
NC
MI
N.A
N.C
M
N.A
N.C.
M
N.A
(mois)
1
3
4/17
0
4â + 9~ 0/0
0
0
. 8/8
8
0
6
6/16 10
60' + 4~
6/6
6
0
4/4
4
0
9
8/19
0
70 + 4~
3/3
3
0
2/2
2
0
12
3/15
0
sc! + 89 1/1
1
0
3/3
3
0
Tableau nO Il : Nombre de chrysalides mortes de microsporidiose
M = cas de microsporidiose ; N.A. = nombre d'adultes obtenus; N.C.
nombre de chrysalides obtenues.

---

- 84 -
3°/ Retransmission de la Microsporidie
Les suspensions de spores utilisées dans cette expérience ont été
obtenuesà partir des cadavres de larves d'Ho ~geka infestées par la Mi-
crosporidie de Ch. zaeeo~U6. Quatre infestations successives ont été réa-
lisées et pour chaque essai, nous avons contaminé des larves de 3è et 4è sta-
des, saines. Nous nous sommes limité
aux infestations par voie orale car c'
est le type de transmission susceptible d'avoir lieu dans des populations na-
turelles d'Insectes.
La mortalité notée tous les jours et l'examen au microscope optique
de frottis du tissu adipeux ou du tube digestif de ces larves mortes ont per-
mis d'évaluer le pouvoir de conservation de la virulence de la Microsporidie.
Les résultats sont regroupés dans le tableau nO 12 et on peut noter que :
- dans le cas de la transmission du parasite de Ch. zaeeo~U6 à H. anmi-
gena 1, la mortalité larvaire est de 55,8 % et la mortalité nymphale de 100 %
chez les individus infestés au 3è stade. Chez les spécimens traités au 4è
stade, la mortalité au stade larvaire est de 50 % alors qu'au stade nymphal,
la mortalité est de 100 %.
- dans le cas de transmission du parasite d'Ho anmigena l à H. ~g~ II,
chez les individus infestés au 3è stade, 41,1 % des larves sont mortes et tou-
tes les nymphes obtenues ont succombé. A la suite des essais sur les larves
de 4è stade, 36,2 % des larves et 100 % des nymphes ont péri.
- dans le cas de la retransmission du germe obtenu d'Ho anmig~ II
aux larves d'Ho ~geka III,
38,7 % des larves infes-
tées au 3è stade sont mortes, et 100 % des nymphes obtenues ont succombé. Chez
les larves infestées au 4è stade, la mortalité larvaire est de 33,3 % et celle
survenue au stade nymphal est de 100 %.
- dans le cas de la transmission du parasite d'Ho anmigeka III à H. anmi-
gena IV, suite à la contamination des larves de 3è stade, nous avons enregis-
tré, après trois semaines d'observations, une mortalité larvaire de 46,4 %
et une mortalité nymphale de 100 %. Chez les larves traitées au 4è stade, la
mortalité larvaire a atteint le taux de 43 % alors qu'aucune nymphe n'a échap-
pé à l'action de la Microsporidie.
4°/ Conclusion et discussions
Ces résultats très fragmentaires sont le plus souvent en accord avec
des observations antérieures. En effet, pour ce qui est de la survie des spo-
res en milieu liquide en fonction de la température, plusieurs auteurs ont étu-

---

- B5 -
dié la question. REVEL (1960) en étudiant la longévité des spores de No~ema
ap~ a noté que celles-ci pouvaient survivre 7 ans dans l'eau distillée à 5° C
les spores de N. d~tkucto~ peuvent survivre pendant 6 mois dans l'eau à 4° C
(STEINHAUS et HUGHES, 1949) ; KELLEN et LINDEGREN (196B) ont remarqué que les
spores de N. plodia~, parasite de Plodia int~punctetta ne survivent pas après
9 mois dans l'eau à 6° et à 20° C
THOMSON (1958 a) indique que les spores de
P~ezia numin~ae restent viables après avoir passé 21 mois dans l'eau à 5° C,
mais perdent leur virulence après 4 à 6 mois dans l'eau congelée; WEISER (1956)
en étudiant le pouvoir de conservation de la vitalité et de la virulence de
plusieurs espèces de Microsporidies, a constaté que les spores de Thelohania
hyph~ae, de N. lymant4iae et de N. mU6cut~ perdent leur virulence après
avoir séjourné 3 à 4 mois dans l'eau à 20° C, alors qu'ellesconservent celle-ci
après avoir passé environ 13 mois dans l'eau à 0° C
toujours selon WEISER
(1956), les spores de Theloh~a ~~ perdent leur virulence après un séjour
d'environ 1 an dans l'eau à 20°C et 13 mois dans l'eau à 0° C ; KHARAZI-PAKDEL
(1968) note quant à lui que les spores de N. melolonthae ne supporte pas la
congélation (-30°C et -SOC) et que ce sont les températures moyennes (13° C)ou
basses (5°C) qui assure le plus long maintien de l'activité de cette Microspo-
ridie; il a par ailleurs noté qu~à 20° C, les spores conservent leur vita-
lité pendant au moins 1 an; KRAMER (1971) signale pour sa part que les spores
d'Octo~po~ea mU6cadae gardent leur activité après un séjour de plus de deux
ans dans l'eau distillée à 5°C.
La longévité des spores de Microsporidies conservées dans les cada-
vres de leurs hôtes a été également étudiée par un certain nombre d'auteurs.
Ainsi ALLEN (1954) fait remarquer que les spores de N. d~tkucto~ conservées
dans les cadavres des larves de Gno~aoehema op~cuteita mortes et mises à
27° C sous 40 à 60 % d'humidité relative ne survivent que 18 jours; KHARAZI-
PAKDEL (1968) en étudiant la virulence des spores de N. melolo~hae conservées
dans des vers blancs de 3è stade placés à-30° C, - 8° C, 0° C, et +5°C a noté
qu'aucune de ces larves contaminées avec des spores maintenues à-30° C, -8°C
et O°C n'a présenté les symptomes de la nosémose ; la maladie s'est manifestée
seulement à partir des spores gardées à +5° C ; WEISER (1956) signale que les
spores de No~ema mUôcut~ et de N. lym~ae
conservées dans les larves
mortes de Lym~a ~paft et les spores de Theloh~a hyph~ae
et de T.
~~ gardées respectivement dans les larves d'Hyph~a cunea et Nygmia
pha~hoea placées à la température du laboratoire et sous 80 à 90 % d'humidi-
té relative, restent virulentes pendant les 13 mois d'essais.
On constate donc, comme BROOKS (J980~ que c'est dans la zone des tem-
pératures peu élevées, mais supérieures à 0° C que les Microsporidies, gardées

---

..
STADES
TRANSMISSION
Doses
Nombre de
% mortalité
nombre de
% mortalité
Imagos
spores/ml)
larves
larvaire
nymphes
nymphale
obtenus
mortes
mortes
0
4/20
20
5/16
31,2
7cf+40
de Ch. zac.c.o MM à H. aJtrrU.geJta 1
+
4
2,21.10
22/34
55,8
12/12
100
0
-'--
0
6/25
24
5/19
26,3
96"+5~
de H. aJtrrU.geha 1
à H. aJtrrU.g eJta 11
,4
-
1,6.10
21/30
41 , 1
14/14
100
0
3 È
0
5/30
16,6
7/25
28
7~+llcf
de H. aJtrrU.geJta II à H. arom~geha 111
4
1,2.10
22/45
38,7
20/20
100
0
0
6/30
20
6/24
25
13 ~ + 5 cf'
ex>
de H. aJtrrU.geJta 111 à H. aJtrrU.geha 1V
Cl'
4
2,48.10
20/35
46,4
15/15
100
0
0
6/30
20
8/24
33,3 "
10 0 + 6 rJ
de Ch. zac.c.on~M à H. ~geha l
+
4
2,21.10
24/40
50
24/24
100
0
0
3/27
14, 1
6/24
25
80+1O~
+
de H. anmige~a 1 à H. aJtrrU.geha II
4
4
1,6.10
13/30
36,2
17/17
100
0
È
0
3/30
10
6/27
22 ,2
12 0 + 8 6
+
de H. a~ge~a II à H. aJtrrU.geha 111
-.
..
4
1,2.10
16/40
33,3
24/24
100
0
0
5/30
16,6
8/25
32
6~+IIÔ
de H. aJtrrU.geha 111 à H. aJtrrU.geha IV
-
4
2;48,10
21/40
43,0
.19/19
100
0
Tableau n° 12
Mortalité larvaire et nymphale enregistrée après retransmission de la Microsporidie.

---

- 87 -
en milieu liquide ou dans les cadavres de leurs hôtes, conservent le mieux
et le plus longtemps leur virulence.
Enfin, les retransmissions de la Microsporidie réalisées ont prouvé
que les spores nouvellement formées sont aussi virulentes que celles recueil-
lies directement chez Ch. zacco~U6. Ces nouvelles spores constituent donc
une source de nouvelles infestations et peuvent se transmettre non seulement
d'une manière expérimentale, mais aussi à l'échelle des populations naturelles.

---

3e PART 1E
Infestations
experimentales
et
Actions pathogènes de Nosema manierae
Sur
H. armigera.

---

- 91 -
CHAPITRE 1
RELATIONS HÔTE-PARASITE
L'action de N. ma~enae
sur H. ~gena a été étudiée sous plu-
sieurs angles.
- Une étude quantitative a été réalisée afin d'apprécier le degré de
sensibilité des larves de différents stades à N. ma~~ae
administrée
par voie orale ou par injection.
- Son influence sur le développement de ces larves a été su~v~e.
- Les lésions provoquées
par la Microsporidie chez les larves ont été
caractérisées grâce à une étude histologique au microscope
optique et au
microscope électronique.
- Enfin, un test biochimique a été effectué afin de déceler une éven-
tuelle action de la Microsporidie sur les larves.
MÉTHODOLOGIE
10 )
Méthodes de purification, de comptage et de conservation des
spores
Les suspensions de spores utilisées pour notre travail ont été
préparées à partir des chenilles de C.
zaeeo~U6 atteintes par la maladie.
Les larves parasitées sont broyées dans un flacon contenant environ 100 ml
d'eau distillée; ce mélange est homogénéisé et filtré plusieurs fois à
travers du coton. Le dernier filtrat est centrifugé à 2000 tours/mn pendant
5 mn ; le surnageant obtenu est centrifugé à nouveau pendant 5 mn et dernier
surnageant obtenu est conservé.

---

- 92 -
3
Le nombre de spores par mm
de suspension a été déterminé à l'aide
de la cellule de TROMA. Quelques gouttes de la suspension mère ont été pla-
cées dans la cellule et le dénombrement des spores se fait sous microscope
pour chacun des 256 carrés d'une des chambres de la cellule. Le nombre de
3
spores p~r mm est calculé par la formule :
Nombre de spores comptées x dilution x 4000
Nombre des carrés dans lesquels on a compté
les spores
A partir de la suspension mère, des dilutions sont effectuées en
progression géométrique de 10 en 10. Pour cela, on répartit dans des flacons
0,9 cc d'eau distillée auquel on ajoute 0,1 cc de suspension. On mélange et
on reprend avec une nouvelle pipette 0,1 ml du mélange que ron porte dans le
flacon suivant et ceci jusqu'à la dilution limite que l'on se fixe. Chacune
de ces dilutions est conservée au réfrigérateur.
2°) Méthodes d'infestation expérimentale
Deux procédés ont été comparés: l'infestation par ingestion libre
et l'infestation par injection intrahèmocoelienne.
Les larves à infester sont nourries pendant 48 heures ou
72 heures à l'aide d'un cube de milieu nutritif badigeonné avec 5 ~l de la
suspension des spores. Elles sont ensuite normalement élevées sur du milieu
sain.
Les Insectes sont inoculés à l'aide d'une seringue HAMIL-
TON stérile de 1 ul équipée d'une aiguille fine également stérile. Nous avons
fait pénétrer l'aiguille aussi tangentiellement que possible par rapport à
la paroi du corps pour ne pas risquer d'atteindre et de percer le tube diges-
tif. La quantité de suspension des spores injectées par larve est de 0,1 ~l.
Les témoins sont inoculés dans les mêmes conditions avec de l'eau physiolo-
gique à 6%
de Nacl afin de vérifier l'action de la piqûre. Après la pi-
0
qûre, les larves sont déposées en boîte individuelle sur du papier filtre
afin d'éviter tout risque d'infection de la blessure. Six à huit heures après
la piqûre, ces larves sont normalement nourries.

---

- 93 -
3°) Calcul de la mortalité
Les résultats des essais sont obtenus par notation journalière de
l'état des Insectes. Nous avons considéré et compté comme mort tout indi-
vidu qui, renversé sur le dos, se montre incapable de se relever sur ses
pattes; en effet, bien que des larves que l'on trouve dans cet état puis-
sent manifester pendant plusieurs jours encore des signes de vie sous forme
de quelques mouvements de plus en plus réduits,elles ne serétablissent ja-
mais. Par ailleurs, dans un certain nombre d'essais, nous avons constaté
que les lots d'Insectes non traités par la suspension de spores subissen~pen­
dant la période d'observation, une certaine mortalité. Les mortalités obser-
vées dans les lots traités comprennent donc, une certaine proportion d'indi-
vidus dont la mort n'est pas provoquée par la suspension de spores. Cette
part doit être enlevée des mortalités globales observées chez les larves
traitées si l'on veut déterminer les proportions des morts qui sont provo-
quées exclusivement par la seule action de la Microsporidie. On effectue
cette correction, selon GRY (communication personnelle), en appliquant la
formule suivante, dite "formule d'Abbot" :
Mortalité corrigée =
% morts du lot traité - % morts du lot non traité
100
% morts du lot non traité
Les cadavres sont soumis à un prélèvement de tissu adipeux et de
tube digestif afin de vérifier la présence des spores de la Microsporidie.
4°) Etude histologique
Les lésions provoquées par la Microsporidiose ont été mises en
évidence par des coupes sériées de 5 à 7 ~m d'épaisseur. Pour ces coupes,
nous avons utilisé le Bouin alcoolique, le Carnoy ou le Shina (fixateurs
énergiques et pénétrants). Une fois rincées à l'alcool 100°, les pièces
sont déshydratées, puis incluses dans la paraffine à 60° C. On réalise 3
bains successifs pour éliminer le solvant intermédiaire et bien imprégner
les pièces. Après déparaffinage et hydratation, les colorations utilisées
sont : la réaction nucléaire de Feulgen, la fuchsine basique de Delamater ,
l'azan de Heidenhain et le trichrome de Masson.
Ces méthodes proviennent du GABE (1968) et de MARTOJA et MARTOJA-
PIERSON (1967).

---

- 94 -
5°) Analyse enzymatique
L'analyse enzymatique du tube digestif et de l'hémolymphe des lar-
ves d'Ho ~gena a été effectuée à l'aide du système API ZYM (voir page 178).
La préparation de la galerie API ZYM est relativement simple.
Pour la recherche des activités enzymatiques du tube digestif, nous
avons utilisé des larves de 4è stade un jour après la mue ; ces larves ont
été traitées par voie orale soit avec de l'eau physiologique (témoins) soit
3
avec une suspension de spores de concentration 2,21.10
spores/ml. six jours
après l'infestation, ces larves, qui ont atteint le dernier stade larvaire,
sont disséquées le même jour et à peu près à la même heure ; les tubes di-
gestifs prélevés sont broyés dans l'eau distillée, le broyat est centrifugé
et le surnageant est réparti dans la galerie à raison de 60 ~l par microcuve
la boîte est fermée et mise à incuber à 37° C pendant 4 heures. A la fin de
l'incubation, on ajoute une goutte de réactif A et une goutte de réactif B
(voir page
179 ) dans chaque microcuve ; on expose ensuite la galerie pen-
dant quelques minutes à la lumière solaire. L'interprétation des résultats
est faite à l'échelle de lecture fournie par la firme API. La note 0 corres-
pond à une réaction négative, la note 5 à une réaction positive d'intensité
maximum. Les réactions intermédiaires sont notées 1,2,3 et 4 selon leur in-
tensité. Huit essais ont été effectués et à chaque essai nous avons utilisé
Il larves.
Pour la recherche des activités enzymatiques de l'hémolymphe, nous
avons réalisé neuf essais et à chaque essai 13 chenilles ont été sacrifiées.
Les larves qui ont serV1 dans cette expérience ont subi les mêmes traitements
que les larves utilisées pour l'analyse des activités enzymatiques intesti-
nales. L'hémolymphe prélevée··est diluée dans de l'eau distillée (hémolymphe
1 vol. et eau distillée 1/2 vol.) et répartie dans la galerie à raison de
60 ~l par microcuve. L'opération est ensuite poursuivie comme indiquée ci-
dessus.

---

- 95 -
II - Ë T lJ D E QUA N T 1 T A T 1 V E
A) Recherche d1une action pathogène de trois Microsporidies
vis à vis d'Ho ~ge~
Dans la littérature, plusieurs auteurs ont montré que les Mi-
crosporidies sont responsables de maladies (microsporidioses). qui peuvent
limiter la pullulation de certains Insectes ravageurs dans la nature.
Voici quelques exemples :
• EWEN et MUKERJI (1980) ont testé, au Canada, une suspension de spores
de No~ema io~U6~ae Canning sur des populations de MetanoplU6 ~angui~pe6,
M. packak~ et de Camnula pellucida (Acrididae) ; ils ont noté, 12 semai-
nes après le traitement, une réduction de 60 % des populations des deux
espèces de MeianopiU6 et de 28 % de la population de Camnula peilucida
dans le pâturage qui leur a servi d'essai.
• FUXA et BROOKS (1979 b) ont utilisé, en Caroline du Nord (U.S.A.),
des préparations à base de spor~de V~mo~pha ne~~x Kramer contre
Helio~ zea et Hetio~~ V~e6~e~. Selon eux, la suspension de spores
de V. ne~~x mélangée avec de la farine de mais et répandue sur les feuil-
12
les de tabac à raison de 2,5.10
spores/ha, réduit sensiblement ~a densité
de populations d'Ho v~e6~e~ ainsi que les dommages qu'elles causent. La
suspension de spores de V. ne~~x utilisée seule contre H. zea sur le
13
sorgho et le haricot à raison de 3,2.10
spores/ha n'a pas réduit sensi-
blement la population de cet Insecte ainsi que les dégats causés .
• HILL et GARY (1979) ont étudié, de 1955 à 1972, les effets de No~ema
py~U6ta Paillot sur les populations naturelles d'O~~nia nub~~ Hübner
(Lépidoptère : Pyralidae) du Nebraska (U.S.A.). Ils ont trouvé que, dans
le comté de Cuming, il y a eu, en 1963, un fort pourcentage de larves infes-
tées (100 %) suivi en 1964, 1965, 1966 et 1967 d'une forte baisse de popu-
lation de cet Insecte dans les champs de maïs étudiés. Dans le comté de
Hall, ils ont observé en 1964 une fréquence d'infestation de 44 % ; celle-
ci a été suivie d'une baisse de la population de la pyrale en 1965. En
1967, 1968 et 1969, ils ont, à nouveau, observé de fortes fréquences d'in-
festations (entre 30 % et 40 %) accompagnées d'une baisse de la population
de la pyrale du mais.

---

- 96 -
• LEWIS et LYNCH (1978) ont travaillé, quant à eux, dans la région
de l'Iowa (USA) sur un champ de mais infesté d'O~~nia nub~~. Ils
ont remarqué qu'en 1974, l'application d'une suspension de spores de N.
PYkaU6~a
7
à ce champ de mais à raison de 22,5 .•0
spores/plante, a réduit
le nombre de larves par ~lante de 48,1 %. En 1975, la concentration de
3
24,3.10
spores/plante a abaissé le nombre de larves par plante de 18,8 %
et de 43,8 %.
• Des recherches menées en Pologne par LIPA et BORUSIEWICZ (1976) ont
prouvé que la baisse de la population de T~x v~dana Linné (Lépidop-
tère : Tortricidae) sur les chênes durant les années 1970 à 1974, est due
à 4 espèces de Microsporidies : No~ema ~o~~ Weiser, Octo~po~ea v~­
dana Weiser, Pt~tophoka ~p. et Thelohania w~eni Günther.
- Entre ]971 et 1974, Pt~~ophoka oneopekae Mi1ner et Beaton a provo
une
baisse de la population d'Oneop~a atboguttttta Tinda1e (Lépidop-
tère
Hepia1idae) dans les paturages d'EBAR DARRIGO, Australie (MILNER,
1977).
- NORDIN (1976) signale que No~ema ~p. a provoqué, au Kentucky (U.S.A.)
en 1974, la baisse d'une population naturelle de Mataeo~oma amenieana
(Lépidoptère : Lasiocampidae) dans un champ de Cerisiers.
Une partie de nos études a été alors consacrée à la recherche
de la sensibilité des larves d'Helio~ ~geka à trois Microsporidies
isolées chez Spodop~e~a 11tto~ Boisduva1 (Lépidoptère : Noctuidae),
chez Gaie~ueetta t~eota Müller (Coléoptère : Chrysome1idae) et chez c~o
zaeeoniuo Hübner (Lépidoptère : Pyra1idae).
Les spores de la Microsporidie de Spodopteka titto~ nous
été fournies par Mr le Professeur G. BOUIX. C'est au cours d'une mission
de recherches à la station l.R.C.T. de Bébédjia (Tchad) en 1978 que Mr le
Professeur BOUIX, en examinant des larves mortes de S. 11tto~~ élevées
dans cette station, a constaté que le tissu adipeux de celles-ci était
envahi de spores d'une Microsporidie. Les spores ont été prélevées pour
permettre de reproduire expérimentalement cette infestation. Elle sont
binuc1éées et ont une forme ovale allongée (Pl.
16, fig.
60
) ; elles
mesurent en moyenne 4,67 pm de long (~ = 0,24) sur 2,44 pm de large (0 =
0,17). La spore à diplocaryon permet de rattacher cette espèce au genre
No~ema. Seule une étude plus approfondie permettra de donner un nom à
cette espèce. Signalons que 4 Microsporidies ont été décrites dans le

---

- 97 -
genre Spodopt~~ :
- No~ema ~ChoptU6~ae chez S. e~gua et chez S. ma~a
aCJtOnfjcto~d~~ (SPRAGUE, 1977 c)
- No~~ma ~p. chez S. taUlUt (SPRAGUE, 1977 c)
- V~onpha n~c~x chez S. exempta (PILLEY. 1976 b)
- No~ema ~p. chez S. ma~a aC/l..onycto~deJ.J (SPRAGUE. 1977 c)
Ces 4 espèces sont distinctes de celle de S. titto~.
La Microsporidie de G. tu.t.~ota (Pl. 16,
Fig.
61
) a été trou-
vée lors de notre stage de D.E.A. Elle parasite uniquement les cellules
de l'épithélium intestinal de leur hôte; leurs spores sont uninucléées,
de forme ovale allongée et atteignent 4,95 ~ de long (â= 0,57) sur
2,84 ~ (ô= 0,34). Elles se forment généralement en groupe. Ici, aucune
référence à une Microsporidie n'a été relevée (SPRAGUE, 1977 c) chez G.
tu.t.eota. La présence possible d'un pansporoblaste à nombre important de
spores uninucléées permet de rapprocher cette Microsporidie du genre Pt~­
topho~.
La Microsporidie de C~o zacco~U6 (Pl. 16,
fig.
59
) a été
étudiée en détail dans le chapitre "Etude du parasite" à la page
55.
Les larves d'Ho anmigena ont été infestées par ingestion et
par inoculation (voir page
92).
L'expérience porte sur quatre lots identiques composés chacun
de 35 larves au 3è stade de développement. Ces larves sont nourries du-
rant trois jours sur du milieu nutritif contaminé respectivement avec les
trois espèces de Microsporidies et de l'eau distillée, suivant le schéma
suivant
* 1er lot : Milieu + No~~ma ~p. de Spodoptena lLtto~~ à la dose de
5
3,47.10
spores/ml.
* 2è lot : Milieu + Microsporidie de Gat~ucetla tu.t.~ota à la dose de
5
0,95.10
spores/ml.
*
5
3è lot
Milieu + No~~ma ma~u..a.~ à la dose de 2,21.10
spores/ml.
:': 4è lot
Milieu + eau distillée.

---

- 98 -
La mortalité larvaire et le déroulement de la nymphose et de
la mue imaginale ont été suivis. Les tableaux et les figures qui suivent
résument les résultats enregistrés.
Nbre de Cumul des % mortali- Cumul des % nymphose Cumul des
% cl émer-
jours
larves
té larvai- nymphes
imagos
gence
après
mortes
re
apparues
apparus
infes-
tation
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
5
6.
0
1
0
2,8
7
0
4
0
11,4
8
1
7
2,8 17,6
9
1
25,7
2,8
9
3
9
8,5 18,7
18
5
51 ,4
14,2
10
4
13
11,4 29,0
26
12
74,2
34,2
Il
5
14
14,2 30,0
30
17
85,7
48,5
12
19
54,2
13
21
60
14
15
16
17
18
19
20
21
5
16.6
22
13
3
43.3
14.2
23
22
5
73,3
23.8
24
24
7
80,0
33,3
1
Tableau n°
13
: Sensibilité des L
infestées par ingestion des spores
3
de No.6 ema. .6 p. de S. .eJ.;t;tO/to.üA.
l :: infestées
T :: témoins

---

- 99 -
Nbre de Çumul des .% mortalité Cumul des % nymphose Cumul des % d'émer
jours
~arves
larvaire
nymphes
imagos
gence
après
~ortes
apparues
obtenus
infesta
tion
..
7
8
1
0
0
0
9
1
0
5
14,2
10
3
0
18
51,4
11
3
0
29
82,8
12
3
0
32
91,4
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
2
4,2
23
19
57,3
24
28
85,5
25
30
91,7
Tableau n°
14
: Sensibilité des L
infestées par ingestion des spores
3
de la Microsporidie de G. luteola.
(Témoins : voir
tableau nO 13).
Nbre de Cumul des % mortalité Cumul des % Nymphose Cumul des % d'émer-
jours
larves
larvaire
nymphes
imagos
gence
après
mortes
apparues
apparues
infesta
tion
3
3
8,5
4
7
20
5
18
51
6
28
79,4
néant
-
néant
-
7
35
100
8
9
Tableau nO
15
: Sensibilité des L
infestées par ingestion des spo-
3
ES
de No~ema de ChLto zaeeo~U6.
(Témoins : voir tableau nO 13)

---

- 100 -
PLANCHE 16
Spores en microscopie à balayage des trois Microsporidies
testées chez les larves d'Ho aromigena.
Fig. 59
Spores de No~ema ~nienae (X 30.000)
Fig. 60
Spores de No~ema ~p. de S. iitto~
(X 30.000)
Fig. 61
Spores de Pi~~opho~ ~p. de G. iuteoia (X 30.000)
Remarques:
La surface de la spore de N. mani~ae est lisse, tandis
que celle de la spore de No~ema ~p. présente de fines rides et
celle de la spore de Pi~~opho~ ~p. est très plissée.
La taille des spores de N. manienae est nettement plus petite.

---

PLANCHE 16

---

-
la 1 -
La Microsporidie isolée chez G. iuteola n'entraîne aucune mor-
a
talité n~ au stade larvaire (tabl. n
14,
fig.
62
) , ni au stade nymphal
a
(tableau n
14 ) . Les taux de mue nymphale et de mue imaginale, qui sont
a
voisins de ceux des témoins (tableau n
13
attestent que cette Micros-
poridie n'est pas pathogène pour H. aromigena. L'absence de spores dans les
frottis des tissus (tube digestif, tissu adipeux, etc ... ) des larves mor-
tes confirme ces résultats.
Après ingestion des spores de la Microsporidie de S. ~o~­
~, nous avons observé une mortalité larvaire de 30 % et seulement 33,3 %
des nymphes apparues ont effectué la mue imaginale (Tableau na
13 ). La
présence des spores dans les cellules intestinales (page
208) confirme
l'existence d'une action pathogène de cette Microsporidie vis à vis d'Ho
Chez les larves infestées par NO~eMa mani~ae
nous avons enre-
gistré une mortalité larvaire de 100 %.
Celle-ci a commencé dès le 3è jour
de l'infestation et s'est étalée sur 5 jours seulement (tableau na 15
fig.
62). Il s'agit là d'une microsporidie très pathogène pour H. anrni-
Dans cette série d'expériences, nous avons utilisé 3 lots com-
posés chacun de 40 L • Les larves sont injectées, à raison de 0,1 Ml par
4
individu , avec des suspensions de spores utilisées précédemment. Un lot
identique de 40 L
injectées avec de l'eau physiologique (0,1 Ml par larve)
4
est pris comme témoin.
Les résultats obtenus sont consignés dans les tableaux ci-
après.

---

-
102 -
M
...
/7J
,1
50
..----
10
o
1
2
3
4
5
6
7
J.A.!
FIGURE
62
Courbe de mortalité des larves de 3è stade infestées
par ingestion de spores de N. mani~a~ , No~~ma ~p.
et PR.e.-iA:topho!ta. ~ p.
Légende
~: témoins
D-D--O : L infestées avec N. mani~~
3
... .~: L infestées avec No~~ma ~p.
3
• • .: L infestées avec PR.e.-iA:tophoJta ~p.
3

---

- 103 -
Nbre de Cumul des % mortalité Cumul des % nymphose
Cumul des % d' émergen-
jours
larves
larvaire
nymphes
imagos
ces
après
mortes
apparues
apparues
infesta
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
tion
5
1
3
2,5
5,1
6
3
5
7,5
7,5
6
3
15
7,5
7
5
8
12,5
8,5
19
12
47,5 30
8
29
23
72 ,5 57,5
9
34
29
85
72 ,5
10
35
32
87,5 80
11
12
13
14
15
16
Tl
18
19
20
21
6
1
17, 1
3,1
22
15
4
42,8
12,5
23
22
8
55
25
24
27
11
67,5
34,3
25
13
40,6
Tableau n°
16
Sensibilité des L4 infestées par inoculation de spores
de Microsporidie de S. ~o~.
T = témoins; l = infestées.
Nbre de Cumul des % mortali tél Cumul des % nymphose Cumul des • d'émergence
Jours
larves
larvaire
Nymphes
imagos
~es imagos
après
mortes
apparues
apparus
infesta
tion
5
2
2,5
6
3
0
4
10
7
6
2,8
16
40
8
25
62,5
9
32
80
10
34
85
11
12
13
14
15
16
1
17
18
19
20
21
1
2,9
22
11
32,3
23
19
55,8
24
28
82,3
25
1
Tableau nO
17
Sensibilité des L
infestées par inoculation de spores
4
de Microsporidie ~solée chez G. luteola. (témoins, voir
tableau nO 16.)

---

-
104 -
M
%100
50
/
10
~
o
1
2
3
4
8
9
10
J.A.!
FIGURE
63
Courbe de mortalité des L
infestées par injection de
4
spores de N.
ma.rUe.tta.e., de No-6e.ma. -6p.
de S. ü.t:tOlta1..i6
et de PiwtophoJta. -6p. de G. iu.te.oia..
Légende
~: Témoins
0------0-0 : L infestées avec N. ma.rUeJr.a.e.
4
• .. ..: L infestées avec PiwtophoJta. -6p.
4
•
.
•
: L
infestées avec No-6 e.ma. -6 p.
4

---

- 105 -
Nbre de Cumul des % mortalité Cumul des % nymphose Cumul des
% d'émer-
jours
larves
larvaire
nymphes
imagos
gence des
après
mortes
apparues
apparus
imagos
infesta
tion
3
4
la
4
6
15
5
18
43,5
6
25
59,4
7
31
74,2
néant
-
néant
-
8
37
91,4
9
40
100
la
Tableau nO
18
Sensibilité des L
infestées par inoculation de
4
spores de No~ema mani~e
(Témoins: voir tableau 16)
Les résultats obtenus dans cette série d'expériences sont compa-
rables à ceux obtenus au cours des essais de contamination par ingestion.
En effet l'absence de mortalité larvaire et le pourcentage assez élevé de
mues imaginales chez les individus qui ont été infestés par Pt~topho~
~p. confirme la résistance de cet Insecte à ce parasite (tableau 17,
fig.
63
). Par ailleurs, à la suite de l'inoculation de No~ema ~p., il a été
constaté une faible action pathogène de celle-ci vis à vis de ce Lépidop-
tère (tableau
16, fig. 63
). Enfin, l'injection de No~ema mani~e a
provoqué une mortalité qui s'est étendue à la totalité des larves en 7 jours.
L'évolution de cette mortalité est comparable à celle des suites de la con-
tamination par voie orale (tableau 18,
fig.
63).
Les résultats que nous venons d'exposer mettent en évidence l'iné-
galité du pouvoir pathogène des Microsporidies de G. futeota, de S. titto-
~ et de Ch. zaeeo~ vis à vis d'Ho ~g~.
Pte~topho~ ~p. s'est montrée sans action, ni par ingestion, ni
par inoculation dans la cavité viscérale. Nous avons, cependant, noté dans
la littérature que des Lépidoptères sont sensibles aux Microsporidies des
Coléoptères. C'est le cas de Mame6~U1 bka4~~eae Linné à laquelle HOSTOUNSKY
(1978 b) a transmis, avec succès, Pt~~opho~a g~o~~a et No~ema eque6~,

---

- 106 -
deux Microsporidies du Coléoptère Leptino~a deeemlineata.
No~ema ~p. s'est révélée peu pathogène à l'égard d'Ho ~g~
car 33,3 % à 40 % des chrysalides ont effectué leur mue imagina1e.
No~ema ma~~e a été par contre très pathogène pour H. ~­
g~ chez qui, elle provoque une mortalité larvaire de 100 %. Compte tenu
de son fort pouvoir pathogène, nous l'avons alors retenue pour la réalisa-
tion de nos expériences.
B) Influence de la dose des spores et du stade larvaire sur le
développement de la microsporidiose à No~ema ma~~e _
Parmi les facteurs susceptibles d'intervenir dans le développe-
ment de No~ema mani~ae chez H. ~g~a, nous avons retenu la dose des
spores et le stade larvaire. Beaucoup d'auteurs ont aussi étudié l'influence
de ces deux facteurs chez d'autres Insectes
- FUXA et BROOKS (1979 a) en étudiant la production des spores de V~­
mo~pha nee~x chez les larves d'Ho zea, ont constaté que la production
des spores de cette espèce est maximale lorsque les larves de 3è stade sont
nourries sur du milieu nutritif contaminé avec de faibles doses, notamment
la dose de 6,6 spores/mm 3 .
- HOSTOUNSKY et WEISER (1972) ont étudié, quant à eux, la production des
spores de No~ema ptodlae Ke11en et Lindegren chez les larves de Mam~~a
b~~~~eae Linné. Transmise par voie orale, en faible quantité, aux larves
de 4è stade, No~ema ptodlae se multiplie mieux car les fortes doses provo-
quent la mort rapide des larves.
- KHARAZI-PAKDEL (1968) a utilisé diverses concentrations de spores de
No~ema meiotonthae Krieg pour infester, par voie orale et par injection,
des larves de Meiotontha meiotontha Linné (Coléoptère - Scarabeida~ de 1er,
2è et 3è stades. Les résultats obtenus mettent en évidence, d'une part une
influence de la dose sur le nombre de vers blancs tués par la No~ema et
d'autre part, une plus grande résistance relative des larves âgées.
- WILSON (1974 b) a infesté, par voie orale, les larves de Cho~tone~
6umi6~na C1em. (Lépidoptère
Tortricidae) de 2è, 3è, 4è, 5è et 6è stades
avec suspensions de spores de No~ema 6umi6~anae Thomson de concentration
6
7
8
9
10 , 10 , 10
et 10
spores/ml d'eau distillée. Il a noté que la mortalité
larvaire s'accroît, chez cette espèce, au fur et à mesure qu'augmente la
dose des spores ingérées et que la sensibilité de ces larves à cette Micros-

---

- 107 -
poridie diminue au fur et à mesure qu'augmente leur âge.
- WILSON (1978) a transmis par voie orale, aux larves de 2è et 3è stade
de Ch. 6umi6~na, des suspensions de spores de Pt~toph04a ~ehub~g~ Zwol-
4
6
8
fer aux doses de 5.10 , 5.10
et 5.10
spores par cube de milieu nutritif.
Chez les larves de 2è stade, ces trois doses provoquent, respec~ement, une
mortalité larvaire de 53,7 %, 45,0 % et 80,7 %. Chez les larves de 4è stade,
elles provoquent, respectivement, une mortalité larvaire de Il,2 %, 19,4 %
et 45,4 %.
- WEISER et HOSTOUNSKY (1973) ont infesté, par voie orale, des larves de
4è stade de Mam~tna b~~~eae (Lépidoptère) en utilisant des suspensions de
4
spores de No~ema het~o~po~ Kellen et Lindegren à des doses de 20-30.10
4
et 45.10
spores par larve. Les larves infestées avec la première dose per-
dent l'appétit, ne se nourrissent plus et meurent quelques jours plus tard
4
celles contaminées avec la dose de 45.10
meurent par suite de septicémie.
En ce qui nous concerne, nous avons étudié l'influence conjointe
de la dose des spores et de l'âge des larves sur le développement de la mi-
crosporidiose selon les méthodes d'élevage et de contamination exposées pré-
cédemment pag~
35 et 92.
A cause de leur taille relativement petite, les larves de 2è stade
n'ont pu être infestées que par voie orale. Outre les témoins élevés sur du
milieu badigeonné d'eau physiologique, plusieurs lots de larves ont été éle-
vés
pendant trois jours sur du milieu contaminé avec différentes dilutions
2
8
de suspension sporale allant de 2,21.10
spores/ml d'eau distillée à 2,21.10
spores/ml.
a) Mortalité larvaire.-
Après trois semaines d'obser-
vation, les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau
19
et la
figure
64
. Le tableau montre un rapport direct entre la densité des spo-
res ingérées et la mortalité larvaire enregistrée. Cette mortalité est très
élevée pour les doses que nous avons utilisées-:
3
- de
la dilution 2,21.10 , plus de 50 % des larves traitées meu-
rent
5
- à partir de la concentration 2,21.10 , la mortalité larvaire at-
teint le taux de 100 %. Après examen au microscope, nous avons noté la pré-
sence de bactéries dans le frottis des larves mortes.

---

-
108 -
M
%100
50
1
o
2,21.1
DOSES
FIGURE
64
Courbe de mortalité des larves de différents stades infestées,
par voie orale ou par injection, avec des spores de N. man.LeJtae.
à différentes concentrations.
Légende
* * *: L infestée par voie orale
2
1:/: 1:/: 1:/:: L
infestée par voie orale
3
000: L infestée par voie orale
4
...: L infestée par injection
4
0 DO: L infestée par voie orale
5
• • .: L infestée par injection
5
000: L infestée par voie orale
6

---

- 109 -
Doses
nombre de
nombre de
nombre de
% Mortalité
(spores/ml)
larves
morts
survivants
0
SO
12
6S
15
2
2,2\\'10
SO
3S
42
3S,2
3
2,2\\'10
SO
59
21
69, Il
4
2,2\\'10
SO
71
9
S6,7
5
2,2\\']0
SO
SO
0
100
6
2,21.10
75
75
0
100
7
2,2\\'10
SO
SO
0
100
S
2,21.10
60
60
0
100
Tableau nO
19
Mortalité totale des larves de 2è stade infestées
par ingestion.
b) Evolution de la mortalité larvaire.-
La mortali-
té enregistrée est essentiellement larvaire pour les concentrations éga-
5
les ou supérieures à 2,21.10
; pour les autres dilutions, nous avons no-
té une mortalité au stade nymphale.
Le délai d'évolution de la maladie varie aussi selon la quan-
tité des spores ingérées par les larves.
S
7
pour les doses 2,21.10
et 2,21.10 , la mortalité débute au 5è jour
et devient totale (100 %) au 9è jour.
6
5
- pour les doses 2,21.10
et 2,21.10 , elle débute respectivement au
6è et 7è jour et devient totale au 10è jour et au 13è jour après l'infes-
tation.
4
3
2
- pour 2,21.10 ,2,21.10
et 2,21.10 , cette mortalité est plus étalée
dans le temps, puisque commençant respectivement au Sè, 9è et 10è jour,
elle ne s'arrête qu'aux 15è, 17è et ISè jour après l'infestation (tableau
20, figure 65).

---

-
110 -
M
%100
.P
/1
1
•f
(1
1
ilH
f
IL..,.J
~/
1
l
'
l/~i
"
1
b
1
1
'
~ /i
.,'
,.:
50
,
/ '
l
, f
/1 /~
J
f
6./
f
f
,
J
f
1
1
1
/0
1
f
,
10
o
2
4
6
8
14
16
18
20
22
J.A.I
FIGURE
65
Mortalité cumulée chez les L
infestées par voie orale
2
avec des suspensions de spores de différentes concentra-
tions.
Ab révia t ions
J.A.I.
jours après infestations
M
pourcentage de mortalité larvaire
..
Légende
•
: témoins
0-0-0:
2
2,21.10
spores/ml
j . . Â:
3
2,21.10
spores/ml
~:
4
2,21.10
spores/ml
.-.-.: 5
2,21.10
spores/ml
0-0-0:
6
2,21.10
spores/ml
.--.-~:
7
2,21.10
spores/ml
f:s.-!::s.- --~:
8
2,21.10
spores/ml

---

-
III -
Doses
a
,2
j
4
5
•E
7
8
Spores/ml
2,21.10 2 ,2 1• la 12,2 1. la
2,21.10
2,21.10 2,21.10
2,21.10
Nombre de
80
80
80
80
80
75
80
60
larves
Ndmbre de
%
%
%
%
%
%
%
%
jours après
m
M
m
M
m M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
infestation
4
5
8
la
19
31 ,6
6
15
20
27
33,7 36
60
7
30
40
42
52,5 47
78,3
8
3
3,7
7
8,7 53
70 ,E 61 ! 76,2 52
86,2
r
9
4
5
18 22,5 24
30
68
90 ,6 80 100
60 100
la
2
2,5 11 13,7 "31 38,7 40
50
75 100
11
2
2,5
7
6,4 19 21,7 39 47,4 56
69,2
!
12
2
2,5 15
16,6 25 29,4 47 57,6 61
75,6
13
4
5
20
21 ,0 29 32,E 60 73,6 80 100
14
4
5
23
25
37 43,4 67 82,8
15
4
5
29
32,8 44 52,6 71 88,1
16
la 12,5 34 34,2 53 61,4
1
17
la 12,5 37 38,5 59 70
1
18
10 12,5 38
40
1
19
12 15
20
1
21
1
22
23
Tab leau nO
20
Mortalité cumulée par jour et par doses chez les L2
infestées par ingestion.
c) Action des différentes doses de spores ingérées sur
les mues larvaires.-
Au cours de ces séries d'expériences, les L
infes-
2
tées peuvent subir la mue ; mais le nombre de mues subies varie en fonction
de la densi té des spores connue l' indiquen t le tableau
21
et la figure
66.
7
8
- Pour les doses 2,21.10
et 2,21. la , aucune larve ne subit la 6è mue
larvaire mais, respectivement, 20 et 13,5 % des larves atteignent le dernier
stade en effectuant 5 mues seulement.

---

-
112 -
Figure 66
Action des différentes doses de spores de N. mani~ae
sur les mues larvaires chez les L .
2
% des L
obtenues
3
2
% des L4
3
% des L5
4
% des L
(dernier stade)
5
5
% des L6

---

-
113 -
•
e

---

- 114 -
- Pour les doses inférieures à celles-ci, 2,6 i. à 52 i. des larves su-
bissent la 6è mue larvaire alors que la proportion des larves qui attei-
gnent le dernier stade après 5 mues augmentent avec la densité des spores
ingérées.
2
3
4
5
6
7
8
Doses
a
D,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
Nombre
de lar-
80
80
80
80
80
75
80
60
ves
Stades
nb
%
nb
i.
nb
%
nb
i.
nb
i.
nb
i.
nb
i.
nb
i.
obtenus
L
80 100
80 100
80 100
80 100
80 100
75 100
80 100
60
00
3
L
80 100
80 100
80 100
77
96,2 73
91 ,2 60
80
38
47,5 13
21 ,6
4
L
51
63,7 47
58,1 41
51,2 26
32,5 18
22,5 11
14,6
3
3,7
a
0
5
L5
29
36,2 31
38,7 35
43,7 36
45
38
47,5 19
25,3 16
20
8
13,5
(D.5)
L
56
70
42
52
34
42,5 16
20
6
7,5
2
2,6
a
a
a
a
6
Tableau nO
21
Action des différentes doses de spores ingérées sur les
mues larvaires chez les L .
2
d) Action sur la nymphose et la mue imaginale de diffé-
rentes doses de spores.-
Très peu de larves contaminées ont échappé à l'ac-
tion de la Microsporidie pour effectuer la mue nymphale. Il s'agit des lar-
ves nourries sur du milieu contaminé avec des suspensions à faibles concen-
2
4
trations ; c'est-à-dire les doses allant de 2,21.10
à 2,21.10
(Tableau 22 et
figure
67
). L'évolution de ces nymphes a été suivie afin de savoir si
elles allaient
subir ou non la mue imaginale. Après trois semaines d'ob-
servations, nous avons enregistré 100 i. de mortalité ; toutes ces nymphes
mortes étaient bourrées de bactéries et de spores de la Microsporidie. La
survie ne se prolonge donc pas jusqu'au stade imaginal.

---

- 115 -
Doses
Nombre de
nombre de
% nymphose
(spores/ml)
nymphes
larves mortes
obtenues
0
68/80
12/80
85
•
2
2,21.10
42/80
38/80
61,8
3
2,21.10
21/80
59/80
30,8
,4
2,21.10
9/80
71 /80
13,3
5
2,21.10
0/80
80/80
0
2,2L1a6
0/75
75/75
0
7
2,21.10
0/80
80/80
0
8
2,21.10
0/60
60/60
0
Tableau na
22
Action des différentes doses de spores ingérées
sur la nymphose chez les L .
2
Comme pour les larves de 2è stade, les L
ont fait l'objet uni-
3
quement d'une contamination par ingestion libre des spores de Microsporidie.
Plusieurs séries d'essais analogues à ceux effectués avec les L
ont été
2
conduites sur plusieurs lots de larves de 3è stade venant de muer.
a) Mortalité totale observée chez les L .-
Les résul-
3
tats présentés dans le tableau
23
et la figure
64
montrent que la mor-
talité atteint le taux de 100 % pour les doses égales ou supérieures à
5
2,21.10 , alors que pour les doses inférieures à celle-ci, elle varie de
67,7 % à 25 %.

---

-
116 -
N
%100
1
DOSES
FIGURE
67
Courbe de
taux de nymphose des larves de différents stades
d'Ho anmigena infestées, par voie orale ou par injection avec dif-
férentes doses de spores de N. manienae.
Légende
voir figure 64

---

- 117 -
Doses
nombre de
Nombre de
Nombre de
%
(Spores/ml)
larves
morts
survivants
mortalité
0
30
4
26
13,3
2
2,21.10
60
21
39
25,0
3
2,21.10
60
32
28
46,1
4
2,21.10
50
36
14
67,7
5
2,21.10
50
50
0
100
6
2,21.10
60
60
0
100
7
2,21.10
60
60
0
100
8
2,21.10
60
60
0
100
Tableau nO
23
Mortalité totale des L
infestées par ingestion.
3
b) Evolution de cette mortalité.-
En relevant quoti-
diennement la mortalité observée chez les L , nous obtenons les résultats
3
consignés dans le tableau
24
et la
figure 68. La sensibilité
2
4
relativement réduite des larves aux doses de 2,21.10
à 2,21.10
se traduit
aussi par un long délai de l'évolution des effets pathogènes et par un éta-
lement dans le temps de la mortalité. En effet, la mortalité débutant 6 à
7 jours après ingestion des spores, elle s'étand sur 5 à 6 jours.
4
- Pour les doses supérieures à 2,21.10 , la mortalité commence 4 à 5 jours
après infestation.
7
8
- Cette mortalité s'étale sur 4 jours pour les doses 2,21.10
et 2,21.10 .
5
6
- Pour les concentrations 2,21.10
et 2,21.10 , elle s'étale sur 5 jours.
Là aussi, nous avons noté la présence des bactéries dans certaines
larves mortes.

---

-
118 -
M
.ÇJ,
%10
: 1
l
,
1 / ,
/
: '
1
1
,1
l
,
I/d
1
I l
1
411:
/
"
1
' / ,
1
' f 1
1
' I I
.J
/Itt;.
.,.
j rt:J
!
A/I'
:
, ,"
1
50
, 1 J
J
I"
1
1 " 1
1
,I~ •
l , 1
: 'ri
l
'LT
lit'
1 1
~', 1
o ,:
10
..
o
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
22
J.A.I
_F_I_G_URE
6~8~__: Mortalité cumulée des L
infestées par ingestion avec des
3
suspensions de spores de différentes concentrations.
Abréviations : voir figure
65
Légende : voir figure
65

---

- 119 -
Doses
2
3
4
5
,6
7
8
0
2,21.10 ~,21.10 2,21.10
2,21.10
2,21.10 ~,21.10
2,21.10
spores/ml
Nombre de
30
50
50
50
60
60
60
60
larves
Nombre de
%
%
%
%
%
%
%
%
jours après m
H
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
infestation
3
4
7
11 ,6 11
18,3 15
25
5
5
8,3 18
30
23
38,3 33
55
6
3
6
8 16
15
25
38
63,3 41
68,3 49
81,6
7
2
4
9 18
13 26
26
43,3 51
85
60 100
60
100
8
5 10
12 24
21 42
43
71,6 60 100
9
2
6,6
11 16,4 19 33,6 28 52,8 60
00
10
2
6,6
14 22,9 27 50,7 36 70,0
11
3 10
19 31,1 32 60
12
4 13,3
21 33,1
13
14
Tableau nO
24
Mortalité cumulée par jour et par dose chez les L3
infestées par ingestion.
c) Action des différentes doses des spores sur les
mues larvaires.-
Comme nous l'avons observé chez les L , le nombre de mues
2
subies par les L
varie aussi en fon,ction de la quantité de spores ingérées.
3
C'est ainsi que 5 à 76,6 % des larves traitées avec des doses inférieures à
7
2,21.10
effectuent les 6 mues larvaires, alors qu'aucune des L
élevées sur
3
7
8
du milieu contaminé avec les suspensions de concentrations 2,21.10
et 2,21.10
ne subit 6 mues larvaires (tableau 25, fig. 69). On remarque là
aussi que le pourcentage des larves n'effectuant que 5 mues larvaires augmente
avec le nombre de spores ingérées.

---

-
120 -
Figure 69
Action des différentes doses de spores de N. mani~e
sur les mues larvaires chez les L .
3
% des L
obtenues
4
2
% des L5
3
% des L
(dernier stade)
5
4
% des L6

---

-
121 -

---

- 122 -
,IDose s
2
3
4
5
6
7
8
a
~.21,10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
Nombre
de lar-
30
50
50
60
60
60
60
60
ves
Stades
obtenus
nb
%
nb
%
nb
%
nb
%
nb
%
nb
%
nb
%
nb
%
L
30 100
50
100
50
100
60 100
60 100
60 100
60 100
60 100
4
L
23
76,6 38
76
33
66
34
56,6 26
43,3 19
31,6
6
la
2
3,3
5
L
(DS)
7
23,3 12
24
17
34
26
43,3 29
48,3 23
38,3 11
18,3
9
15
5
L
23
76,6 38
76
30
60
26
43,3
5
8,3
3
5
a
a
a
a
6
Tableau nO
25
Actions des différentes doses de spores ingérées sur
les mues larvaires chez les L .
3
d) Action des différentes doses de spores sur la nymphose
et la mue imaginale chez les L
.-
Ici aussi, seules quelques larves élevées
3
avec du milieu nutritif contaminé par les suspensions de spores de concentra-
4
tion égale ou inférieure à 2,21.10
ont subi
la nymphose (tableau
26,
figure
67
). L'étude du pourcentage de la mue imaginale montre que la pro-
portion des nymphes effectuant cette mue est nulle pour toutes les doses uti-
lisées.
Doses
nombre de
nombre de larves
% nymphose
(spores/ml) nymphes
mortes
obtenues
a
26/30
4/30
86,7
2
2,21.10
39/60
21/60
i5,0
3
2,21.10
28/60
32/60
53,9
4
2,21.10
14/50
36/60
32,3
5
2,21.10
0/50
50/50
a
6
2,21.10
0/50
50/50
a
7
2,21.10
0/50
50/50
a
8
2,21.10
0/50
50/50
a
Tableau nO
26
: Action des différentes doses de spores
ingérées sur la nymphose des L .
3

---

- 123 -
larvaire
- - - - -
Les relations entre la quantité des spores et la mortalité par
microsporidiose du 4è stade larvaire ont été étudiées ici en procédant par
ingestion libre des spores et par injection d'une quantité
connue de
spores dans l'hémocoele des L4
4t ESSAI PAR INGESTION LIBRE.-
Nous avons utilisé ici plusieurs lots de L
venant de muer depuis
4
un jour. Les larves ont été infestées individuellement par ingestion du mi-
lieu contaminé par des suspensions de spores de différentes concentrations.
a) Mortalité larvaire.-
Les résultats obtenus dans ces
séries d'expériences sont regroupés dans le tableau
27
et la figure
64.
On remarque que :
4
- pour les doses égales ou inférieures à 2,21.10 ,
17,6 à 63 % des larves
meurent.
5
- pour les doses égales ou supérieures à 2,21.10 , la mortalité larvaire
atteint le taux de 100 %.
Les bactéries signalées dans les essais précédents sont également
observées ici dans les larves mortes.
Doses
..
nombre de
Nombre de
Nombre de
%
Spores/ml
larves
morts
survivants
mortalité
a
25
3
22
12
2
2,21.10
40
11
29
17,6
3
2,21. 10
40
19
21
40,3
4
2,21.10
40
27
13
63,0
5
2,21.10
40
40
0
100
6
2,21.10
40
40
0
100
7
2,21. 10
40
40
0
100
8
2,21.10
40
40
0
100
Tableau '27
Mortalité totale des L
infestées par
4
ingestion.

---

- 124 -
•
... ~
ÇJ
,
I l
,.
,
,. ,.-
1
1/
1
/
1 1
,
I l
/'1
,
, ,
1
I l
ç1,/
4J
'
1
• 1
'1 ,,
!,
1
'
/ ,
1 /
, ,
' ,
J ,
dl
.'
,.
1
,
J
•
/.1
, J
6'
.,
, , cl
,
,:
1
14 , ,
, ,
, . , 1
, . , 1
J '
, , / j
,:
,
1
, ,
1 J
;1
, J
ô':
,,
i .'
J
0
1
2
3
4'
5
6
7
8
9-
10
11
Abrniatiœs = voir fipre 65
UpM = voir fipre
65

---

- 125 -
b) Evolution de la mortalité larvaire.-
La mortalité
chez les larves de 4è stade infestées par ingestion n'est pas uniquement
larvaire comme nous le montrent le tableau
28
et la figure
70.
5
- Pour les doses égales ou supérieures à 2,21.10 , 100 % des larves meu-
rent.
5
- Pour les concentrations inférieures à 2,21.10 , seulement 26,7 à 67,1 %
des larves succombent sous l'action de la Microsporidie.
Nous avons par ailleurs noté que le délai d'évolution de la ma-
ladie varie selon la quantité de spores administrées.
7
8
- Pour les dilutions 2,21.10
et 2,21.10
, la mortalité débute 4 jours
après l'infestation et atteint le taux de 100 % au 7è jour.
5
6
- Pour les dilutions 2,21.10
et 2,21.10 , cette mortalité débute au 5è
jour et s'étale respectivement sur 6 et 5 jours puisqu'elle atteint le taux
de 100 % au 9è et 10è Jour.
2
3
- Pour les faibles concentrations,
2,21.10
et 2,21.10 , la mortalité
ne se déclenche qu'au 8è et 7è jour après l'infestation et atteint le taux
de 26,7 % et 46,9 % au Ilè jour.
Doses
2
3
4
5
,6
)
81
0
2,21,10
2,21.10 ~,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
spores/ml
Nombre de
25
40
40
40
40
40
40
40
larves
Nombre de
%
%
%
%
%
%
%
%
jours après
m M
m
M
m
M
m
M
m
M
lm
M
m
M
m
M
infestation
3
4
2
5
4
10
5
3
7,5
5
12,5
8
20
16
40
19
47,5
6
11 26,5 12
30
18
45
30
75
31
77 ,5
7
1
2,5 14 35
21
52,5 24
60
40
100
40 100
8
3
7,5
5 12,5 19 47,5 29
72 ,5 32
80
9
5 12,5 12 30
24 60
36
90
30 100
10
1
4
9 21,7 17 41,9 27 67,1 40
100
11
1
4
11 26,7 19 46,9
12
3
12
Tableau
28
Mortalité cumulée par jour et par dose chez les L
infestées
4
par ingestion.

---

.. ~.
-
126 -
Fi gure 71
Influence de différentes doses de spores de
N. rn~ena~ sur les mues larvaires des L4
infestées par voie orale.
% des L
obtenues
5
2
% des L
(dernier stade)
5
3
% des L6

---

-
127 -

---

....
,.
- 128 --
c) Action de la dose des spores sur les mues larvai-
res des L .-
Les larves de 4è stade que nous avons infestées ont toutes
4
effectué une 5è mue; pour les unes, c'est la dernière mue alors que pour
les autres, c'est l'avant-dernière crise physiologique. Nous avons aussi
remarqué que la proportion des L
qui n'ont effectué que 5 mues larvaires
4
pour atteindre le dernier stade est élevée pour les fortes doses. Ainsi,
8
pour 2,21.10 , 77,5 % des larves n'ont effectué que 5 mues alors que,
2
pour 2,21.10 , seulement 22,5 % des larves ont atteint le dernier après 5
mues (tableau 29, fig. 71).
Dose s
2
3
4
5
6
7
8
0
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
spores/ml
Nombre de
25
40
40
40
40
40
40
40
larves
Stades
nI: % nb
%
nb
% nb
%
nb
% nb
%
nb
%
nb
%
obtenus
L
21 84 31 77 ,5
27
67,5 22
55
17
42,5 14
35
13 32,5
9
22,5
5
L
(DS)
4 16
9 23,5
13
32,5 18
45
23
57,5 26
65
27 67,5 31
77 ,5
5
L
21 84 31 77 ,5
27
67,5 19
47, 12
30
9
22,~
5 12,5
6
3
7,5
Tableau 29
Action des différentes doses de spores ingérées sur les
mues larvaires chez les L .
4
d) Action de la dose des spores sur la nymphose et la
mue imaginale.-
Après avoir suivi le développement des larves ayant at-
teint le dernier stade, nous avons noté que pour les suspensions sporales
2
3
4
de concentration 2,21.10 ,2,21.10
et 2,21.10 , respectivement 82,4 %,
59,7 % et 37 % des L
ont subi
la mue nymphale (tableau
30
figure
67).
4
Mais malheureusement aucune de ces nymphes n'a donné un imago, car elles
sont mortes de microsporidiose et aussi de bactériose.

---

- 129 -
Doses
nombre de nombre de
%
(spores/ml) nymphes
larves
nymphose
obtenues
mortes
0
22/25
3/40
88
2
2,2\\'10
29/40
11/40
82,4
3
2,2\\'10
21/40
19/40
59,7
4
2,2\\'10
13/40
27/40
37,0
5
2,21.10
0/40
40/40
0
6
2,21.10
0/40
40/40
0
7
2,21.10
0/40
40/40
0
1
8
j
2,2\\'10
0/40
40/40
0
1
Tableau
30
Action des différentes doses de
spores ingérées sur la nymphose chez les L4
. . INFESTATION PAR INJECTIDN.-
Nous avons complété notre étude par l'examen de la sensibilité
des larves de 4è stade à la Microsporidie après inoculation d'une quanti-
té connue de spores (voir page
92). Les expériences ont été faites dans
les mêmes conditions de température, d'humidité et d'hygrométrie et avec
les mêmes suspensions de spores que dans les essais précédents. Plusieurs
lots de larves de 4è stade ont été utilisés dans ces séries d'expériences.

---

- 130 -
a) Mortalité larvaire.-
La mortalité a été notée
chaque Jour pour toutes les dilutions et les résultats obtenus nous ont
permis d'établir le tableau
31
et la courbe de mortalité de la figure 64.
Il ressort de ces résultats que
5
- pour les doses égales ou supérieures à 2,21.10 , la mortalité est un~-
quement larvaire.
- pour les doses inférieures à celle-ci, certaines larves échappent à
l'action
de la Microsporidie et effectuent la mue nymphale. Le taux de la
mortalité, pour les basses doses, varient ici aussi en fonction de la quan-
tité de spores administrées.
Les frottis de
larves mortes montrent également beaucoup de
bactéries.
Doses
nombre de nombre de nombre de
%
spores/ml larves
morts
survivants mortalité
0
30
6
24
20,0
2
2,21. ID
30
14
16
33,3
3
2,21.10
30
19
11
54,1
4
2,21.10
30
25
5
79,1
5
2,21.10
30
30
0
100
6
2,21.10
30
30
0
100
7
2,21.10
30
30
0
100
8
2,21.10
30
30
0
100
Tableau
n031: Mortalité des L
infestées par inoculation.
4

---

- 131 -
b) Evolution de la mortalité.-
Nous avons noté, au
cours de ces essais par injection, que la mortalité début~ plus tôt que
8
dans le cas des contaminations par la voie orale. Par exemple, pour 2,21.10
spores/ml, la mortalité commence dès le 3è jour après l'infestation; bien
que cette mortalité se déclenche tôt dans cette expérience, elle évolue
cependant en 5 ou 6 jours comme dans les essais
par ingestion
libre (tableau
32, figure 72).
Doses
2
)
5
,E
7
,8
spores/ml
0
2,21.10
2,21.10 2,21.10 2,21.10
2,21.10 ~,21.10
2,21.10
Nombre de
30
30
30
30
30
30
30
30
larves
Nombre de
%
%
%
%
%
%
%
%
jours après m
M
m
M
m
M
m
M
m
M m
M m
M m
M
infestation
3
2
6, E
4
2
6,6
4 13,3
7
23,3
8
26, E
5
1
3,3
3 10
8
26,6 10 33,3 13
43,3 17
56, E
6
2
6,oE
3
3,6
4
7,2
8 21 ,4 17
53,6 17 53,6 21
67,8 27
89,~
7
4
13, ~
7
11,5
7 11,5 15 42,3 23
73,0 26 84,6 30 100
30 100
8
6
20
9
12,5 12 25
23 70,8 29
95,8 30 100
9
11
20,8 16 41,6 25 79,1 30 100
.,
10
14
33,3 19 54,1
Tableau
32
Mortalité cumulée par jour et par dose chez les L
infestées
4
par inoculation.
c) Action des différentes doses de spores inoculées
sur la nymphose des 1
.- Des 210 larves traitées, 32 seulement, soit 66,7 %
4
2
3
pour la concentration 2,21.10 , 45,7 % pour la dilution 2,21.10
et 20,9 %
4
pour la dose 2,21.10 , ont pu effectuer la mue nymphale (tableau 33,
figure
67
). Mais aucun imago n'est sorti de ces nymphes mortes de
mi-
crosporidiose et de bactériose.

---

- 132 -
M
%100
/
1
• 0
, 1
...
1
,"...-~
f
, /
!S f
/
1
1
/
/
,1
, 0 /
/
/
1
1
/
, 1 1
/
1
/
1
/
1
1
1
/
1
1
1
1
.1
/
/,
/
1
1
1
/
/
1
/
I l
1
/
I ,
,
L ' "
~J
•
/
1
1
50
"
1
1
/ . /1
, 1
,
,
,
1
l
'
1
l '
1
'd
l
1
l
'
1
~' ,'~/
,
l ,
,
J ,
"
1
1
/
1
,
/
,
[J,'
1
1
,
10
~
Il
0
1
3
5
7
9
11
J.A.!
FIGURE 72
Mortalité cumulée des L
infestées par injection.
4
Abréviations : voir figure 65
Légende : voir figure 65

---

- 133 -
Doses
Nombre de
Nombre de
%
1
spores/ml
Nymphes
larves
nymphose
obtenues
mortes
0
24/30
6/30
80
2
.2,21.10
16/30
14/30
66,7
3
2,21.10
11/30
19/30
45,9
4
2,21.10
5/30
25/30
20,9
5
2,21.10
0/30
30/30
0
6
2,21.10
0/30
30/30
0
7
2,21.10
0/30
30/30
0
8
2,21.10
0/30
30/30
0
Tableau
33
Action des différentes doses de spores
inoculées sur la nymphose chez les L4
4°) ~~!i~~_~~~_~i~f~E~~!~~_~~~~~_~~_~E~E~~_~~E_h~~_S5
De même que chez les larves de 4è stade, l'étude de l'influence
de la dose des spores sur le développement de la maladie chez les L
a été
5
entreprise selon les méthodes de la contamination par voie ~rale et de la
contamination par injection .
•
CONTAMINATION PAR VOIE ORALE.-
Cette contamination a été effectuée selon les mêmes principes
que les essais précédents : larve de 5è stade, venant de muer, nourries pen-
dant 2 jours sur un cube de milieu badigeonné de suspension de spores. Diffé-
2
8
rentes doses allant de 2,21.10
à 2,21.10
ont été utilisées.
a) Mortalité larvaire.-
La mortalité larvaire chez
les L
n'atteint pas 100 % quelle que soit la quantité de spores ingérées.
5
Par exemple :
6
7
8
- pour 2,21.10 , 2,21.10
et 2,21.10 , la mortalité atteint respectivement
66,6 %,83,3 % et 91,6 % (tableau
34
, figure
64).
Nous avonS ici aussi noté la présence des Bactéries dans les
frottis des larves mortes.

---

- 134 -
Doses
Nombre de
Nombre de
Nombre de
%
spores/ml
larves
morts
survivants
mortalité
0
30
3
27
ID
2
2,21.10
40
8
32
11, 1
3
2,21.10
40
13
27
25
4
2,21.10
40
17
23
36,1
5
2,21.10
40
23
17
52,7
6
2,21.10
40
28
12
66,6
7
2,21. 10
40
34
6
83,3
8
2,21.10
40
37
3
91,6
Tableau
34
Mortalité totale des L
infestées par ingestion.
5
b) Evolution de la mortalité chez les L _ . -
Quelle
5
que soit la dose utilisée, la mortalité n'est pas uniquement larvaire et cel-
le-ci s'étale dans le temps en fonction du nombre de spores ingérées.
7
8
- Pour les doses 2,21.10
et 2,21.10 , la mortalité commence dès le 4è
jour et atteint le taux de 83 % et 91,9 % au 7è jour.
2
3
- Pour 2,21.10
et 2,21.10 , elle débute au 6è jour et atteint Il,1 % et
25 % au Ilè jour (tableau
35
, figure
73).
Doses
2
3
4
5
6
0
7
8
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
spores/ml
2,21.10
2,21.10
nombre de
30
40
40
40
40
40
40
40
larves
nombre de
%
%
%
%
%
%
%
%
jour après
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
infestation
4
5
1
3,3
3
4,3
2
1,7
1
2,5
5
12,5
8
20
6
1
3,3
2
1,7
4
6,9
7
14,6
9
19,8
8
17,2 13
PO,1 17
32,7.
7
2
6,6
4
3,6
7
11,6 12
25,0 14
30,3 16
37,9 25
~ 1,2 29
73,8
8
2
6,6
5
6,3
9
17,0 13
27,7 21
48,9 20
46,4 34
83,9 37
91 ,9
9
3 10
7
8,3 11
19,4 16
33,3 23
52,7 28
67,8
10
7
8,3 11
19,4 17
36,1
11
8
11, 1 13
25,0
Tableau
35
Mortalité cumulée par jour et par dose chez les L
infestées
5
par ingestion.

---

-
135 -
M
%100
J
/ 1
1 1 "
1
1
1
,
1
4/
.0
1
1
1
1
1
1
0'
1
1
1
1
,.
1
•
, ,
1 "
'
1
1
1
1
d
50
1
1
1
1
,
fj.
,
l
,
,
'
1
1
1
1
"
1
l
"
l
,
, ,
1
1
'
1
.
, : '1
1
_
"
'.d
1
1
1 /
,
1 1
1
1
i~/ • 1,1
d,'"
10
•
0
1
3
5
7
9
lA.!
FIGURE 73
Mortalité cumulée des L5 infestées par voie orale.
Abréviations : voir figure 65
Légende : voir figure 65

---

- 136 -
c) Action des différentes doses de spores ingérées
sur la nymphose et la mue imaginale .- Les résultats regroupés dans le tableau
36 et la figure
67
montrent que des nymphes ont été obtenues. Le pourcen-
tage de cette nymphose varie selon les concentrations de la suspension sporale
util isée :
2
3
4
5
6
7
8
- pour 2,21.10 ,2,21.10 ,2,21.10 ,2,21.10 ,2,21.10 ,2,21.10
et 2,21.10
respectivement 88,9 % , 75 %, 63,9 %, 47,3 %, 33,4 %, 16,7 % et 8,4 % des larves
ont effectué la mue nymphale.
là aussi, aucune de ces nymphes n'a effectué la mue imaginale. Elles
étaient mortes de microsporidiose et de bactériose.
Doses
nombre de
nombre de
%
spores/ml
nymphes
larves
nymphose
obtenues
mortes
0
27/30
3/30
90
2
2,21.10
32/40
8/40
88,9
3
2,21.10
27/40
13/40
75
4
2,21.10
23/40
17/40
63,9
5
2,21.10
17/40
23/40
47,3
6
2,21.10
12/40
28/40
33,4
7
2,21.10
6/40
34/40
16,7
8
2,21.10
3/40
37/40
8,4
Tableau 36
action des différentes doses de spores
ingérées sur-la nymphose chez les L5
•
CONTAMINATION PAR INJECTION.-
L'action de la Microsporidie sur les larves de 5è stade d'Ho anmi-
geka a été aussi précisée quantitativement par des expériences d'injection;
la quantité de suspension inoculée est de 0,1 pl et pour chaque dilution 25
larves ont été traitées. Les larves servant de témoins ont été injectées avec
de l'eau physiologique.

---

- 137 -
a) Mortalité larvaire.-
Comme nous l'avons observée
au cours des expériences de contamination par ingestion, ici aussi, la mor-
talité chez les larves inoculées n'est pas uniquement larvaire, car quelle
que soit la quantité de spores injectées, la mortalité n'atteint pas le taux
de 100 %. Mais en comparant les taux de mortalité enregistrés dans cette sé-
rie d'expérience à ceux obtenus dans les essais de contamination par voie
orale, on remarque que, pour les mêmes doses, le taux de mortalité est plus
élevé chez les larves inoculées que chez celles qui ont été infestées par
la voie orale (tableau 37
, figure 64)
Doses
nombre de
nombre de
nombre de
%
Spores/ml
larves
morts
survivants
mortalité
0
25
3
22
12
2
2,21.10
25
6
19
13,6
3
2,21.10
25
9
16
27,2
4
2,21.10
25
12
13
40,9
5
2,21.10
25
17
8
63,6
6
2,21. 10
25
19
6
72,7
7
2,21.10
25
23
3
90,9
8
2,21.10
25
24
1
95,4
Tableau
37
Mortalité des L
infestées par inoculation.
5
b) Evolution de la mortalité.-
L'évolution de la
mortalité chez les L
traitées par inoculation n'est pas très différente de
5
celle observée chez les individus infestés=par ingestion libre. En effet,
mis à part le délai d'évolution de la maladie qui est ici relativement court,
la mortalité, qui n'est pas uniquement larvaire, s'étale sur 4 à 6 jours se-
lon la dose injectée (tableau
38
, figure 74).

---

-
138 -
M
%10
1
14
1
1
l
,
l
,
[;S.,'
,
1
1
1
,
q
/i,.
1
1
1
, ",
50
, , "
1
I ,
1 1
/
, "
1
1
1
1
1
10
o
1
3
7
9
11
JA.!
FIGURE 74
Mortalité cumulée des L
infestées par injection.
5
Abréviations : voir figure 65
Légende
voir figure 65

---

- 139 -
.
Doses
2
3
4
5
6
7
8
spores/ml
0
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,2\\.10
Nombre de
25
25
25
25
25
25
25
25
larves
,
Nombre de
%
%
%
%
%
%
%
%
jour après
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
infestation
4
2
8
3 12
4
16
5
20
5
1
4
2
8
2
8
4
16
7 28
9
36
Il
44
6
3 12
3
12
5
20
8
32
12 48
14
56
18
72
7
2
8
5 13,0
6
17,
8
26,C
11
39,
17 65,2
23
91,3 24
95,6
8
3
12
6 13,6
8
22:~
36,
15
54 , ~ 19 72,7
Il
9
9
27,
12
40, C 17
63, E
Tableau
38
Mortalité cumulée par jour et par dose chez les L
infestées
5
par inoculation.
c) Action des différentes doses de spores inoculées
sur la nymphose et la mue imaginale.-
Les taux de nymphose obtenus varient
en fonction de la quantité des spores inoculées, comme l'indiquent le tableau
39
et la figure
67
En comparant ces taux à ceux obtenus au cours des
essais par ingestion, on remarque qu'ici
très peu de larves atteignent le
stade nymphal. L'étude du pourcentage de la mue imaginale montre aussi qu'aucu-
ne nymphe n'effectue cette mue.
Dbses
nombre de
nombre de
%
spores/ml
nymphes
larves
nymphose
obtenues
mortes
0
22/25
3/25
88
2
2,2\\.10
19/25
6/25
86,4
3
2,2\\.10
16/25
9/25
72,8
4
2,21.10
13/25
12/25
59,1
5
2,2\\.10
8/25
17/25
36,1
6
2,2\\.10
6/25
19/25
27,3
7
2,21.10
3/25
22/25
9, 1
8
2,2\\.10
1/25
24/25
4,6
Tableau
39
: Action des différentes doses de
spores inoculées sur la nymphose chez les L .
5

---

- 140 -
Des larves de dernier stade ont été également soumises aux expérien-
ces d'infestations. Seule la contamination par la voie orale a été pratiquée
sur ces séries d'essais.
a) Mortalité larvaire.-
La mortalité larvaire enre-
gistrée au cours de ces essais est inférieure au taux de 100 % pour toutes
les doses que nous avons utilisées.
- Elle est inférieure à 50 % pour les dilutions égales ou inférieures à
6
2,21.10
spores/ml.
- Elle atteint cependant les taux de 68,4 % et 82,4 % pour les concentra-
7
8
tions 2,21.10
et 2,21.10
spores/ml (tableau 40, fig. 64).
Les frottis frais des larves mortes sont aussi pleins
de Bactéries.
Doses
nombre de
nombre de
nombre de
%
spores/ml
larves
morts
survivants
mortalité
0
30
1
19
5
2
2,21.10
30
3
27
5,2
3
2,21.10
30
7
23
19,2
4
2,21.10
30
9
21
26,3
5
2,21.10
30
11
19
33,3
6
2,21.10
30
15
15
47,3
7
2,21.10
30
2j
9
68,4
8
2,21.10
30
25
5
82,4
1
Tableau
40
Mortalité totale des L
infestées par voie orale.
6
b) Evolution de cette mortalité.-
Des 210 larves
traitées, 91 seulement ont succombé
sous l'action de la Microsporidie. Alors
qu'elle se déclenche tôt (4 à 5 jours après l'infestation) et s'étale sur 4
4
jours pour les doses supérieures ou égales à 2,21.10
spores/ml, cette morta-
lité ne débute qu'au 6è ou 7è jour et ne s'étale que sur 2 ou 3 jours pour
2
3
les doses 2,21.10
et 2,21.10
(tableau
41, figure 75).

---

-
141 -
M
%1
1
,
1
1
..
1
5
~ /'
1
1
JJ
1 1
'.. cr
1 l
" "
1 l
,
1 1 ...-(
l '
U
.~- ..
~,','
,
1 1
l
'
1
Il
1
1
.'
1
1
li
o
3
5
7
9
lAI
FIGURE 75
Mortalité cumulée des larves de dernier stade
infestées par voie orale.
Abréviations : voir figure 65
Légende : voir figure 65

---

- 142 -
Doses
2
3
4
5
6
7
8
spores/ml
a
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
7,21.10
Nombre de
20
30
30
30
30
30
30
30
larves
Nombre de
%
%
%
%
%
%
%
%
jours après
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
m
M
infestation
4
2
6,6
5
3
10
3
10
5
16,6
4
13,3
8
26,6
6
1
5
3
5,2
6
15,7
7
19,2 10
29,8 13
40,3 16
50,8
7
2
1,7
6
15,7
6
15,7 10
29,8 13
40,3 18
57,8 ~5
82,4
8
3
\\5,2
7
19,2
9
26,3 11
33,3 15
47
1
,3 21
68,4
1
Tableau
41
Mortalité cumulée par jour et par dose chez les L
infestées
6
par ingestion.
c) Action des différentes doses de spores utilisées sur
la nymphose et la mue imaginale.-
Les 119 larves qui ont échappé à l'action
de la Microsporidie ont toutes effectuée la mue nymphale ; les nymphes se
répartissent de la façon suivante :
2
- 94,8 % pour la dose 2,21.10
3
- 80,8 % pour la dose 2,21.10
4
- 73,7 % pour la dose 2,21.10
5
- 66,7 % pour la dose 2,21.10
6
- 52,7 % pour la dose 2,21.10
7
- 36,6 % pour la dose 2,21.10
8
- 17,6 % pour la dose 2,21.10
(tableau 42, figure 67)
Toutes ces nymphes sont bourrées de Microsporidies et de Bactéries et
aucune n'a malheureusement donné d'imago.

---

- 143 -
Doses
nombre de
nombre de
%
spores/ml
nymphes
larves
nymphose
obtenues
mortes
0
19/20
1/20
95
2
2,21.10
27/30
3/20
94,8
3
2,21.10
23/30
7/20
80,8
4
2,21.10
21/30
9/20
73,7
5
2,21.10
19/30
11/20
66,7
6
2,21.10
15/30
15/30
52,7
7
2,21.10
9/30
21/30
31 ,6
8
2,21.10
5/30
25/30
17,6
1
Tableau
42
: Action des différentes doses de spores
ingérées sur la nymphose chez les L .
6
Les différents résultats exposés mettent en évidence une influence
•
•
1
très nette de la dose de spores sur le nombre des larves tuées a~ns~ qu
une différence de sensibilité entre les stades larvaires.
L'action de la dose se manifeste nettement dans tous les essais que
nous avons réalisés. En effet, chez les larves de même stade, le taux de
mortalité est d'autant plus élevé que la quantité de spores ingérées ou
injectées est plus grande. Pour les fortes concentrations, la majorité
des larves meurent ~ l'état larvaire, alors que pour les faibles doses,
la plupart des larves effectue la mue nymphale comme l'indique le tableau
43
. Nous avons aussi noté que lorsque la densité de spores ingérées
ou inoculées est forte, le délai d'incubation de la maladie est court;
il semble donc que la présence d'un nombre suffisant de spores soit né-
cessaire pour vaincre la résistance opposée par la larve.

---

- 144 -
Doses
nombre de
nombre de
nombre de
%
spores/ml
larves
nymphes
larves
nymphose
obtenues
mortes
0
240
208
32
86,7 -
2
2,21.10
305
204
101
77 ,2
3
2,21.10
305
147
158
55,6
4
2,21.10
305
98
207
37,1
5
2,21.10
305
44
261
16,7
6
2,21.10
300
33
267
12,7
7
2,21.10
305
18
287
6,9
8
2,21.10
285
9
276
3,.7
total
2350
761
1589
32,4
J
Tableau 43
: Tableau récapitulatif de l'action des diffé-
rentes doses de spores ingérées ou inoculées sur la nymphose
de tous les stades larvaires étudiés.
L'évolution des nymphes obtenues au cours de notre expérimentation
a été suivie pour savoir si elles pouvaient donner:des imagos, cequi nous
permettait
éventuellement de réaliser d'autres études, notamment sur la
reproduction; nous avons malheureusement constaté qu'aucune de ces nym-
phes n'a pu effectuer la mue imaginale. On peut donc penser que si cer-
taines larves ont échappé à l'action de la Microsporidie, c'est parce que
la dose utilisée n'était pas suffisante pour avoir un effet immédiat a
l'étatlarvaire ou alors, parce que les Insectes contaminés étaient en fin
de vie larvaire, de sorte que la mue nymphale a pu se produire lorsque
l'infestation était encore peu développée; mais cette infestation était
potentiellement assez virulente pour provoquer une mortalité au stade
nymphal.
La mortalité nymphale enregistrée dans nos essais, réduit ainsi les
chances de contamination des imagos et les possibilités de transmission
du parasite d'une génération à l'autre.

---

- 145 -
Au cours de nos études sur les relations entre la quantité de spores
inoculées et la mortalité associée chez les L
et L , nous avons constaté
4
5
que, suivant la méthode de contamination (par voie orale ou par injection)
les larves du même stade traitées avec les mêmes doses de spores présen-
taient une différence de sensibilité aux germes administrés. En effet, con-
taminées par injection, les larves de 4è et 5è stades meurent plus tôt et
le pourcentage de mortalité est nettement supérieur à celui enregistré chez
les larves de mêmes stades contaminées avec les mêmes doses, mais par voie
orale. On serait tenté de donner deux explications à l'origine de la mor-
talité élevée observée chez l~s larves inoculées:
1°/ Les larves, affaiblies par la piqûre, n'ont pu opposer une ré-
sistance suffisante à la microsporidiose. La mortalité élevée observée
chez les témoins traités par injection confirme cette explication.
2°/ Si la contamination par ingestion entraine une mortalité relati-
vement faible, c'est qu'il existerait au niveau du tube digestif une ré-
sistance opposée à l'infestation par l'épithélium intestinal, barrière
qui serait absente dans l'hémocoele.
L'influence de l'âge de la larve sur la microsporidiose a été égale-
ment mise en évidence au cours de nos essais. Les résultats regroupés
dans le tableau 44
font apparaître une plus grande
résistance relative des larves âgées. En effet, les doses provoquant 50 %
de mortalité (DL 50), par ingestion, sont approximativement
3
- pour les 2è et 3è stade de 2,21.10
4
- pour le 4è stade de 2,21.10
5
- pour le 5è stade de 2,21.10
6
- pour le dernier stade de 2,21.10
Si les larves de 2è stade ont à peu près le même DLSO que les larves
de 3è stade, c'est parce que, s'alimentant mo~ns activement que les L ,
3
la quantité de spores ingérées pendant les 3 jours passés en présence du
milieu nutritif contaminé n'est pas suffisante pour provoquer immédiate-
f
· ~
même
l '
.
, .
f .
~
ment une
orte morta1~te au/stade
arva~re; cec~ est d a~lleurs con ~rme
par le long délai d'incubation de la microsporidiose observée chez les L .
2
Si la mortalité est faible chez les larves âgées, c'est aussi parce que
la Microsporidie, introduite dans l'organisme à un stade larvaire assez
proche de la nymphose, ne se multiplie pas suffisamment pour provoquer
une mortalité larvaire importante, mais elle exerce cet effet; l'état
nymphal.

---

- 146 -
Doses
2
3
4
5
6
7
8
spores/ml
a
2,21.10
0,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
2,21.10
Stades
M
M
M
M
M
M
M
M
larvaires
L
15
38,2
69,1
86,7
100
100
100
100
2
L
13,3
25,0
46,1
67,7
100
100
100
100
3
L
12
17,6
40,3
63,0
100
100
100
100
4
C.V.O.
L
20
33,3
54,1
79, 1
100
100
100
100
4
C.I.
L
la
11, 1
25
36,1
52,7
66,6
83,3
91 ,6
5
C.V.O.
---
L
12
13,6
27,2
40,9
63,6
77,7
90,9
95,4
5
C.I.
. -~
L
5
5,2
19,2
26,3
33,3
47,3
68,4
82,4
6
Tableau 44
Récapitulation de la mortalité observée chez les larves des diffé-
rents stades d'Ho anmigeka infestées par voie orale ou par in-
jection.
Abréviations : C.V.O. = contaminée par voie orale
C.I. = con-
taminée par injection
M = % mortalité.
Quant à l'origine de la mortalité observée chez les larves d'Ho anmi-
geka, espèce qui a fait l'objet de notre étude, nouS pouvons dire qu'elle n'est
pas uniquement microsporidienne. En effet, en vérifiant la présence ou non de
spores de No~ema maniekae dans les larves et les nymphes mortes, nous avons noté
une pullulation de Bactéries diverses dans les frottis humides réalisés ; ce qui
nous amène à penser qu'il interviendrait une mortalité bactérienne complémentaire.
Ce phénomène a été aussi signalé par certains auteurs, notamment HOSTOUNSKY (1970),
KHARAZI-PAKDEL (1968) et TANABE et TAMASHIRO (1967). HOSTOUNSKY (1970) en étudiant
pe~tophoka g~~~a, espèce nouvelle parasitant le tube digestif de Chny~omeia
g~o~~a, a noté une invasion du tube digestif par des Bactéries ; KHARAZI-PAKDEL
(1968) en recherchant la pathogénie de No~ema meiolonthae vis à vis des larves

---

- 147 -
de M~olontha m~olontha, a constaté qu'en plus de la mortalité provoquée
par la Microsporidie, intervient une mortalité par septicémie bactérienne.
TANABE et TAMA5HIRO (1967) en testant No~ema ~choplU6~ae sur des larves
de plusieurs espèces de Lépidoptères, ont noté que certaines larves étaient
mortes du fait de la multiplication de Bactéries.
D'où viennent alors ces Bactéries? On peut tout d'abord penser
que la suspension de spores a été contaminée par des Bactéries de l'atmos-
phère ou apportées par les broyats des larves, malgré les précautions
d'asepsie prises lors des injections ou des contaminations par voie orale
(voir page
92). Dans la littérature, on trouve d'autres explications:
- Selon VAGO (1956 b), les actions microbiennes peuvent être influencées
par une infection précédente, qu'elle soit d'origine virale, bactérienne,
cryptogamique ou à Protozoaires.
- D'après KHARAZI-PAKDEL (1968), une Microsporidie facilite la péné-
tration, puis la prolifération des Bactéries dans l'hémocoele des Insec-
tes.
- Selon WEISER (1976), ces Bactéries accéderaient à l'hémocoele par
les multiples perforations que font les filaments polaires, à travers le
tube digestif.
De l'ensemble des résultats exposés, on peut donc tirer deux
conclusions
- le taux de mortalité chez les larves de même stade est d'autant plus
élevé que la quantité de spores ingéré~ou inoculé~est plus grande.
L'origine de cette mortalité est non seulement microsporidienne, mais liée
également à la multiplication des Bactéries diverses chez les larves.
- les larves sont d'autant plus sensibles à la microsporidiose qu'elles
sont jeunes.

---

- 148 -
III - É T U D E BIO MÉ TRI QUE
Au cours de nos recherches sur la sensibilité des larves de
2è, 3è, 4è, 5è et de dernier stade d'Ho anmige~ à No~ema m~e~e, il
nous a été donné de constater une différence très nette de développement
des larves élevées sur du milieu nutritif contaminé par rapport aux indi-
vidus témoins élevés sur du milieu badigeonné seulement avec de l'eau.
NOus avons alors décidé d'entreprendre des études bioIDétriques de ces
larves parasitées.
1°/ Action de la microsporidiose sur la croissance, le poids
et la durée de vie des larves d'Ho anmig~
a) ~~i~~_~~!_l~_~!~i~~~~~~_~t_l~_E~i~~_~~~_l~!Y~~
Plusieurs lots de larves de 2è stade sont infestés
par
2
voie orale avec des suspensions de spores de concentration 2,21.10
sporesl
ml
tous les jours, environ 20 larves de différents lots sont endormies
au chloroforme, puis mesurées et pesées. Les larves-témoins nourries sur
du milieu humidifié
par l'eau physiologique sont également soum~ses aux
mêmes opérations. Les résultats des essais ainsi réalisés montrent que
les larves parasitées ont une taille (tableau 45,
figure 78
) et un poids
(tableau 45) nettement inférieurs à ceux des larves témoins.
Taille moyenne (mm)
Poids moyen (mg)
nombre
Stades de
larves
saines
malades
saines
malades
II
153
4, 95~0, 19
4,89:0, 17
l ,7:0,27
l ,7~0 ,29
III
139
9,85~0,38
9,81~0,35
15,5~2,1
15,3~2,2
IV
118
14,80~0,50
12, 13~0,43
52
~3,8
27
~4,6
V
61
20,65~0,48
17,75::0,42
98
~4,5
57,5~2,8
D.S.
46
33,1:: 0,83
24,20~0,78
382
+29
156
+47
Tableau
45
Taille et poids des larves saines et des larves malades.

---

- 149 -
Taille(mm)
40
n
20
5
1 1
L2
L3
L4
L5
D.S Stade
FIGURE 78
Influence de N. manienae sur la croissance des
larves de 2è stade d'Ho ~migena.
Légende
o
- larves saines (témoins)
larves parasitées

---

-
150 -
PLANCHE 17
Action de N. Mani~e sur la taille des larves et des Nymphes d'Ho ~g~a.
Figure 76
Larves saines et infestées
l
infestées
S = saines
Figure 77
Nymphes saines et infestées
l
infestées
S = saines

---

PLANCHE 17
•
•
lem

---

- 151 -
Le ralentissement du rythme de cro~ssance s'observe chez les larves à partir
du 4è stade. Au dernier stade, la différence de taille peut atteindre 1 cm
(Planche 17, figure 76).
La durée du cycle biologique des larves de 2è
stade parasitées a été également suivie afin de déterminer si N. mani~e
pouvait avoir une influence sur les durées d'évolution des différents stades
larvaires ; les résultats que nous avons obtenus sont regroupés dans les
tableaux
46 a
et 46 b
Aussi bien chez lez larves saines que chez les
larves malades, les 2è, 3è, 4è et 5è stades ont la même durée; le dernier
stade (atteint après 5 ou 6 mues) dure par contre en moyenne 5 jours chez
les larves parasitée~, alors qu'il dure en moyenne 3 jours chez les larves
saines. No~ema mani~e entraîne un allongement de la durée moyenne de la vie
larvaire de 2 jours, et cet allongement à lieu surtout au dernier stade.
Stades larvaires
II
III
IV
V
Temps
saines
2,87:0,30 2,19:0 ,43 2,97:0,21 3,32!0,81
moyen
(en jours)
Malades 2,78!O,41 2,23!0,37 2,83:0,37 5,56:0,47
a) Individus ayant 5 stades larvaires.
Stades larvaires
II
III
IV
V
VI
Temps
saines
2,87!0,41 2, 19!O, 43 2,lO!0,39 2,41!0,37 3 ,28!0 ,80
moyen
(en jours
malades 2, 78 :t0 ,41 2,23!0,37 2,19:0,41 2,39!0,38 5,68:0,41
b) Individus ayant 6 stades larvaires.
Tableaux 46 a,b : Durée de la vie des larves d'Ho ~g~.

---

- 152 -
2°/ Action de N. man1e~ae sur le moment de la nymphose et
sur le poids des nymphes
A la suite de la contamination des larves de 2è, 3è et 4è
2
stades avec la suspension des spores de concentration 2,21.10
spores/ml,
nous avons observé que quelques larves ont échappé à l'action de la Mi-
crosporidie et ont effectué leur mue nymphale. Les nombres de nymphes
apparues notés tous les jours montrent que la nymphose débute avec un re-
tard moyen de 2 jours chez toutes les larves parasitées; elle s'étale
sur 3 à 4 jours chez les larves malades alors qu'elle s'étend sur 4 à 5
jours chez les larves témoins (tableau
46,
figures 79, 80 et 81). Les
nymphes obtenues à partir des larves parasitées ne présentent pas de dé-
formations notables, mais leur taille et leur poids semblent varier par
rapport à ceux des témoins. Nous avons pesé les chrysalides ayant mOLns
de 24 h de nymphose. Les variations de tailles et de poids dues à la mi-
crosporidiose apparaissent ici très nettement ; les nymphes malades (mâ-
les et femelles) ont une taille (Planche
17
et figure 77
) et un
poids (tableau
48
) nettement inférieurs à ceux des témoins.
Stades
L
L
2
L["
JbuI:s après Cumul des
%
Cumul des
%
cumul des
%
infestation nymphes
nymphose
nymphes
nymphose
nymphes
nymphose
obtenues
obtenues
obtenues
T
P
T
P
T
P
T
P
T
P
T
P
5
6
5
7
12
8
6
20
19
2
16,6
9
15
50
23
Il
40
10
22
4
73,3 13,3 26
17
63,3
6,6
II
3
15
25
12
83,3 40
23
76,6
36,6
12
9
1
45
2,8
20
66,6
86,6
56,6
13
Il
4
70 Il ,4
22
73,3
76,6
14
16
11
80 31 ,4
15
17
20
85 57,1
Total
17/2C 20/35 85 ~ 7,1
25/IJ 13/30 83,3 73,3 ~6/31 23/30
86,6
76,6
Tableau
47
Influence de N. manie~e sur le moment de la nymphose pour
2
des larves de 2è, 3è et 4è stade infestées par voie orale à la dose de 2,21.10
spore/ml.
(T = témoins; P = parasitées).

---

- 153 -
saines
parasitées
Nymphes
113 0
101 0"
121 ~
127 0"
+
Taille moyenne
19,6 + 0,41
19,8 + 0,23
14,2 + l ,71
14,4 + 1,63
-
-
-
-
(mm)
Tailles extrêmes
17-20
18-20
13-18
12-18
(mn)
Poids moyens (mg)
314,4 ! 47,8
311,7 ! 49,4
183,3 ! 46,5
181,7 ! 47,1
Poids extrêmes
230-374
212-376
120-242
117-238
Tableau 48
Influence de N. mani~e sur la taille et le poids des nymphes
d ' H. aJtm,{g Vta. •

---

-
154 -
N
% 100
50
10
o
2
4
6
8
10
12
14
16
J.A.I
FIGURE 79
Influence de N. mani~e sur le moment de
la nymphose pour les larves de 2è stade.
Abréviations
J .A. 1.
jours après infestation
N
i. de la nymphose
Légende
~= témoins
* * *= parasités

---

-
155 -
N
%10
50
10
o
2
4
6
8
10
12
14 .I.I.A
FIGURE 80
Influence de N. ma~~ae sur le moment de
la nymphose pour les larves de 3è stade.
Abréviations : voir figure 79
Légende : voir figure 79

---

-
156 -
N
% 100
50
10
o
2
4
6
8
10
12
lA.1
FIGURE 81
Influence de N. mani~e sur le moment de
la nymphose pour les larves de 4è stade
d ' H. a..Jtm<.g eJta.
Abréviations: voir figure 79.
Légende : voir figure 79

---

- 157 -
3°/ Conclusion
et discussions
L'ensemble des observations que nous venons d'exposer montrent
1) que la Microsporidie utilisée entraîne un ralentissement du rythme de
croissance des larves d'Ho ~geka.
Des modifications du rythme de croissance chez les larves de plusieurs es-
pèces d'Insectes atteintes de Microsporidioses, ont été également observées
par un certain nombre d'auteurs. Ainsi KHARAZI-PAKDEL (1968) note chez
Metolontha metolontha, un retard dans la croissance des larves de 1er et
2è stade infestées avec une suspension de spores de No~ema metolontha. Ce
retard est d'autant plus important que la quantité de spores dans la tour-
be est plus élevée; KELLEN et LINDEGREEN (1968) décrivent un ralentisse-
ment de la croissance chez les larves de Plodia ~nt~punctetta atteinte
de microsporidiose ; KELLEN et al. (1972) notent que les larves de Paka-
myeto~ ~~etta infestées par No~ema ~~ettae sont plus petites
que les larves saines de même âge; WEISER (1976) rapporte aussi que The-
loh~a hyphan~ae induit un ralentissement de croissance chez les larves
d'Eup~o~ e~y~o~o~. Les prépupes malades ont une taille nettement
inférieure à celle des prépupes saines.
Ce ralentissement de croissance serait due, selon KHARAZI-PAKDEL (1968) à
un effet inhibiteur consécutif à l'incubation de la maladie et à la multi-
plication de la Microsporidie ~/~OSTOUNSKY et WEISER (1973), ce ralentis-
sement est due à une sous-alimentation car les larves malades cessent gé-
néralement de se nourrir. C'est ce que nous avons constaté au cours de nos
essais.
Les Microsporidies ne provoquent pas toujours un ralentisse-
ment de la croissance des larves des Insectes. Beaucoup d'auteurs ont par
contre décrit une augmentation du rythme de croissance par rapport à la
normale chez certains Insectes atteints de Microsporidiose. Ainsi FISHER
et SANBORN (1964) signalent que les T~bo~um parasités par No~ema ont une
taille supérieure à la normale; MAURAND (1973) identifie des stades sup-
plémentaires chez les larves de S~~um o~atum, S. a~eum, S. bezz~
et S. eq~num parasitées par Thetoh~ 6~b~a, Pl~tophoka ~~m~ et
P. deb~~eu~. Ces mues surnuméraires se traduisent par une augmentation
de taille chez ces Simulies. MAURAND et BOUIX (1969), FISHER et SANBORN
(1964) ont alors émis l'hypothèse que les Microsporidies sécrètent une
substance juvénilisante qui prolongerait la durée de la vie des larves-
hôtes.

---

- 158 -
2) Que l'action de la Microsporidie utilisée se traduit aussi par un re-
tard à la nymphose, les nymphes obtenues ayant une taille et un poids net-
tement inférieures à la normale.
Le retard de la nymphose n'est pas un phénomène nouveau chez les larves
d'Insectes atteintes de microsporidiose. FISHER et SANBORN (1962) signa-
lent un retard à la nymphose de 3 à 7 jours des larves de Gatte~a metlo-
netla infestées par une No~ema ; THOMSON (1958) rapporte que l'infesta-
tion des chenilles de Cho~~oneUAa 6urni6~a par P~ezia 6urni6~ae
détermine un retard à la nymphose; ISSI (1965), fait remarquer que la
durée de vie larvaire de P~~ b~~~~eae infestée
par No~ema polyvona
est augmentée; CANNING (1962) a mis en évidence un retard d'au moins 2 à
3 jours de la dernière mue de LoeUô~ mig~~~ mig~o~o~d~ parasi-
tée
par N. loeUô~ae.
Pour certains auteurs, l'origine de ce retard est à rechercher dans l'ac-
tion juvénilisante des Microsporidies. Dans ce cas, les larves parasitées
ne devraient pas effectuer la mue nymphale ; or au cours de nos observa-
tions, non seulement nous avons enregistré des cas de nymphose, mais nous
avons aussi remarqué
que
2
• les larves de 2è stade, infestées par de faibles doses (2,21.10
spo-
res/ml) et ayant subi la nymphose, ont effectué toutes les mues larvaires
dans des temps analogues à ceux des larves témoins. Seul le dernier stade
dure anormalement .
• au lieu d'avoir des mues surnuméraires, au contraire, plus la quanti-
té de spores ingérées par les larves est forte, plus le nombre des larves
n'atteignant le dernier stade que par 5 mues larvaires augmentent.
. Il faut cependant noter que les larves infestées avec de fortes
doses effectuent rarement la nymphose.
Ces observations font penser que l'allongement de la durée du dernier stade
larvaire des H. ~gena parasités par No~ema m~~e est dû à des fac-
teurs, induits par la Microsporidie, que seule une étude biochimique pous-
sée permettra de déterminer.
La baisse du poids et la diminution de la taille des nymphes infestées
observées sont les conséquences de l'action de la Microsporidie sur la
croissance des larves.
Les résultats que nous venons d'exposer montrent donc que la
Microsporidie isolée chez Ch. zaeeo~Uô exerce incontestablement une ac-
tion léthale chez H. ~gena. Celle-ci peut être suivie dans les tissus
de l'hôte.

---

- 159 -
IV - ÉTUDE HISTOPATHOLOGIQUE
Après l'étude quantitative de l'action de la Microsporidie sur les
différents stades larvaires d'Ho ~g~a, nous avons cherché à caractériser
les symptômes observés et les lésions cellulaires occasionnées par celle-ci,
à localiser les tissus sensibles à l'infection et enfin à suivre l'évolution
de la microsporidiose. Des études en microscopie optique et électronique ont
été alors réalisées.
AI Symptomatologie
Les larves malades ne présentent aucun changement de couleur carac-
téristique. Au début de la maladie, les larves perdent leur appétit et cessent
de s'alimenter trois à quatre jours après l'infestation. A la phase aiguë de
la maladie, elles sont moins vigoureuses et leur tonus musculaire est très
diminué de sorte qu'elles sont molles au toucher et sont incapables de se
mouvoir. Très souvent, elles se recourbent sur elles-mêmes.
Les larves venant de mourir prennent rapidement une coloration foncée.
La durée d'évolution de la maladie varie avec l'âge des larves, la quantité de
spores ingérées ou injectées et avec le mode de contamination (voir Méthodolo-
gie
page
91 ). Extérieurement, la maladie se manifeste
chez les larves
par une diminution de la croissance et chez les nymphes par une baisse de la
taille. Après leur mort, les nymphes deviennent noires.
BI ~istologie en microscopiePhotoDique
Pour mettre en évidence les lésions provoquées par la microsporidiose ,
des coupes sériées de 5 à 7 ~m d'épaisseur ont été pratiquées sur les larves
infestées au 3è stade et fixées soit au Bouin alcoolique, soit au Carnoy ou
encore au Shina. Parmi les diverses techniques de colorations utilisées (voir
page
93 ), l'Azan de
Heindenhain été le plus souvent utilisé car, il met en
évidence les spores de la Microsporidie dans les tissus de l'hôte.

---

- 160 -
PLANCHE 18
Hhtopathololh
riS. 82
Inte.tin moyen .ain
(x 94)
riS. 83 1 Inte.tin moyen para.it' par N. m~nl~t (X 310)
ri,. 84 1 Tube de K&lpiShi inte.t' par N. m~nl~t (X 310)
Abr'viatiOA' 1 C.E. • cellule. 'pith'liall' ; E.I. • 'pith'lium
..
into.t1ftAl J L.I. • lumiaro intl.tinalo ; N • noyau dl la collule
'pith'1i'10 J S • .pero••
. .,'
..;'(
'-',
..
./

---

PLANCHE18
. -J
- - 5

---

- 161 -
1°) ~~~E~E~E~~!~g~~_!~§~_~_!~_~~~E~~E~E~~~~~~
L'examen microscopique des coupes transversales des larves
fortement infestées (5 à 7 jours après contamination) révèle la présence de
nombreuses spores dans le tube digestif, les tubes de Malpighi, le tissu adi-
peux, les glandes salivaires, les cellules péritrachéales, l'hypoderme, le
cerveau, les muscles et les gonades.
a) Le tube digestif.-
Le tube digestif est l'un des orga-
nes le plus souvent parasité par N. mani~e. En coupe transversale, l'in-
testin moyen sain ( Planche 18, figure 82) est constitué d'un épithélium serré
limité par une paroi musculaire m~nce. Les cellules épithéliales sont allon-
gées et les noyaux sont situés prés de leur partie basale. Cet intestin, à
un stade avancé de l'infestation, change nettement d'aspect. En effet, la
concentration des sp~res dans les cellules épithéliales provoque l'hypertro-
phie de celles-ci, puis leur rupture, l'épithélium étant alors transformé en
une aggrégation de masses plus ou moins désorganisées (Planche 18, figure 83).
No~ema mani~e provoque aussi des lésions dans la musculeuse
de la
paroi intestinale ; à ce niveau, les spores se regroupent par endroits provo-
quant une dilatation importante.
Enfin, signalons que les lésions provoquées par No~ema mani~e s'ob-
servent
tout le long du tube digestif (intestin antérieur, intestin moyen
et intestin postérieur).
b) Les tubes de Malpighi.-
Cet organe est également très
atteint par la microsporidiose. La concentration des spores dans les cellules
épithéliales des tubes de Malpighi transforme ceux-ci en des sacs contenant
une multitude de spores (Planche 18, figure 84). La structure générale ne
semble pas profondément affectée.
c) Les muscles striés.-
Nous avons suivi l'évolution du
processus pathologique dans les muscles abdominaux en comparant des coupes
histologiques de muscles sains (Planche 19, figure 85). La microsporidie
forme plusieurs foyers d'infection indépendants les uns des autres~ Chacun
des foyers dissout les fibres musculaires et lorsque les muscles sont forte-
ment infestés (Planche 19, figure 87), le foyer infectieux déborde et s'unit
au foyer voisin. Les foyers isolés se réunissent donc et leur extension se
traduit par le remplacement, volume par volume, du contenu du tissu muscu-
laire par les spores de la Microsporidie. Les muscles de la tête sont éga-
lement atteints.
x (Planche 19, figure 86).

---

- 162 -
PLANCHE 19
Histopathologie
(suite)
Fig. 85
Muscle abdominal sain (x 310)
Fig. 86
Muscle abdominal infesté par N. manienae. C'est le
déhut de l'infection et la Microsporidie forme ici
deux foyers indépendants (X 222).
Fig. 87
Muscle abdominal fortement infesté . Le contenu du
tissu musculaire est, ici, remplacé par les spores
de N. manienae (X 475).
Abréviation
s
spores.

---

PLANCHE 19
s
s

---

- 163 -
d) Les cellules péritrachéales.-
Nous avons obser-
vé.des trachées microsporidiosées à la suite de nos infestations expérimen-
tales. Les spores s'accumulent dans le cytoplasme des cellules péritrachéales;
déforment celles-ci vers l'extérieur et la trachée infestée présente alors
des proéminences (Planche 20, figure 88).
e) Le tissu adipeux.-
Le tissu adipeux sain se pré-
sente sous forme de lobes composés de cellules plus ou moins allongées possé-
dant des noyaux presques sphériques (Planche 20, figure 89). L'accumulation
des spores dans le cytoplasme des cellules adipeuses, transforme le tissu en
amas volumineux qui entoure le tube digestif.
Ces amas sont composés de noyaux
des cellules adipeuses et de spores (Planche 20, figures 90 et 91). Dans le
tissu adipeux parasité, nous avons observé de rares nodules qui seraient la
conséquence de l'action phagocytaire des hémocytes. Ces nodules sont composés
de cellules adipeuses infestées, encapsulées par les hémocytes (Planche 20,
figures 90 et 91).
f) L'hypoderme.-
L'hypoderme sain est unistratifié,
formé de cellules dont les noyaux sont relativement petits (Planche 21, figure
92). Après infestations par voie orale et par injection, nous avons eu l'oc-
casion de déceler des amas de spores dans les cellules hypodermiques. Ces
amas déforment, l'hypoderme. vers l'intérieur (Flanche 21, figure 93).
g) Les glandes salivaires.-
Elles sont constituées
histologiquement d'un épithélium à grandes cellules, à noyaux ramifiés et à
cytoplasme granuleux, d'une
intima chitineuse centrale et d'une enveloppe
conjonctive (Planche 21, figure 94). Au cours de nos observations, nous avons
plusieurs fois eu l'occasion de déceler une multitude de spores dans le cyto-
plasme des cellules
épithéliales de ces glandes. Au stade avancé de l'infes-
tation, l'épithélium est complètement détruit, les glandes perdent leur struc-
ture et se transforment en tube de spores (Planche 21, figure 95).
h) Les gonades.-
Dans nos observations histopatholo-
giques, nous avons eu l'occasion de déceler quelques spores dans les gonades
mâles et femelles, mais les lésions de cet organe ne sont jamais importantes
(Planche 22, figure 96).

---

-
164 -
PLANCHE 20
Histopathologie
(suite)
Fig. 88
Lésions des cellules péritrachéales (X 222)
Fig. 89 : Tissu adipeux sain (X 222)
Fig. 90
et 91 : Tissu adipeux et hémocytes fortement infestés.
On remarque ici l'action phagocytaire des hémocytes
(X 222).
Abréviations: C.A. = cellule adipeuse; H.I. = hémocytes infestés
H.S. = hémocytes sains; N = noyau; N.P. = nodules de phagocytose
S = spores.

---

PLANCHE 20
-
.....- - 5
<1P---CA

---

- 166 -
PLANCHE 21
Histopathologie
(suite)
Fig. 92
Hypoderme sain (X 356)
Fig. 93
Hypoderme infesté (X 356)
Fig. 94
Glande salivaire saine (X 94)
Fig. 95
Glande salivaire parasitée (X 222)
Abréviations
C = cuticule ; H = hypoderme ; I.C. = Intima
chitineuse; N = noyau ramifié; S = spores.

---

PLANCHE 21
\\
\\
,\\

---

-
168 -
PLANCHE 22
Histopathologie
(suite)
Fig. 96
Gonade femelle infestée (X 225)
Fig. 97
Cerveau infesté (X 356).

---

PLANCHE22
s

---

-
169
il Le cerveau
Des coupes faites au niveau de la
tête des larves malades et colorées à l'Azan de Heindenhain montrent des amas
de spores dans la masse cérébrale et plus particulièrement dans la partie
périphérique qui peut être totalement occupée par les spores (Planche 22,
figure 97).
Nous avonS aussi effectué l'étude histopathologique des nymphes is-
sues des larves infestées afin d'examiner les changements histologiques qui
peuvent intervenir dans certains tissus après la nymphose ; nous avons consta-
té que les tissus infestés (tube digestif, tissu adipeux, tubes de Malpighi,
cellules péritrachéales, cerveau et muscles) demeurent dans le même état que
chez les larves malades.
Parallèlement à l'étude des altérations provoquées par la Microspo-
ridie de Ch. zaeeoniU6 chez les larves et les nymphes d'Ho akmig~, l'évo-
lution de ces lésions a été suivie par l'examen des coupes pratiquées chez les
larves infestées.
L'évolution de la maladie a été suivie en examinant
les coupes transversales pratiquées chez les larves infestées au 3è et 4è
stades larvaires par voie orale ou par injection à 1, 2, 3,4, 5, 6, 7, 8 ou
2
9 jours. Nous avons utilisé une dose de 2,21.10
spores/ml.
a) Infestation par voie orale.- Seules les larves de
3è stade ont subi le traitement.
1er et 2è jour: Au premier jour, des spores, en nombre très réduit, ont été
observées uniquement dans les cellules épithéliales de l'intestin moyen. Des
coupes effectuées dans la région de l'intestin antérieur et de l'intestin pos-
térieur n'ont pas révélé la présence de spores dans ces portions du tube di-
gestif. A ce stade d'infestation, les cellules épithéliales parasitées diffè-
rent peu des cellules voisines saines. Au deuxième jour le nombre de cellules
de l'épithélium intestinal moyen parasitées augmente. Certaines de ces cellules
contiennent beaucoup de spores et paraissent plus volumineuses que les cellules
saines. Des spores ont été également observées dans la paroi de l'intestin
moyen, des cellules de l'épithélium de l'intestin antérieur et postérieur mais
en très faible quantité.

---

- 170 -
PLANCHE 23
Histopathologie et microscopie
électronique à
transmission.
Fig. 98 et 99 : Relation topographique entre le tissu musculaire
et les mérontes de N. ma~~e. Les mérontes sont en
contact direct avec la myofibrille, et provoquent la
lyse de celle-ci (X 24.000).
Abréviations:
DI
= Diplocaryon ; M = myofibrille ; MH = Mitochon-
drie de la cellule hôte
MU = Membrane unitaire ; N = noyau de la
cellule musculaire; NU
nucléole; Ri = Ribosome
V.G. = vacuoles
golgiennes.

---

PLANCHE23

---

-
171 -
3è jour : Des coupes effectuées dans les parties moyennes postérieure et an-
térieure des larves infestées de trois jours ont révélé la présence de plusieurs
spores dans les cellules épithéliales et dans la paroi de ces différentes
régions du tube digestif. Ces coupes ont également montré quelques spores dans
les tubes de Malpighi et dans les cellules péritrachéales.
4è ~ Sè jour: 4 à 5 jours après le traitement, l'é~thélium intestinal est
intensément infesté
certaines cellules épithéliales sont détruites avec la
libération des spores dans la lumière du tube digestif. Le nombre des cellu-
les des tubes de Malpighi attaquées augmente, tandis que la concentration des
spores dans les cellules péritrachéales provoque, par endroits, le gonflement
de celles-ci vers l'extérieur. Chez certains individus (6/23), l'attaque du
tissu adipeux débute dès le 4è Jour après l'infestation,; pour la plupart des
larves infestées, c'est au Sè jour que des spores ont été observées dans le
tissu adipeux.
6è ~ 7è jour: Toutes les larves fixées au 6è et 7è jours de l'infestation
présentent des spores dans le tissu adipeux, les muscles et l'hypoderme. Le
tissu adipeux, fortement infesté, se transforme en amas de spores, tandis que
l'hypoderme et les muscles ne sont que faiblement touchés.
8è ~ 9è jour: Au 8è et 9è jour, très peu de larves survivent, mais celles
qui ont échappé à l'action de la Microsporidie présentent b,eaucoup de spores
dans leurs muscles, dans l'hypoderme et quelqu~s unes dans les gonades et le
cerveau.
b) Infestation par injection.-
Au cours de cette étude,
seules ont été traitées, les larves de 4è stade et ceci compte tenu de leur
taille relativement grande.
~r ~ 2è jour:
Les coupes transversales pratiquées au n~veau de la zone
d'injection chez les larves infestées de 24 heures, ont montré quelques spores
dans l'hypoderme et le tissu adipeux de ces larves. S'agit-il de nouvelles
spores? Il nous parait difficile de l'affirmer. Cependant, des coupes faites
au niveau et hors de la zone d'injection chez les larves fixées 48 heures après
l'infestation montrent des spores en très faibles quantités dans ces mêmes
tissus.
3è ~ 4è jour
Alors que le nombre des cellules hypodermiques et adipeuses
attaquées par la Microsporidie augmente, des spores ont été observées dans les
muscles et les trachées au 3è et 4è jour après l'infestation.

---

-
172 -
5è ~ 6è jour: Les muscles, le tissu adipeux, l'hypoderme et les trachées
sont intensément infestés. Les muscles et le tissu adipeux perdent leur struc-
ture et se transforment en amas de spores, tandis que l'hypoderme est déformé
vers l'intérieur par l'accumulation des spores. Au 5è et 6è jour, les cellules
germinales des gonades mâles et femelles, la paroi du tube digestif et les
glandes salivaires présentent quelques spores.
7è et 8è jour : Toutes les larves fixées au 7è et 8è jour après infestation
sont bourrées de spores. A l'exception du cerveau, de l'épithélium intestinal
et des gonades qui ne sont que faiblement infestés, tous les autres tissus et
organes (tissu adipeux, trachée, muscle, hypoderme et glandes salivaires) sont
fortement parasités; les cellules adipeuses, les cellules hypodermiques et
les cellules prétrachéales perdent leurs limites. Déjà à ce stade d'infestation,
très peu de larves survivent.
~ 9è jour de l'infestation, les quelques rares larves qui ont échappé à l'ac-
tion de la Microsporidie présentent les mêmes lésions observées chez les larves
fixées au 7è et 8è jour.
fi Microscopie électronique -
Cètte étude a été réa-
lisée afin de connaître la nature aes lésions qu~ ~nterviennent au niveau du
cytoplasmeeldes noyaux des cellules parasitées, mais également et surtout, pour
décrire la' structure des différents stades de développement du parasite.
Deux phénomènes ont été observés :
1°/ Tous les stades de développement du parasite observés sont en contact
direct avec le cytoplasme de la cellule-hôte
ils n'en sont séparés que par
leur membrane unitaire (Planche 23, figures 98 et 99).
2°/ La Microsporidie provoque la lyse du cytoplasme mais ne détruit pas
les noyaux (Planche 23, figure 98 ; Planche 24 figure ]00).
Les résultats de l'étude ultrastructurale des différents stades de
la Microsporidie sont exposés au chapitre II page 55.
~ Conclusions - ..es lésions histopathologiques obser-
vés attestent que No~ema m~~ae a un~ action sur la plupart des tissus d'
H. ~g~a. Il y a cependant des différences dans la manifestation de cet
effet selon les tissus.
- Le tube digestif est l'un des organes les plus touchés. Les cellules
épithéliales, bourrées de spores, se désagrégent. Cette destruction rend le
tube digestif non fonctionnel (HOUSTOUNSKY, ]970 ; KRAMER, 1966) et les lar-
ves, ne s'alimentant plus, meurent rapidement.

---

- 173 -
- Le tissu adipeux est également l'un des tissus les plus attaqués
par la Microsporidie. La lyse du tissu adipeux constatée appauvrit les
larves en substances de réserve (KHARAZI-PAKDEL, 1968).
Des phénomènes d'encapsulation ont été observés dans le tissu adipeux
d'Ho ~geha. Il s'agit d'une action phagocytaire des hémocytes qui
aboutit à la formation de "nodules" composés de cellules adipeuses infes-
tées entourées d'hémocytes. Ce phénomène a été aussi signalé chez Manduca
-6 exta paras itée par No-6 ema -6 prung-i..ciÂ..-6 (BROOKS, 1971) chez CadJut O-i..gu.Ue11a.
infestée par N. -i..nvadeYl-6 (KELLEN et LINDEGREN, 1973) et chez Melolontha
melolontha parasitée par N. melotonthae (KHARAZI-PAKDEL, 1968). Selon
BROOKS (1971), l'encapsulement des Microsporidies par des cellules est re-
lativement rare et son rôle dans la défense de l'organisme est probablement
réduit.
- En dehors du tube digestif et du tissu adipeux, la Microsporidie de
CfUto zacco~U6 se multiplie très fréquemment dans les muscles en provo-
quant la désorganisation et la lyse de ce tissu. La diminution du tonus
musculaire (caractérisée par l'incapacité des larves à se mouvoir) obser-
vée chez les individus infestés serait donc due à la destruction des mus-
cles par le parasite.
- Les trachées et les glandes salivaires sont également infestées ;
dans certains cas, ces organes sont fortement attaqués, ce qui certaine-
ment perturbent la respiration et la sécrétion salivaire chez les larves
atteintes.
- Les cellules périphériques de la masse cérébrale, l'hypoderme tégu-
mentaire et les gonades se révèlent également sensibles, mais à moindre
degré. -
L'évolution de la Microsporidie chez les larves d'Ho ~geha a
été également suivie. Les études histologiques réalisées montrent que
NO-6ema mani~ae peut pénétrer dans les larves d'Ho ~migeha par deux voies
la voie or~le et par injection.
Transmise par voie orale (voie naturelle) la Microsporidie s'implante
d'abord dans le tube digestif, puis infeste d'autres tissus au cours de
son développement. Plusieurs infestations expérimentales réalisées par
d'autres auteurs confirment nos observations :
- BROOKS (1971) en étudiant la réaction des larves de Manduca -6exta
(Lépidoptère) infestées par N. -6prung-i..ciÂ..-6, a constaté que le lieu de pre-
mière infection est l'épithélium intestinal.

---

- 174 -
PLANCHE 24
Histopathologie
et
microscopie électronique à transmission
(sui te)
Fig. 100
Cellule adipeuse infestée (X 5400). Le noyau
n'est
pas atteint.
Abréviations : C = cytoplasme ; N = noyau
Nu
nucléole
S
spores ; Spb = sporoblaste.

---

PLANCHE24

---

- 175 -
FUXA et BROOKS (1979a) ont noté que V~o~pha ne~x, transmise par
voie orale aux larves d'Ho zea, s'implante d'abord dans l'épithélium intes-
tinal, pu~s infeste ensuite les autres tissus et organes.
- Transmise par voie orale aux adultes de Phoromia ~eg~na, Octo~po~ea
mU6Qaedome~tiQae parasite, en premier lieu, l'épithélium de l'intestin moyen
(KRAMER, 1966).
- KELLEN et LINDEGREN (1973) ont tranmis N. ~vade~ aux larves de Ca~
eautetta; trois jours après l'infestation,
ils ont remarqué que la paroi
du tube digestif et les tubes de Malpighi sont les premiers à être parasités.
- Pieiotopho~ geo~up~na ingérée par des Coléoptères du genre Geo~p~
[G. v~~, G. ~t~eo~~U6 et G. ~t~eo~U6l
se développe d'abord dans
le tube digestif et gagne ensuite le tissu adipeux et les tubes de Malpighi
(LIPA, 1968).
- NORDIN et MADDOX (1974) ont infesté les larves de Hyph~a eunea avec
une suspension de spores de No~ema ~p. ; 48 heures après l'infestation, le
premier organe attaqué est le tube digestif. Après 684 heures, l'infection
s'est généralisée.
- Afin de préciser l'évolution de Theioh~ p~~qpho~ae dans les larves
de Malaeo~oma di6~~ et de M. am~eanum,
SMIRNOFF (1975) a réalisé des
infestations expérimentales et les coupes effectuées chez les larves infes-
tées ont révélé que l'infection à lieu d'abord dans le tube digestif; ce
n'est que secondairement que se produit l'invasion des autres organes et
tissus.
- TANABE et TAMASHIRO (1967) démontrent que N. ~ehopiU6~ae,
ingérée par
T~ehoplU6~a ~, commence son développement dans les cellules de l'épithé-
lium intestinal et n'attaque les organes que 72 heures après l'infestation.
Transmise par injection, No~ema m~~e a été retrouvée, 24 h.
après l'injection, dans l'hypoderme et le tissu adipeux.
L'attaque des au-
tres tissus a été notée au 3è jour de l'infestation. Certains auteurs ont
également observé la même évolution, notamment WEISER (1978) qui, après avoir
injecté des spores de V~o~pha plodiae, V. het~~po~um, No~ema no~dae
et Theloh~ (= V.l eph~~ae dans l'hémocoele des larves de Sè stade de
G. meltonelta, a observé les parasites,tout d'abord, dans les lymphocytes
et les oenocytes, puis quelques jours après dans le tissu adipeux.

---

- 176 -
Ces quelques exemples montrent que, transmises par voie orale
ou par injection, les Microsporidies pénètrent dans les tissus et se déve-
loppent. Comment se fait alors cette pénétration? Il est aujourd'hui éta-
bli que le sporoplasme est injecté dans la cellule-hôte par l'évagination
du filament polaire. Ce dernier est creux et après son Évagination, le spo-
roplasme passe par le filament et se loge dans la cellule-hôte (VAVRA, 1976 b).
Le déclenchement de cette
évagination suit des lois inconnues mais certai-
nement précises. Nous avons testé plusieurs produits (rouge neutre, acide
acétique, acide chlorydrique, solution physiologique à 6 0/00 de Nacl, eau
distillée, ammoniaque, potasse et solution aqueuse d'urée) et des moyens mé-
caniques (pressions) sur des spores fraiches, mais aucuns de ces produits
et moyens n'a été efficace. Signalons que ces produits, testés par d'autres
chercheurs sur des spores d'autres espèces de Microsporidies, ont permis
d'obtenir l'évagination du filament.
No~~ma m~~~, après s'être implantée dans l'épithélium intes-
tinal ou dans le tissu adipeux, migre vers d'autres tissus et organes de son
hôte, s'y fixe et se développe. Quelles sont les modalités de cette migra-
tion ? Dans la littérature plusieurs explications sont fournies :
- Certains auteurs pensent que le sporoplasme est doué de mouvements
amoeboides et peut pénétrer activement dans les cellules-hôtes. Aucunes ob-
servation n'a jusque là confirmé ce phénomène (VAVRA, 1976 a).
- ABE (1978), KHARAZI-PAKDEL (1968), LIPA (1968c), S~IFROFF (1975) et
WEISER (1978) avancent que, pour atteindre d'autres organes de l'hôte, les
Microsporidies utilisent le système sanguin. Le sporoplasme libéré dans l'hé-
molymphe peut soit pénétrer dans une cellule sanguine, soit être phagocYLé
par d'autres cellules spécialisées utilisant le système sanguin. Dans ces
éléments sanguins, le sporoplasme poursuit son développement et finalement
ces cellules sanguines Se désagrégent et la Microsporidie, libérée dans
l'hémolymphe, peut alors infester d'autres tissus ou organes.
- En ce qui concerne la migration des Microsporidies qui ne vivent que
dans le tube digestif, ABE et FUJIWARA (1979) ainsi que JACOBS et al. (1978)
pensent que, pour envahir les cellules épithéliales voisines, ces Microspo-
ri dies se multiplient d'abord dans une cellule-hôte, puis provoque la rup-
ture de celle-ci ; les spores ainsi libérées dans la lumière intestinale
germent et introduisent le sporoplasme dans la cellule voisine saine (auto-
infestation).

---

- 177 -
- Pour BERREBI (1978) si au moment de 1 1 évagination, la spore (de
Giugea athe~nae) se trouve dans la villosité de la muqueuse intestinale,
le filament polaire, parfois assez long, peut s'enfoncer dans l'épithélium
intestinal, le traverser et le sporoplasme pourra ainsi atteindre d'autres
tissus ou organes. Dans le cas de No~ema mani~e nous pensons que celle-ci,
pour se propager dans tout le corps des chenilles d'H~o~ ~g~,
utilise d'une part le système sanguin car des spores ont été observées dans
les hémocytes et d'autre part, le filament polaire. En effet, d'un site
primaire d'implantation, la Microsporidie peut utiliser son filament pour
atteindre d'autres organes ou d'autres cellules voisines. Nous avons d'ail-
leurs constaté, au niveau du tube digestif que plusieurs cellules voisines
ont été attaquées sans qu'une d'entre elles ne soit désagrégée. L'infes-
tation de la cellule saine se serait faite à partir d'une cellule voisine
infestée.
L'ensemble des caractères histologiques de l'action de
No~ema
mani~e sur les larves d'Ho ~g~ que nous venons d'exposer, permet de
considérer qu'il s'agit d'une action généralisée à évolution rapide, à ten-
dance létale et avec une forte production de spores.
v - Ë T U. D E BIO CHI Ml QUE
A N A LYS E EN ZY MAT l QUE
1°/ Introduction
Afin d'étudier l'action éventuelle de la Microsporidie sur l'ac-
tivité enzymatique du tube digestif et de l'hémolymphe des larves d'Ho aA-
mig~, nous avons recherché, à l'aide du système APIZYM (tableau
49
),
dix neuf activités enzymatiques dans ces deux tissus. Le système APIZYM est
une méthode semi-quantitative applicable à tous les milieux (tissus, cellu-
les, liquides biologiques, micro-organismes, etc ... ) ; il permet d'étudier
rapidement et simultanément 19 activités enzymatiques à partir de très fai-
bles quantités d'échantillons. Le système se présente sous la forme d'une
galerie de 20 microcuves dont le fond est constitué d'un support contenant
le substrat enzymatique avec son tampon. Ce support est destiné à favoriser
le contact entre l'enzyme et le substrat généralement insoluble. Deux réac-
tifs, appelés A et B, préparés par la firme API servent à colorer la pré-
paration. Ces réactifs ont la composition suivante :

---

- 178 -
RËACTION
N"0
ENZYME RECHERCHJ:E
SUBSTRAT
pH
Positive
1 Négative
Incolore ou couleur de
l'échantillon
si celui-cl
Témoin
a une coloration
importante.
2
Phosphatase alcaline
2-naphthyl phosphate
8.5
Violet
3
Estérase (C 4)
2-naphthyl butyrate
6.5
Violet
4
Estérase Li pase (C 8)
2-naphthyl caprylate
7,5
Violet
5
Lipase (C 14)
2-naphthyl myristate
Violet
6
Leucine arylamidase
L-leucyl-2-naphthylamide
Orange
7
Valine arylamidase
L-valyl-2-naphthylamide
Orange
8
Cystine arylamidase
L-cystyl-2-naphthylamide
Orange
9
Trypsine
N-benzoyl-DL-arginine-
8,5
Orange
2-naphthylamide
10
Chymotrypsine
N-glutaryl-phenylalanine-2-naphthylamide
7,5
Orange
11
Phosphatase acide
2-naphthyl phosphate
5,4
Violet
12
Phosphoamidase
Naphthol-AS-BI-phosphodiamide
Bleu
13
a galactosidase
6-Br-2-naphthyl-aD-galactopyranoside
Violet
14
~ galactosidase
2-naphthyl-~D-galactopyranoside
Violet
15
~ glucuronidase
Naphthol-AS-BI-~D-glucuronate
Bleu
16
a glucosidase
2-naphthyl-aD-glucopyranoside
Violet
17
~ glucosidase
6-Br-2-naphthyl-~D-glucopyranoside
Violet
18
N-acétyl-~ glucosaminidase
1-naphthyl-N-acétyl-~D-glucosaminide
Marron
19
a mannosidase
6-Br-2-naphthyl-aD-mannopyranoside
Violet
20
a fucosidase
2-naphthyl-aL-fucopyranoside
Violet
Tableau
49
Le systèr:l(~ /\\PI:::Y11

---

- 179 -
- réactif A
tris (hydroxyméthyl) Aminométhane
250 g
acide chlorhydrique 37 %
1 la ml
lauryl sulfate
100 g
eau distillée
qsq
1000 ml
pH
7,6-7,8
- réactif B
Fast Blue BB
3,5 g
2 methoxy éthanol
qsq
1000 ml
D'autres méthodes ont été utilisées par certains auteurs pour
montrer l'influence des Microsporidies sur les activités enzymatiques de
certains tissus chez les Insectes. C'est le cas de KUCERA et WEISER (1973
a, b) qui, utilisant la méthode décrite par BERGMYER et BERNT (1965 a,b),
ont montré que No~ema plodiae provoque 5 à la jours après l'infestation,
une augmentation de l'activité de l'analine aminotransférase, de la phos-
phatase alcaline
et des protéases dans le tube digestif et le tissu adipeux
des larves de B~~ b~~~eae. En 1975, ces mêmes auteurs, utilisant
l'électrophorèse, ont mis en évidence dans le tissu adipeux et le tube di-
gestif des larves de dernier stade saines de G~ekia m~on~ trois iso-
enzymes (lactate déhydrogenase-1 ou LDH1, lactate déhydrogénase 2-3 ou
LDH-2-3 et lactate déhydrogénase-4 ou LDH-4) et chez les larves saines de
dernier stade de B~ b~~~eae, deux isoenzymes (LDH-1 et LDH-2-3).
Dans le tissu adipeux de larves de ces deux espèces parasitées par N. plo-
diae, l'activité de LDH-2-3 augmente significativement 5 jours après infes-
tation. La LDH du tube digestif de ces larves n'est pas affectée par la Mi-
crosporidie. Pl~tophona ~chub~g~ transmise par voie orale aux larves de
B. b~~~cae n'influent pas sur les LDH du tube digestif et du tissu adipeux.
La méthode que nous employons a déjà été utilisée par BERREBI
(1978) qu~ a étudié l'action de Gtugea athekinae sur la digestion du Poisson
Téléostéen, Athekina boyeki, par LASGOUTTES (1976) qui a analysé l'influence
de la Microsporidie du genre Thetoh~ sur le spectre enzymatique de l'in-
testin moyen du Crabe, et enfin par VIVARES (1978) qui a étudié les varia-
tions enzymatiques de l'intestin moyen du crabe Paehygnap~~ m~o~~
parasités par la Grégarine Cephato~dophona eonno~.

---

- ISO -
2° / Résul tats
Les résultats de cette étude sont représentés dans les tableaux
50 et 51
et les figures
101 et 102.
- a) Dans le tube digestif (tableau 50
et figure
101
). nous avons noté
chez les larves saines et parasitées. une forte activité pour la phosphatase
alcaline. l'estérase (C ). l'estérase lipase (CS), la leucine arylamidase.
4
la valine arylamidase. la cystine arylamidase. la phosphatase acide. la phos-
phoamidase. l'~ glucosidase et la N-acétyl-p glucosamidase ; inversement il
a été noté une faible activité pour la
.~ -galactosidase. la 6-glucurani-
dase. la
#-glucosidase et l'~ -fucosidase. Nous n'avons. par contre. pu
trouver chez ces larves. ni lipase (C
). ni~ -galactosidase. ni ~-nannosi­
14
dase.
La présence de la Microsporidie parait n'affecter que 5 enzymes
la trypsine qu'elle fait disparaître. la chymotrypsine dont elle fait appa-
raître faiblement l'activité. la pgalactosidase. la (3glUCUr?'nidaSe et la
~ glucoridase dont elle augmente légèrement l'activité.
- b) Dans l'hémolymphe (tableau
51
figure
102
) des larves saines et
\\
parasitées. nous avons mis en évidence des enzymes à ,forte activité. Ce sont
la phosphatase acide. la, phospho-amidase. la ~ galactosidase. la ~ glucosi-
dase et la N-acétyl- Pglucosaminidase. A ces enzymes. il faut ajouter celles
à activité plus faible; ce sont la phosphatase alcaline. l'estérase (C ).
4
l'estérase lipase (CS), la valine arylamidase. la cystine arylamidase et
l'",
fucosidase.
Les différences les plus notables entre les larves saines et les larves pa-
rasitées affectent 7 enzymes : la leucine arylamidase qui semble en plus
faible quantité chez les larves saines. la phosphatase alcaline et la phos-
phatase acide qui sont en quantité plus importante chez les animaux sains
que chez les parasités. la lipase (C
) et l'~
glucosidase qui sont pré-
I4
sentes en très faible quantité chez les larves saines mais absentes chez
les larves parasitées et enfin. l' ~ mannosidase qui est par contre présente
en très faible quantité chez les individus parasités mais absente chez ceux
qui sont sains.

---

- 181 -
N°
Enzymes recherchées
Moyennes des 8 essais
Larves saines
larves parasitées
M
ci
M
0
1
Témoin
0
0
0
0
2
Phosphatase alcaline
4
0
4
0
3
Estérase (C )
4
)
5
Lipase (C
)
Lipides
0
0
0
0
14
] Métabolisme 4 0 4 0
4
Estérase (C
des
4
0
4
0
8
-
6
Leucine arylamidase
5
0
5
0
7
Valine arylamidase
5
0
5
0
Métabolisme
8
Cystine arylamidase
5
0
5
0
des
9
Trypsine
3
0,92
0
0
protéines
10
Chymotrypsine
0
0
1
0
-
11
Phosphatase acide
5
0
5
0
12
Phosphoamidase
5
0
5
0
-
13
Cl
galactosidase
0
0
0
0
14
S
galactosidase
2
0
3,5
0,53
15
S
glucuronidase
Métabolisme
0,37
0,51
2,71
1,60
16
Cl
glucosidase
des
5
0
5
0
17
S
glucosidase
glucides
1
0
2,87
1, 12
18
N-acétyl-S glucosa-
minidase
5
0
5
0
19
Cl
mannosidase
0
0
0
0
20
2
0
Cl
fucosidase
2
0
-
1
Tableau
50
Influence de No~ema ma~~ae sur les enzymes
de l'intestin des larves d'Ho ~g~a. M = moyenne;
0 = écart-
type.

---

.5
:!i·I·~lil!
:~mI~
!II~
1
~;:::::::::J
I·m::::~
J!jl:l:lj:
:~r~~~~
t~tr
l [~~!}~
1
[rJ
~4
::::::::::
~~~rt
::::::::::
l!!!::!!!
::::::::::
::::::::::
~J~t
ililililii
1:1\\:11111
::::::::::
~11~
11
tt~
IIi~
::::::::
l'.)
:mtm
tt:
'::::::::::
~~~I~~
~tf
"::::::::
.::::::::::
~~~~~~~~~~
:::::::::
iII
Il 1
t3~
:1~I:
1:IIi
~:~i1~:
;:::;::::
::::::::::
:::::::::
:::=:::::
1
::::::::::
2
~~t~~~
l!!i/Ilili
II:~
:::;:::::
::::=;:::
~1
1::11
~tit
~~~~ti~
I:i:1~:
::::::::::
~tt~~
jrI~
Ifr
t~:~:~:~:~:
----
!:I:/i.:!!
~~~it~:
fmm
~\\\\\\\\\\\\\\\\I
La
2
3
4
5
6
7
8
9
10 :
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Légendes
c===J larves saines
~
.
~
FIGURE
101: Spectre enzymatique du tube digestif des larves d'Ho ~mig~a
~
larves 1nfestees
•
saines et infestées par N. mani~e.
En abscisse, les numéros correspondant aux
enzymes étudiées (voir tableau 49)
En ordonnée, l'échelle de la lecture de 0 à 5.
;ft

---

- 1G3 -
N°
Enzymes recherchées
Moyennes des 9 essais
larves saines
larves parasitées
M
0
M
15
1
Témoin
a
a
a
a
2
Phosphatase alcaline
2,5
0,70
1
a
3
Estérase (C )
4
(cj Métabolisme 3,6
0,50
4
a
4
Estérase lipase
des
3
a
3
a
5
Lipase (C
)
spores
1
a
a
a
14
6
Leucine
-
arylamidase
2,3
0,50
5
a
7
Valine arylamidase
Métabolisme
1
a
1
a
8
Cystine arylamidase
des
1
a
1
a
9
Trypsine
protéines
a
a
a
a
la Chymotrypsine
a
a
a
a
-
11
Phosphatase acide
5
a
4
a
12
Phosphoamidase
5
a
4,5
0,52
-
13
a. galactosidase
a
a
a
a
14
S galactosidase
5
a
4,4
0,52
15
S glucunidase
4
a
4
a
16
a. glucosidase
Métabolisme
0,6
0,50
a
a
17
S glucosidase
des
a
a
a
a
18
N-acétyl-
-gluco-
glucides
saminidase
5
a
5
a
19
a. mannosidase
a
a
1
a
20
a. fucosidase
3,2
0,44
3,3
0,56
-
Tableau
51
: Influence de NMema. ma.rU.eJta.e. sur les activités
enzymatiques de l'hémolymphe des larves d'Ho ~geJta..
M = moyen;
0 = écart-type.

---

CQ
+:-
5
4
3
2
:~:\\·~i
[l
1
[Il)
~
o
18
-'
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
1'2
13
14
15
16
17
19
20
i
Légendes
o
larves saines
FIGURE 102 :Spectre enzymatique de 1'hémolymphe des larves d'Ho anmigena
saines et infestées par N. manienae.
• larves parasitées
En abscisse, les numéros correspondant aux enzymes étudiées
(voir tableau
49).
En ordonnée, l'échelle de la lecture de 0 à 5.

---

-
1a5 -
3°/ Conclusions
Bien que la méthode APIZYM ait essentiellement pour but de dé-
tecter des activités enzymatiques d'un extrait complexe non purifié, l'in-
tensité de la réaction colorée a Rermis cependant d'établir un spectre enzy-
matique du tube digestif et celui de l'hémo1ymphe des larves d'Ho anmigeka
saines et infestées.
Dans le tube digestif, nous avons mis en évidence, chez les animaux sains,
2 enzymes à activité 1ipasique (estérase (C ) et esté rase lipase (CS», 4
4
protéinases (leucine aminopeptidase, valine aminopeptidase, cystine amino-
peptidase et trypsine), 6 glucidases (~glucosidase, p glucosaminidase, ~
ga1actosidase,
~glucuronidase, ~glucosidase, 0( fucosidase), 2 phosphata-
ses (phosphatases alcaline et acide) qui hydrolysent les esters phosphori-
ques dont la liaison "atome de phosphore-radical organique" est riche en
énergie et enfin une phosphoamidase qui hydrolyse aussi les esters phospho-
riques.
Chez les larves parasitées, exception faite de la trypsine qui a une acti-
.
vité nulle, il semble y avoir une légère augmentation de l'activité des glu-
cidases et donc du métabolisme glucidique. L'activité des phosphatases, des
lipases et des protéinases restent par contre stable.
- KUCERA et WEISER (1973 a et b), en utilisant une autre méthode, ont
mis en évidence la phosphatase alcaline et des protéases dans le tube di-
gestif des larves de B~ b~~~eae.
Infestées par No~ema pto~ae,
l'activité de ces enzymes augmente sensiblement 10 jours après l'infesta-
tion.
Dans l'hémo1ymphe des larves saines, un certain nombre d'enzymes ont été
éga-
lement mises
en évidence. Il s'agit de 3 lipases (estérase (C ) , estérase
4
lipase (Ca) et lipase (C
) en très faible quantité), 3 protéinases en fai-
14
ble quantité (Leucine aminopeptidase, valine aminopeptidase et cystine ami-
nopeptidase), 4 glucidases ( ~ ga1actosidase, ~ glucuronidase, pglucosami-
nidase et ~fucosidase), 2 phosphatases (phosphatases alcaline et acide)
et d'une phosphoamidase.
Chez les larves parasitées, il a été noté une baisse des activités de la
phosphatase alcaline et de la phosphatase acide, une augmentation de l'ac-
tivité de la leucine aminopeptidase et une activité nulle de la lipase (C
).
14
Les activités enzymatiques du tube digestif et de l'hémo1ymphe des larves
d'Ho ~~geka que nous venons de mettre en évidence ne nous permettent pas
de tirer une conclusion définitive, car, si la technique employée permet
d'obtenir rapidement une vue d'ensemble du problème, elle n'en assure cepen-
dant pas une analyse fine. Il faut procéder à
des dosages biochimiques
quantitatifs pour mieux préciser les résultats que nous avons obtenus.

---

- 187 -
CHA PIT REl 1
Ë T UD E DiU N E MIe ROS P 0 R 1 DIO S EDO UBLE
CHE Z H. A R MIGE R A
N. MAN 1ER A E E T NOS E MA
SP.,
PARASITE
DE
SPOVOPTERA
LITTORALIS.
Pendant très longtemps, l'étude de la nature et des modes d'action
des microorganismes pathogènes a dominé le développement de la pathologie des
Invertébrés; les descriptions d'infections microbiennes chez les Insectes
ont été alors de plus en plus nombreuses. En revanche, peu d'auteurs ont mis
l'accent sur les syndromes pathologiques causés par les actions simultanées
de plusieurs parasites ou pathogènes. C'est surtout en virologie et en bacté-
riologie que cet aspect du problème a fait l'objet de plusieurs travaux:
- AMARGIER et coll. (1968 a) ont étudié l'action du virus de la granulose et
du virus de la polyédrose cytoplasmique chez le Lépidoptère A~gy~optoee leu-
eobteta. .
- La même année, AMARGIER et coll. (1968 b) ont analysé l'action de l'associa-
tion de la densonucléose et de la polyédrose nucléaire chez Ga.lle~a. meito-
nella..
- DIALLü (1978) a fait l'étude histopathologique d'un complexe d'infections
vi raIes à VeYLô ov-UtU6 et a Ba.eulov-UtU6· chezSpodo p:tetz.a. .eJ.;t;toJtCLU./.:,.
- üDIER (1974) a analysé l'association d'un virus de la densonucléose et d'un
virus de la polyédrose nucléaire chez Ga.ll~a. meitoneita..

---

- 188 -
- VAGO (1956 b) explique les mécanismes de plusieurs complexes de maladies,
notamment d'une virose et d'une septicémie bactérienne chez Lym~a ~paA.
La nature du virus participant à ce complexe n'est pas connue, mais la septi-
cémie bactérienne est due à Bacte~um paAaeoli.
En protozoologie, quelques associations de maladies où participe au moins une
Microsporidie ont été décrites chez un certain nombre d'Insectes
Association Microsporidiose-Coccidiose :
- KHARAZI-PAKDEL et AMARGIER (1973) ont étudié le développement si-
multané d'une Coccidie, Adelina melolonthae et d'une Microsporidie, No~ema
melolonthae chez Melolontha melolontha. La Coccidie se développe dans le tissu
adipeux périphérique, dans les cellules hypodermiques et péricardiales tandis
que la Microsporidie se développe dans le tissu adipeux situé autour du tube
digestif.
- PURRINI (1976 a) signale la coexiptence d'une Microsporidie, No~e­
ma wWeJ. avec une Coccidie, Adelina :tJrJ.. ooW, dans le tissu adipeux de T~­
bolium ea.ota.neum.
= Association Microsporidiose-Gregarinose
- LIPA (1968 b) signale une infection mixte causée par une Micros-
poridie, Pl~topho~ geo~p~a, se développant dans le tube digestif, les
tubes de Malpighi et le tissu adipeux, et une Grégarine intestinale, V~dy­
mophy~ paAadoxa.
- PURRINI (1976 a) note l'association d'une Microsporidie, No~ema
wWeJ. et d'une Grégarine, F~noey~-Ü6 :tJrJ..bolli chez T~bolium ea.otcmeum.
~ Association Microsporidiose - Bactériose
- KHARAZI-PAKDEL (1968) en étudiant l'action de No~ema melolonthae
sur les larves de Melolontha melolontha, a constaté qu'il intervient une mor-
talité due à diverses bactéries. Selon lui, la multiplication de ces Bact~
ries serait induite par la Microsporidie.
- Le même phénomène a été observé chez les larves de Spodopt~a
exempta infestées par No~ema neea:tJU.x (PILLEY, 1976 a), chez les larves de
plusieurs Lépidoptères parasitées par No~ema :tJrJ..ehop~~ae (TANABE et TAMA-
SHIRO, 1967) et chez les larves de Ch~y~omella g~~~a dont le tube digestif
héberge les spores de Pl~topho~a g~o~~a (HOSTOUNSKY et WEISER, 1978). Nous
l'avons nous-même souvent observé dans nos expériences d'infestation .
• Association Microsporidiose - Virose
- Des No~ema ~p ont été décrites à côté du Baeuiov~u,6 de la, granu-
lose chez S~amia e~et1na (VAGO, 1956 a), de la polyédrose nucléaire chez

---

- 189 -
Bombyx mo~ (ATGER et VAGO, 1960) et chez Agnn~ ~egetum (HUGER, 1960).
- AMARGIER et SMIRNOFF (1974) ont signalé un complexe de maladies
comprenant deux Microsporidies (une No~ema et une Pt~topho~) et un virus
de la polyédrose nucléaire chez les larves d'A~chip~ Q~~V04an~. Les
noyaux des cellules adipeuses et des cellules hypodermiques abritent les po-
lyédres tandis que les spores des Microsporidies se logent dans le cytoplas-
me de ces mêmes cellules.
- NORDIN (1974) a noté chez les larves de MalaQo~oma ame~Qanum,
deux Microsporidies (No~ema ~~ae et Pt~topho~ ~p.) à côté d'un virus
de la polyédrose nucléaire.
- NORDIN et MADDOX (1972) ont étudié chez les larves d'Hyph~a
Qunea, l'action de l'infestation simultanée d'une No~ema ~p., de Pt~topho~
~Qhube~g~ hyph~ae et d'un virus de la polyédrose nucléaire. Le virus seul
ou les Microsporidies seules sont efficaces.
- TANADA et CHANG (1962) ont établi que la mortalité observée chez
les larves de P~eudatetia ~punQta dans les îles Hawaii en 1961 est due, pour
une part (29,1 %), à l'action de l'infestation simultanée d'un virus de la
polyédrose nucléaire et de deux Microsporidies, l'une appartenant au genre
No~ema et l'autre au genre Pt~topho~.
- TANADA (1962) a constaté qu'après inoculation des deux Microspo-
ri dies de P~eudatet1a ~punQta aux larves de Cotla6 e~ythe~e, il s'est
produit chez ces dernières, l'activation d'un virus de la polyédrose cyto-
plasmique.
• Association Microsporidiose - Microsporidiose
Des complexes de maladies où ne participent que des Microsporidies
ont été observés par beaucoup de chercheurs. Ces observations concernent, très
souvent, des complexes composés de Microsporidies vivant naturellement chez
leurs' hôtes.
- No~ema neQ~x et Thetoh~a diazoma (= V~o~pha neQ~x)
infestent le tissu adipeux des larves de P~eudatet1a ~punQta (KRAMER, 1965).
- No~ema ~atov~~~anae et Thetohanla nepae cohabitent chez Nepa
cine~ea (LIPA,
1966).
- No~ema pY~U6tae et Thetoh~a o~~nlae vivent ensemble dans le
tissu adipeux des larves d'O~~nla nub~~ (LIPA, 1977 e).
- No~ema ~p. et Thetohania ~p. vivent chez Eph~t1a Rühnletta et
chez Sito~oga Qe~eatetta (PURRINI, 1975 d).

---

- 190 -
- STEINHAUS et HUGUES (1949) signalent que No~ema de6~ucto~
et
Pt~topho~ eaii6o~ea co-existent chez G~o~mo~ehema ope~eutetta.
- TANADA (1962) note chez Coli~ e~ytheme, deux Microsporidies,
l'une appartenant au genre No~ema et l'autre au genre Thelohania.
- Une double infection due à Thetohania ~p. et Pt~topho~a ~p.
a été décrite chez Cho~to~e~ 6umi6enana par WILSON (1975).
L'ensemble de ces données montrent que chez les Insectes, la pré-
sence simultanée de plusieurs Microsporidies semble être un processus très
répandu. Mais, il apparaît que les observations concercnent beaucoup plus la
détermination de ces Microsporidies que l'étude de leur action sur leurs hô-
tes. Aussi il était intéressant d'étudier la sensibilité des larves d'Ho ~­
~g~ aux Microsporidies isolées chez S. litto~ et chez Ch. zaeeoniU6.
Nous avons tout d'abord réalisé une infestation simple avec la Mi-
crosporidie de S. litto~ pour avoir une base de comparaison.
1 - ÀCTIONDE NOSEMA sr. DE S. LITTORALIS SUR LES LARVES DE DI FFÉRENTS STAŒS
ET LES ADULTES D' H. ARMT GERA.
Les suspensions de spores utilisées pour les infestations
sont
préparées à partir des larves infestées de S. litto~ provenant du Tchad.
Nous avons montré ci-dessus (page
96 ) que les larves d'Ho anmige~a sont
sensibles à cette Microsporidie. Nous allons déterminer ici le degré de sen-
sibilité des larves de 2è, 4è et dernier stade., vis à vis de cette Micros-
poridie.
1°/ Mortalité obtenue
Plusieurs lots de 25 à 50 larves venant de muer depuis environ 24
heures ont été inf~stés uniquement par voie orale avec des suspensions de
.
4
5
6
7
spores de concentrat10ns : 3,47.10
,3,47.10
,3,47.10
et 3,47.10
Les
expériences ont été faites dans les mêmes conditions de température, d'hygro-
métrie et de photopériode que précédemment.
a) ~~~~~~_~~r_l~_~~_~~~~~
Pour ces essais, nous avons utilisé 4 lots de 40 larves
chacun et 1 lot de 25 larves-témoins.

---

0 - - - - - - - - -
Doses
Nombre de
%
Nombre de
%
Nombre de
%
nombre
%
spores/ml
larves
mortalité
nymphes
nymphes
nymphes
mortalité
d'imagos
émergence
mortès
larvaire
obtenues
mortes
nymphale
obtenus
Ir--
- - - - - - - '
0
4/25
16
21/25
84
3/21
14,2
18
85,8
4
3,47.10
15/40
25,5
25/40
74,5
9/25
25,4
16
74,6
5
3,47.10
19/40
37,5
21/40
62,5
11/21
33,3
7
66,7
,
6
3,47.10
23/40
49,4
17/40
50,6
15/17
86,2
2
13,8
7
\\0
3,47.10
31/40
73 ,2
9
26,8
9/9
100
0
0
TABLEAU 52 : Action des différentes doses de spores de la Microsporidie de
s. tLtto~~ sur les larves de 2è stade d'Ho anmi9~.

---

- 192 -
M
%100
50
10
o
105
10&
107 DOSES
PIGURE \\03 : Courbe de mortalité des larves d'Ho ~mige~
infestées avec différentes doses de spores de No~ema ~p.
de s. titto~~.
Légendes :
•
• • larves de dernier stade
o 0 0 larves de 4è stade
* * * larves de 2è stade

---

- 193 -
4
. Le 1er lot est infesté avec une suspension de concentration 3,47.10
spores/ml.
5
Le 2è lot avec la dose de 3,47.10
spores/ml.
6
Le 3è lot, avec 3,47.10
spores/ml.
7
Le 4è lot, avec la dose de 3,47.10
spores/ml.
Les résultats obtenus et regroupés dans le tableau 52 et la figure
103, suscitent les remarques suivantes :
x la dose de spores joue un rôle important sur la mortalité totale ; en
effet, plus la quantité de spores ingérées est élevée, plus le taux de morta-
lité larvaire augmente.
x il y a une mortalité nymphale dont le taux dépend aussi de la quantité
7
de spores ingérées par la larve. Elle est de 100 % pour la dose de 3,47.10
spores/ml (tableau 52, figure 104).
x certaines nymphes effectuent la mue imaginale ; ces nymphes proviennent
4
5
6
des larves infestées avec les doses de 3,47.10
3,47.10
et 3,47.10
Les adultes obtenus meurent quatre jours seulement après leur émergence. Les
frottis de leur tissu adipeux présentaient des spores de la Microsporidie.
b) Essais sur les larves de 4è stades
-----~-----.-------------~-----.--
....-.. - ~ ..... -- ........-..
. Nous avons réalisé ces essais avec 230 larves de 4è sta-
des réparties en plusieurs lots :
. 1 lot de 50 larves nourries sur du milieu nutritif contaminé avec une
4
suspension de concentration 3,47.10
spores/ml.
5
lot de 50 larves contaminées avec la dose de 3,47.10
spores/ml.
6
lot de 50 larves parasitées avec la dose de 3,47.10
spores/ml.
7
lot de 50 larves infestées avec la dose de 3,47.10
spores/ml.
lot de 30 larves servant de témoins.
Les observations poursuivies jusqu'à la mortalité ou à la formation
des imagos ont abouti à la constitution du tableau 53 et de la fiture 103.
Ces résultats montrent :
x qu'il existe ici aussi un rapport direct entre le nombre de spores ingé-
rées et la mortalité totale observée ;
x que les L
présentent une plus grande résistance que les L . En effet,
4
2
pour une même dose, on enregistre une mortalité nettement plus faible chez
les L
que chez les L .
4
2
x qu'il existe également un rapport direct entre la mortalité nymphale et
la dose des spores ingérées par les larves dont sont issues les nymphes. Ainsi
4
13,6 % des nymphes issues des larves infestées avec la dose égale à 3,47.10
spores/ml meurent alors que c'est 88,7 % des nymphes provenant des larves
7
traitées avec la dose de 3,47. \\0
spores/ml qui succombent à l'action de la

---

,
------;---:ombre - J e
--,--- Z
Doses
'Nombre:I .. Z-- J' Nombre de' %
li
ï:0mbre
7-
spores/ml
larves
morta~ité
nymphes
nymphes
nyrüphes
mortalitf
d'imagos
émergence
mortes
larvaire
obtenues
mortes
nymphale
obtenus
- - - - - - - J
- - -
--
--
--"" --
o
4/30
13,3
26/30
86,7
3/26
Il ,5
23
88,S
-- --- --4
1-
1
- - \\ - I--------l----
3,47. 10
1
- - - - 1 1
1-- -----1--1- - - -
9/50
15.4
41/50
84,6
5/41
0,.7
36
99,3
--~~~10ç-T-16/5~
i
1
21,5
34/50
78,S
8/34
13,5
JI---u -1--s6-;5--
l
.
6
f
3,47.10
1
21/50
. 33,1
29/50
66~;-----;-;{2~--1-~~"--.J1----~;--r;-~2---
-~:47.1-~7--r
46'~--1-;;;;----;;-:~---1-;'-123
27/50
--,----;3:;;--- -9--1,5;7--
'-0
- - - -
~
-~----"
TABLEAU53
: Action des différentes doses de spores de la Microsporidie de
s. ~o~a~ sur les larves de 4è stade d'Ho ~n~gena.

---

-
195 -
M
%100
Ft~URE \\04 : Courbe de mortalité des nymphes dl H. ~~ge~
infestées avec différentes doses de spores de No~ema ~p. de
S. li.:tto/t0..i.Â.-6.
Légendes :voir figure \\03.

---

-
196 -
Mîcrosporidie (tableau 53, figure 104).
* que le pourcentage de la mue imaginale est ici plus élevée que dans
les essais sur les larves de 2è stade.
c) §~~~i~_~~!_!~_~~~i~!_~~~~~_la!~~ir~
Nous avons travaillé, dans ce cas, avec 180 larves réparties de
la façon suivante :
* 1 lot de 40 larves nourries sur du milieu badigeonné d'une suspension
4
de spores de concentration 3,47.10
spores/ml
5
x
lot de 40 larves infestées avec la dose de 3,47.10
spores/ml
6
40
traitées
la dose
* lot de
larves
avec
de 3,47.10
7
40
traitées
de
• lot de
larves
avec la dose
3,47.10
x
lot de 20 larves-témoins.
D'après le tableau 54 et la figure 103, i l existe là aussi un rap-
port direct entre la densité de spores ingérées et la mortalité larvaire en-
registrée. La mortalité est peu importante par rapport aux essais précédents
ceci s'explique, non seulement par la grande résistance qui opposent les lar-
ves -âgées à la maladie, mais aussi par le fait que, infestées à un stade pro-
che de la nymphose, la maladie ne s'est pas développée suffisamment pour pro-
voquer un effet immédiat au stade larvaire. Elle exercera cet effet au stade
nymphal car nous avons observé également une mortalité nymphale dont le taux
est aussi en rapport avec la dose des spores avalées par les larves dont sont
issues les nymphes (tableau 54, figure 104). Les nymphes qui n'ont pas succom-
bé à ce stade ont donné des imagos porteurs de spores de la Microsporidie.
Il ressort des résultats que nous venons d'exposer, qu'une forte
proportion des larves d'Ho ~geka infestées par la Microsporidie de S. ~­
to~ bouclent leur cycle de développement. Les imagos ainsi obtenus nous
ont permis d'étudier l'action de cette Microsporidie sur la reproduction d'
H. ~geka.
~ Action de No~ema ~p. de S. l1tto~~ sur la reproduction d'Ho
aJr.JrU.g eka
Pour cette expérience, nous avons utilisé des imagos
sains et des imagos infestés issus des larves de 4è et de dernier stade.

---

-----r---- ----~--_.
Doses
Nombre de
7-
Nombre de
7-
,',,' l>t' ~'e
7-
spores/ml
larves
mortalité
nymphes
mortalité
d'ir'agos
érnergf'DCe
mortes
larvaire
obtenues
nymphale
obtEnus
--
---'
0
1/20
5
19/20
95
2/19
10.5
17
89.5
1
~---1
1
1
1
~
- - 1 - - - - -
-4
3.47.10
1
3/40
1
2.6
37/40
97.4
6/37
1
6.3
1
31
1
93.7
5
1
7 • 8
35/40
92.2
9/ 3 - - ; - - - r -~-.-9--- -l--~
3.47.10
1
-;6 - - - --1----;; .-~---
5/40
t--
0'
TABLEAU 54
: Actjon des différentes doses de spores de la Nicrosporidie de
s. W;tO!taJ!.Aj, sur les larves de de dernier f;t;l(~e fl'II. a.'Unige./Ul

---

-
198 -
5
infestées soit avec la suspension de spores de concentration 3,47.10
spores/
ml, soit avec de l'eau physiologique.
Plusieurs groupes ont été formés comme l'indique le tableau ci-dessous.
GROUPES
N° de groupes
5 cf' ~ains + 5 0 saines
1
+
5 Ô sains + 5 ~ infestées (a)
2
5 Ô' infestés (a) + 5 0 saines
3
+
5 Ô infestés (a) + 5 0 infestées (a)
4
+
5 Ô sains + 5 0 infestées (b)
5
+
5 cS infestés (b) + 5 0 saines
6
+
5 8 infestés (b) + 5 0 infestées (b)
7
+
5 O' infestés (a) + 5 0 infestées (b)
8
+
1
5 a infestés (b) + 5 0 infestées (a)
9
+
(a) = adultes infestés au 4è stade larvaire
(b) = adultes infestés au dernier stade larvaire.
Ces imagos ont été réunis' en pondoirs dès leur émergence et gardés
pendant toute la durée de leur survie. Les oeufs sont comptés tous les jours
et la gaze sur laquelle sont pondus ces oeufs est placée à la partie supé-
rieure d'une boîte-éclosoir. L'incubation des oeufs se fait dans cette boîte
et les éclosions sont alors suivies. Le milieu nutritif artificiel, en pré-
vision des éclosions, est déposé sous forme de cubes dans le fond de la boî-
te. Tout contact entre les sexes avant les expériences a été évité car les
chenilles et les chrysalides qui ont fait l'objet de cet étude ont été élevées
individuellement jusqu'à la sortie des imagos. Pour savoir s'il y a accouple-
ment ou non, nous avons disséqué l'appareil génital des femelles mortes pour
vérifier la présence ou l'absence de spermatophores dans la bourse copulatrice.

---

- 199 -
Tous les résultats ont été analysés statistiquement.
- Influence de la Microsporidie sur~ fécondité
Les ~sultats obtenus sont consignés dans le tableau 55 et la figure
105.
N° des
Nbre
nbre de
total d'oeufs
Nbre d'oeufs
groupes
d'essais
femelles
pondus
pondus par
femelles.
1
16
70
89924
1 124,05
2
Il
55
28731
522,38
3
13
65
75067
1 154,87
4
9
45
22856
507,9
5
14
70
37184
531,2
6
10
50
52154
1 043,1
7
12
60
31110
518,5
8
8
40
20476
511 ,9
9
8
40
18427
460,6
TABLEAU 55
Influence de la Microsporidie sur la fécondité d' H.
CVlm-i.g e/ta. •
En comparant les moyennes des oeufs pondus par les femelles de cha-
que groupe, nous constatons que :
- la fécondité chez les femelles saines (groupes1, 3 et 6) est forte; la
différence entre les moyennes des oeufs pondus par ces femelles et les moyen-
nes des oeufs pondus par les femelles infestées au 4è stade larvaire (grou-
pes 2,4 et 9) et au dernier stade larvaire (groupes 5, 7 et 8) est signifi-
cative.
- il n'y a pas de différence significative entre la fécondité des femelles
parasitées au 4è stade larvaire et celle des femelles infestées au dernier
stade larvaire.
La baisse de la fécondité observée chez les femelles parasitées est
probablement due à l'action de la Microsporidie sur la longévité des femelles.
En effet, comme l'indique le tableau 56, la mortalité imaginale, due à la
Microsporidie, observée chez les imagos infestés par exemple, au 4è stade
larvaire, devient totale 4 à 6 jours seulement après leur émergence c'est-à-
dire en pleine période d'oviposition ; or cette période d'oviposition dure,
dans notre cas, en moyenne 5 jours chez les femelles saines.

---

- 200 -
M.Q.F (x1QQ)
14
13
12
11
]]jj
10
1
9
8
7
:::::::;:;:
6
5
4
1r::::::::::i ~I!ilt:
3
i
111!il!!!
:::::::::
2
1
1!1!·!!1.
1
11!11!!i.:
:;:;:::;:;
0
i
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Groupes
FIGURE 105:
Influence de No~ema ~p. de S. titto~
sur la fécondité d'Ho ~mig~.
Abréviations: M.O.F. = moyenne d'oeufs déposés par cha-
que femelle.

---

- 201 -
Imagos
Période de pré-
Durée ovi-
Période post-
Longévité
oviposition
position
oviposition
(en jours)
(en jours)
(en jours)
(en jours)
femelles saines
2,7 + 0,4
5,4 + 1,8
3,4 + 1,7
11,5:3,9
-
-
-
mâles sains
-
-
-
12,2:2,4
femelles infestées (a)
2,8 + 0,2
2,6 + 1,2
-
5,4:1,4
-
-
mâles infestés (a)
-
5,7:1,1
-
-
femelles infestées (b)
2,6 + 0,6
3,9 + 1,4
-
6,5:2
-
-
mâles infestés (b)
-
-
-
6,8: 1,3
(a) = adultes infestés au 4è stade larvaire
(b) = adultes infestés au dernier stade larvaire
TABLEAU 56 : Longévité moyenne (en jours) des mâles et femelles d'Ho aAmig~a
infestés ou sains.
Dans la littérature, beaucoup d'expérimentateurs ont signalé une bais-
se de la fécondité due aux Microsporidies chez de nombreuses espèces d'Insec-
tes, notamment chez Hetiot~ zea due à No~ema hetiothi~ (GAUGHER et BROOKS,
1975), chez PtfltaU6ta nub~ due à pvr..eûa (= No~emal ptjJtaU6ta (KRAMER, 1959),
chez TJU.c.hopiU6ia rU due à N. Wc.hopiU6..üle. (TANABE et TAMASHIRO, 1967), chez
Bombyx moJU. et HyphantlUa c.unea
due à N. bomby~ (VEBER et JASIC, 1961),
chez O~Wn..ül nub~ due à No~ema py~aU6ta (WINDELS et al., 1976) et chez
Chito ~ac.c.~phagU6 due à des No~ematidae (FOURNIER et ETIENNE, communication
personnelle). La plupart de ces auteurs ont attribué la cause de cette baisse
de la fécondité à la présence des Microsporidies concernées dans le tractus gé-
nital de leurs hôtes femelles; or dans notre cas, nous n'avons jamais observé
les spores de la Microsporidie dans l'appareil génital des mâles et des femel-
les d'Ho ~g~a qui nous ont servi d'essais. Pour expliquer les mécanismes
d'action des No~e.m~dae sur la fécondité des femelles de Ch. ~ac.c.h~phagU6
FOURNIER et ETIENNE (communication personnelle) avancent les hypothèses sui-
vantes :
- la vigueur des adultes peut être diminuée ce qui peut perturber la ponte
des femelles et leur longévité.
- l'accumulation des réserves par les larves peut être diminuée si les No-
~em~dae consomment ces réserves et si elles affaiblissent l'aptitude à con-
sommer de leur hôte. Cette faible accumulation de réserves peut expliquer la

---

- 204 -
Il apparaît donc que l'infestation des mâles et femelles d'Ho arom~g~a af-
fecte l'accouplement de ceux-ci. On peut émettre deux hypothèses pour expli-
quer le mécanisme de l'action de cette Microsporidie :
1°/ Le faible taux d'accouplement observé chez les individus infestés
peut être dû à leur longévité qui est sérieusement réduite par la Microspo-
ridie (tableau 56). En effet, les mâles et femelles infestés ne vivent qu'en
moyenne 6 jours alors que pour qu'il y ait accouplement, il faut que les
adultes soient en contact pendant au moins 4 jours car l'accouplement, en éle-
vage, ne commence que 2 à 3 jours après la sortie des imagos ; plus longtemps
les imagos sont en contact, plus le taux d'accouplement est élevé (MICHEL,
1979).
2°/ La Microsporidie peut diminuer la vigueur des adultes ce qui peut
perturber leur faculté à s'accoupler. GAUGHER et BROOKS (1975), puis FOURNIER
et ETIENNE (communication personnelle) pensent que la baisse du taux d'accou-
plement observée respectivement chez H~ot~ zea et Chilo ~acc~phagU6
est due à l'affaiblissement de ceux-ci par leur Microsporidie.
Dans tous les cas, obtenir un taux d'accouplement élevé en élevage chez les
H. anmig~ est difficile car, il dépend de plusieurs facteurs : la présence
ou l'absence de c~tonnier, le volume des pondoirs, la nature de la nourriture
offerte aux. adultes (BRADER-BREUKEL, 1970) l'âge des individus mâles et fe-
melles par pondoirs, la durée de mise en présence des mâles et des femelles
(MICHEL, 1979).
- Action de ~ Microsporidie ~r~ fertilité
Au cours de notre expérience, la fertilité des pontes (nombre d'oeufs
éclos/nombre total d'oeufs pondus) a été noté dans chaque groupe (tableau 58,
figure 107).
Groupes
Nombre de femelles
Nombre d'oeufs
nombre d'oeufs
fertilité
( 1)
pondus
éclos
des pontes
1
1
80
89924
52138
57,9
2
55
28731
10236
35,6
3
65
75067
12149
16,1
4
45
22856
1986
8,6
5
70
37184
8782
23,4
6
50
52154
10066
19,3
7
60
31110
6471
20,1
8
40
20476
1864
9,1
9
40
18427
1531
8,3
(1) voir tableau
par,e 198.
TABLEAU 58 : Influence de l'infestation sur la fertilité d'Ho ammige~a.

---

- 205 -
F.O
%100
50
10
Mi
:~.:::~:::~.'~.:' }fi!:
i i
......
:I.::·......
:
.....
:i:·...
:I.:.:·
......
:!
I:!.':::.:::'•.:::'.::'..:::::.:::::::..:'::.:::•..::':,.:1
;.....
t;tli.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Groupe
FIGURE 107
Influence de la No~ema ~p. sur la fertilité
des pontes d'Ho anmigeka.
Abréviation: F.O. = fertilité des oeufs.

---

- 206 -
En comparant 9 pourcentages de fertilité nous constatons que :
- le pourcentage des oeufs éclos observés dans les couples témoins (grou-
pe 1) est significativement supérieur aux pourcentages des autres groupes ;
- la fertilité de ponte dans le groupe composé de mâl~et femelles infes-
tées au 4è stade larvaire (groupe 4) est significaiivement inférieure à celle
du groupe comprenant des mâles sains et des mâles femelles infestées au der-
nier stade larvaire (groupe 7).
- la fertilité observée dans le groupe 2 (mâles sains et femelles infes-
tées au 4è stade) est significativement supérieure à celle du groupe compre-
nant des mâles sains et des femelles infestées au dernier stade larvaire
(groupe 5).
- le nombre d'oeufs éclos dans le groupe 3 composé de mâles infestés au
4è stade larvaire et de femelles saines est significativement inférieur à la
fertilité observée dans le groupe 6 (mâles infestés au dernier stade larvaire
et femelles saines).
- les fertilités de pontes des groupes 8 et 9 ne sont pas significativement
différentes.
Il s'avère donc que l'infestation des deux sexes affecte la fertili-
té ; mais il semble qu'il n'y ait pas de relation directe entre la densité
d'infestation des adultes et la fertilité des oeufs déposés; nous avons en
1
effet remarqué, par exemple, que dans le groupe 2 qui est composé de femelles
infestées au 4è.stade larvaire, la fertilité est significativement supérieure
à celle observée dans le groupe 5 composé de femelles traitées au dernier sta-
de larvaire, c'est-à-dire à un stade beaucoup plus proche de la nymphose. Nous
pensons que la baisse de la fertilité observée dans nos essais est due au fai-
ble taux d'accouplement noté chez les adultes parasités (voir tableau 57).
Pour FOURNIER et ETIENNE (communication personnelle), c'est la présence de la
No~ematidae dans l'oeuf qui, en provoquant la mort de l'embryon, diminue la
fertilité des oeufs déposés par les femelles de Chito ~aQQhaniphag~ parasi-
tées. Dans notre cas, aucune spore de Microsporidie n'a été observée dans les
oeufs. Pour TANABE et TAMASHIRO (1967), la baisse de la fertilité chez T~Qho­
plU6~a ~ parasitée par No~ema ~Qhopl~~e est due à l'infection des testi-
cules et des voies génitales des adultes mâles ; cette infection réduirait
la production des spermatozoïdes viables et empêcherait le passage de ceux-ci
chez les femelles. Or dans nos essais, il n'a jamais été observé de spores
dans l'appareil génital des adultes mâles ou femelles.

---

- 207 -
c) Ç~~~l~~~~~~
Le développement des Insectes dépend de leur fécondité ; or dans la
nature, cette fécondité peut dépendre de plusieurs facteurs : la qualité de
la nourriture des larves, la température, la durée de la diapause des nYmphes
et des larves (JASIC et BIROVA, 1958), de l'humidité et de la nourriture des
adultes (VEBER et JASIC, 1961). A ces facteurs écologiques, il faut désormais
ajouter les maladies. En effet, au cours de nos essais, nous avons constaté
qu'une Microsporidiose peut perturber la reproduction en diminuant la faculté
des Insectes à s'accoupler, leur longivité, la ponte des femelles et la fer-
tilité des oeufs. Plusieurs hypothèses ont été avancées pour expliquer les
mécanismes d'action des Microsporidies
- selon FOURNIER et ETIENNE (communication personnelle) les Microsporidies
peuvent affaiblir leurs hôtes, ce qui peut perturber leur faculté à s'accou-
pler.
leur longévité et la ponte. La baisse de la fertilité des oeufs est
due à la présence du parasite dans l'oeuf.
- pour TANABE et TAMISHIRO (1967), la Microsporidie, en attaquant les
testicules et les voies génitales mâles, diminue la production de spermato-
zoïdes viables et empêchent ceux-ci de passer chez les femelles d'où baisse
de la fertilité.
- selon VEBER et JASIC (1961), la Microsporidie, en consommant les réser-
ves des larves, diminue l'accumulation de ces réserves, ce qui a pour effet
d'abaisser la fécondité des femelles.
Quelsque soient leurs mécanismes d'action, les Microsporidies, en abaissant
le potentiel de reproduction de leurs hôtes, limitent la pullulation de ceux-
ci.
~ Histopathologie
Des larves et adultes infestés ont été fixés au Bouin alcoolique ou
au Carnoy afin d'étudier la répartition du parasite dans les tissus de l'hô-
te.
Chez les larves, cette étude nous a montré que le parasite envahit
uniquement le tube digestif; l'accumulation des spores dans les cellules de
l'épithélium intestinal provoque la rupture de cet épithélium (planche 25,
figure 108).
Chez les mâles adultes et femelles adultes, les spores ne s'observent
également que dans le tube digestif.
Signalons enfin que les spores recueillies chez les larves et adultes
d'Ho ~g~a mesurent en moyenne 4,63 (ô= 10,21) de long sur 2,43 ( ô = 0,18)

---

- 208 -
PLA N CHE
25
Histopathologie
Figure 108
Infestation
de l'épithélium intestinal des larves d'Ho
aromi9~ par No~ema ~p. de S. titto~ (G. X 222) .
Figure 109
Tissu adipeux d'Ho aromi9~ parasité après infestation
des larves par une suspension de spores de N. mani~ae
associée à No~ema ~p. de S. ~o~ (G X 222).
Figure 110
Epithélium intestinal des larves d'Ho akmi9~ infestée
par l'association N. mani~e-No~ema ~p. de S. ~o~.
(G X 222).
Abréviations
E. i.
Epithélium intestinal
s
spores.

---

PLANCHE 25

---

- 209 -
II - ACTION DE N. mafÛ.Vtae. ET DE No~ e.ma. ~p. DE S. UtioJr..a.LiA TRANSMISE S
SIMULTANÉMENT CHEZ LES LARVES D'H. ~ge.~.
Après avoir étudié séparément l'évolution des deux Microsporidies
chez H. ~gVta, nous avons procédé à une double infestation associant ex-
périmentalement l'action des deux Microsporidies. Seul le mode de contamina-
tion par ingestion a été utilisé car c'est la voie qui correspond à celle
provoquant des infestations spontanées dans la nature ou en élevage.
l:! Mortalité totale obtenue
Pour cette expérience, nous avons utilisé 2 ml de suspension de
5
spores de Microsporidies de Ch. zacconiU6 de concentration 2,21.10
spores/
ml additionnée d'un égal volume de suspension de spores de Microsporidie de
S. litto~
5
de concentration 3,47.10
spores/ml. Le mélange ainsi obtenu,
5
de concentration 2,84.10
spores/ml, nous a servi à infester plusieurs lots
de larves de 2è, 4è et de dernier stade larvaire élevés individuellement sur
mifieu nutritif contaminé. La mortalité quotidienne enregistrée chez les lar-
ves infestées est consignée dans les tableaux 59, 60 et 61 et la figure 114.
Sur les larves de 2è stade, la mortalité débute au 7è jour et
devient totale au 14è jour.
Sur les larves de 4è stade, celle-ci commence au 6è jour et de-
vient totale au 12è jour.
Sur les larve~ de dernier stade, la mortalité n'est pas uniquement
larvaire, car en effet 48,5 % des larves infestées ont échappé à l'action
du "complexe" pour effectuer leur mue nymphale; aucune de ces nymphes n'a,
par contre, effectué la mue imaginale.
2°/ Histopathologie
Les lésions provoquées par cette infestation double ont été obser-
vées après coloration par l'Azan de Heindenhain des coupes pratiquées sur
les larves malades. Beaucoup de tissus ont été touchés
- le tissu adipeux, à un stade avancé de l'infestation (7è jour), renferme
d'innombrales spores. Parfois il est transformé en amas de spores (Pl. 25,
figure 109).

---

- 210 -
Nombre de
cumul des larves
.1
%
jour après
mortes
mortalité larvaire
infestation
T
l
T
l
7
3/40
7,5
8
2/30
9/40
22,5
9
2/30
16/40
6,6
35,7
10
3/30
28/40
10
66,6
11
6/30
33/40
20
78,1
12
38/40
93/7
13
39/40
96,8
14
40/40
1
100
1
TABLEAU 59:
Action de N. maniekae et No~ema ~p. sur les la~­
ves de 2è stade d'Ho ~gena.
l = larves infestées ; T = témoins.
--
Nombre de
cumul des larves
%
jour après
mortes
mortalité larvaire
infestation
T
l
T
l
4
1/25
4
5
1/25
2/45
4
0,4
6
3/25
6/45
12
1,5
7
6/25
13/45
24
6,4
8
21/45
29,8
9
28/45
50,2
10
36/45
73,6
11
44/45
97,0
12
45/45
100
TABLEAU 60 : Action des N. maniekae et No~ema ~p. sur les lar-
ves de 4è stade d'Ho ~geka.
l = larves infestées; T = témoins.

---

- 211 -
50
1
o 1
3
5
7
9
11
13
J.A.!
FIGURE 114 : Mortalité des larves d'Ho anmi9~a
infestées au 2è, 4è et dernier stade avec des spores
deN. ma.n.-{.~ae. et No-6 ema -6 p .
Légendes :
0 0 0 larves de dernier stade
o 0 0 larves de 4è stade
• • • larves de 2è stade

---

r -
Nombre de
Cumul des larves
%
Cumul des nymphes
%
jours
mortes
Mortalité larvaire
apparues
nymphose
après in-
festation
T
l
T
l
T
l
T
l
._----_... _-- -
3
2
8
4
1/25
4
11
2
44
5
5
2/25
4/35
8
3,7
18
6
72
17,1
6
7/35
13,0
21
11
84
31,0
7
13/35
31 ,6
23
17
92
48,5
8
18/35
47,2
TABLEAU 61
: Action de N. manie~ae et No~ema ~p. sur les larves de dernier stade d'Ho anmLgena.
N
---
1 = larves infestées; T = larves témoins.
-N
~ -
Nombre de
Cumul des larves
%
Cumul des nymphes
%
jours
mortes
mortalité larvaire
apparues
nymphose
après
infestatior
T
l
T
l
T
l
T
l
~_._--
-
------
6
3/35
8,5
3
10
7
7/35
20
5
2
16,6
5,7
8
1/30
13/35
3,3
34,9
16
4
53,3
11 ,4
9
3/30
15/35
10
36,5
21
70
10
4/30
23/35
13,3
60,4
23
76,6
11
6/30
31/35
20
85,7
12
7/30
23,3
TABLEAU 62
Action de N. manie~e et No~ema ~p. recueillie chez H. anmLgena sur les larves
de 3è stade d'Ho anmLge~.

---

- 213 -
M
%100
50
10
o
2
4
6
8
10
12
J.A.I
FIGURE 115 : Mortalité des larves d'Ho anmigeka infestées
au 3è stade avec des spores de N. maniekae et deNo~ema ~p.
de S. ~onal~ recueillies chez H. ~migeka.
Légendes :
000 Témoins
• • • larves infestées

---

- 214 -
PLA N CHE
26
Histopathologie (suite)
Figure III
Muscle abdominal des larves d'Ho ~ge~ infesté par
l'association N. m~e~e - No~ema ~p. de S. iitto~.
(G.X 356).
Figure 112
Tissu adipeux et hypoderme parasités après infestation des
larves par N. man~e~e et No~ema ~p. (G.X ISO).
Figure 113
Glande salivaire parasité après infestation des larves par
l'association N. m~~e - No~~ma ~p. (G.X 222)
Abréviations
e = cuticule ; le = Intima chitineuse ; M = muscle
N = noyau ; S = spores ; TA = tissu adipeux.

---

PLANCHE 26

---

- 215 -
- le tube digestif est l'un des organes le plus touché. Très souvent, l'épi-
thélium intestinal est complètement désorganisé ·par l'accumulation des spo-
res dans le cytoplasme des cellules épithéliales (Planche 25, figure 110).
- nous avons également noté, dans les tubes de Malpighi, une invasion des
cellules épithéliales de cet organe.
- les muscles n'échappent pas à l'attaque des deux Microsporidies. La lyse
de ce tissu débute, le plus souvent, dans la partie centrale (Planche 26
figure 111).
- des coupes effectuées au niveau de la tête, ont révélé la présence des
spores dans le cerveau et dans les muscles céphaliques.
- enfin, il est à souligner que des lésions ont été également observées
dans l'hypoderme, les glandes salivaires et dans les gonades mâles et fe-
melles mais, ces lésions ne sont pas importantes (planche 26, figures 112
et 113).
3°/ Recherche sur la conservation du pouvoir pathogène de l'as-
sociation des deux Microsporidies
Les résultats des recherches histopathologiques que nous venons
d'exposer ci-dessus montrent que, lors de l'infestation simultanée, il y a
eu développement des deux Microsporidies aboutissant à la formation de nou-
velles spores ; nous pensons que la mort des animaux atteints pourrait
constituer une nouvelle source d'infestation double. Pour étudier cette
possibilité, nous avons utilisé une suspension de spores préparées à par-
tir de broyat de cadavres de larves doublement infestées pour contaminer
un lot de 35 larves saines de 3è stade. La concentration de cette solution
6
est de 1,17.10
spores/ml. Nous nous sommes limités aux infestations expé-
rimentales par voie orale. La mortalité et les signes histopathologiques
ont été notés, chez les larves de 3è stade nourries pendant 3 jours avec
du milieu contaminé, la mortalité débute au 6è jour et atteint le taux de
85,7 % au 11è jour (tableau 62, figure 115). Il,4 % des larves ont pu ef-
fectuer leur mue nymphale, mais aucune
de ces nymphes n'a donné d'imagos.
Les signes histopathologiques notés sont semblables à ceux observés au
cours de l'étude de la double action des deux Microsporidies sur les lar-
ves d'Ho ~g~. Ce sont les mêmes organes (tube digestif, tissu adipeux,
hypoderme, cerveau, muscles, gonades, tubes de Malpighi) qui ont été lésés
par ces germes. Cette expérience montre que les deux germes utilisés simul-
tanément ont conservé leur pouvoir pathogène et peuvent donc constituer

---

216 -
une source nouvelle d'infestation double.
4°/ Conclusion et discussion
Les infestations expérimentales simultanées que nous avons réa-
lisées avec la Microsporidie de Ch. zacco~U6 et celle de Spodopteka tit-
to~, nous ont permis de montrer que ces deux Microsporidies peuvent
constituer une nouvelle source d'infestation double dans la nature. En ef-
fet, l'ingestion simultanée des deux Microsporidies par les larves de 2é,
4è et dernier stades d'Ho anrnigeka provoque chez celles-ci une mortalité
totale ; cette mortalité se situe approximativement dans les délais habi-
tuels de l'action léthale de la maladie due à la Microsporidie de Ch. zac-
CO~U6. L'étude histologique des lésions dues aux deux Microsporidies ont
par ailleurs permis de préciser que ces deux parasites attaquent plusieurs
tissus des larves d'Ho anrnige~. Malgré plusieurs observations, il nous a
été très difficile de reconnaître dans les tissus l'action de chacune des
deux Microsporidies car, il est difficile de distinguer les deux Microspo-
ridies dans les tissus de l'hôte. Il est impossible de savoir si les deux
Microsporidies infestent une même cellule, ou bien si les cellules attein-
tes d'une Microsporidie peuvent voisiner avec celles subissant l'action
de l'autre Microsporidie. On ne peut donc préciser la nature des interac-
tions qui pourraient exister entre ces deux Microsporidies. Enfin, l'étude
de la conservation du pouvoir pathogène de l'association des deux Micros-
poridies a montré que le déroulement complet du cycle de ces deux parasi-
tes aboutit à la formation de nouveaux germes virulents ; ce qui autorise
à considérer cette association de maladies comme susceptible de se trans-
mettre dans les populations naturelles.

---

- 217 -
CHAPITRE
III
LES ANTIMICROSPORIDIENS ET LEURS EFFETS SUR NOSEMA MANIERAE
CHEZ HELIOTHIS ARMIGERA,
L'ampleur des dommages causés par les Insectes aux plantes cultivées
a motivé des essais d'élevage de ces Insectes pour en disposer en permanence
dans les laboratoires et stations de recherche afin d'étudier les caractères
biologiques nécessaires à la mise au point des méthodes de lutte qui permet-
tent de réduire leur pullulation. Très souvent, la conduite de ces élevages
se heurte à différents problèmes, dont les principaux sont les Viroses, Mycoses,
Bactérioses et Microsporidioses. Pour lutter contre ces maladies, plusieurs
méthodes ont été utilisées: le traitement des oeufs avec de l'eau de Javel à
10 % (BORDAT et PICHOT, 1979) ou avec du permenganate de potassium (VAGO, 1954)
l'utilisation d'antibiotiques: Fumagilline (Fumidil B),Benomyl, Enteroseptol,
Gentamicine, Sulfate de streptomycine, Phosphate MBC (HARVEY et GAUDET, 1977 ;
HSIAO et HSIAO, 1973
SOHI et WILSON, 1979 ; SUGDEN et FURGALA, 1979). En ce
qui nous concerne deux antibiotiques considérés comme étant des agents anti-
microsporidiens ont été testés. Ce sont: la Fumagilline (ou Fumidil B) et le
Benomyl.
1 - MÉTHODOLOGIE
L'étude de l'effet de la Fumagilline et du Benomyl sur le développe-
ment de N. man~enae a été effectu~sur des larves de 3è stade d'Ho ~gena
élevées individuellement et ayant muer depuis un jour. Ces larves sont réparties,
pour chaque antibiotique et pour chaque dose en 4 lots comprenant 25 à 45 larves.

---

-)218 -
- 1er lot : Larves + milieu sans agent antimicrosporidien
- 2è lot : larves + milieu sans agent antimicrosporidien + suspension de
4
spores de concentration 2.21.10
spores/ml.
- 3è lot
larves + milieu avec agent antimicrosporidien
- 4è lot
larves + milieu avec agent antimicrosporidien + suspension
4
de spores de concentration 2,21.10
Les produits à tester ont été incorporés au milieu nutritif arti-
ficiel utilisé dans l'alimentation des chenilles. Ces antibiotiques ont été
mélangés à sec, à différentes doses, avec les constituants alimentaires com-
posant le milieu nutritif (voir page 35).
Pour la Fumagilline, 6 doses ont été testées: 1 mg/500 g ; 1,5 mg/
500 g ; 2 mg/500 g ; 2,5 mg/500 g ; 3 mg/500 g et 3,5 mg/500 g. La Fumagilline
ou Fumidil B (Bicyclohexylammonium fumagilline utilisée ici est présentée en
flacons d'environ 25 g de poudre représentant 0,5 g de Fumagilline.
Le Bénomyl a été testé aussi à différentes doses: 0,25 mg/IOO g
0,50 mg/IOO g
2,5 mg/IOO g ; 5 mg/IOO g ; 25 mg/IOO g et 50 mg/IOO g. Le
Bénomyl (méthyl 1 -
butylcarbamoyl
- 2 - benzimidazole carbamate) testé
dans nos essais est commercialisé sous forme de poudre de Benlate contenant
50 % de Benomyl.
Les larves soumises à l'expérience ont été nourr~es jusqu'à la nym-
phose sur du milieu contenant l'agent antimicrosporidien. Celles destinées à
être infestées sont d'abord nourries pendant 24 h sur du milieu non contaminé
et elles sont ensuite transférées sur du milieu contaminé contenant l'agent
antimicrosporidien.
La présence des spores de N. manie~ae est vérifiée à l'aide de frot-
tis du tube digestif. Les résultats obtenus ont été analysés statistiquement,
II - ESSArS AVEC LA FUMAGrLLI"NE
Différentes
doses, comme nous l'avons mentionné ci-dessus, ont
été testées chez les larves de 3è stade ; les résultats obtenus sont regroupés
dans le tableau 63.

---

Doses
Larves
% mortalité
Nymphes
% nymphose
Nymphes
% mortalité
Imagos
%
( 1)
mortes
larvaire
apparues
mortes
nymphale
apparus
émergence
- -
----- - - - - - - - - " - -
" f-~
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
0
30/140 10 1/140 21,4
64,5
110
44
78,6
35,5
41
44
37,2
100
69
0
62,8
0
Img/500 g
7/29
26/35
24, 1
66, 1
22
9
75,9
33,9
9/22
8/9
40,9
81, 1
13
1
59,1
18,9
1,5mg/500 g
4/25
21/30
16
64,2
21
9
84
35,8
6/21
6/9
28,5
53,3
15
3
71,5
46,7
2 mg/500 g
4/20
26/40
20
56,2
16
14
80
43,8
5/16
9/14
25,7
52,3
Il
5
75
47,7
2,5 mg/500 g 7/25
19/35
28
36,S
18
16
72
63,5
4/18
9/16
22,2
43,7
12
7
77,8
56,3
3 mg/500 g
7/20
23/40
35
34,6
13
17
60
70,9
3
11
23,0
31,2
9
8
77
68,8
0'1
3,5 mg/500 g 11/25
26/45
44
24,6
14
19
66
75,4
3
9
21,4
33,0
Il
10
78,6
67
N
TABLEAU
63
Effets des différentes doses de
Fumagilline sur la microsporidiose à N. mani~a~ chez les
larves de 3è stade d'Ho ~~g~a.
T = témoins ; l = larves infestées
( 1)
1 mg/500 g de milieu ~
2 ppm.

---

- 220 -
a) Mortalité larvaire
Il existe un rapport direct entre la dose de Fumagilline incorporée
au milieu nutritif et la mortalité enregistrée chez les larves infestées. Plus
la dose de la Fumagilline est forte plus la mortalité est faible.
Par contre, chez les larves témoins, c'est-à-dire chez les larves
saines élevées sur du milieu additionné de fumagilline, il a été noté que la
mortalité devient importante à partir de la dose de 2,5 mg/500 g. En effet, à
partir de cette dose, la mortalité passe de 28 % à 44 % pour la dose de 3,5 mg/
500 g.
b) Mortalité nymphale
Toutes les larves qui ont échappé à l'action de N. man~e~e ont
effectué leur mue nymphale. Mais très peu de ces nymphes ont subi la mue ima-
ginale. La mortalité nymphale enregistrée est, certes importante, mais elle va-
rie avec la dose de Fumagilline : de 81,1 % chez les nymphes infestées et nour-
ries au stade larvaire avec du milieu contenant 1 mg/500 g, elle baisse pour
atteindre le taux de 31,2 % chez les nymphes infestées et élevées au stade lar-
vaire sur du milieu auquel on a incorporé 3 mg/500 g.
c) Influence de la Fumagilline sur la reproduction
Les imagos obtenus dans cette série d'essais à partir des larves
parasitées ne nous ont pas permis d'étudier l'effet de No~ema m~e~ae sur la
reproduction d'Ho ~g~a élevées sur du milieu contenant de la Fumagilline,
car le nombre de ces imagos n'était pas suffisant pour former des couples.
Par contre, la reproduction des imagos issus des larves saines nourries sur du
milieu à Fumagilline a été suivie. Nous avons, pour se faire, utilisé unique-
ment les imagos issus des nymphes nourries au stades larvaire avec du milieu à
Fumagilline de concentration 1,5 mg/500 g et des imagos élevés au même stade
avec du milieu sans Fumagilline
ces derniers ont servi de témoins. Ces imagos
ont été répartis en deux groupes
Groupe l
(Témoins) :
4 a +
3 cf
+
Groupe II (Dose : 1,5 mg/500 g)
: 4 a + 3 cf
et
+
4 a + 3 ri'
+

---

- 221 -
- Influence sur la fécondité
La fécondité des femelles suivie au cours de cette expérience, à
permis d'établir le tableau
64.
Dose de
Groupes
Nombre de
Total d'oeufs
Nombre d'oeufs
FumagnIine
femelles
déposés
par femelle
0
l
4
3709
927,25
1,5 mg/500 g
II
8
7034
879,25
TABLEAU
64
Influence du Fumidil B sur la fécondité d'Ho
CVl.ln<.geJta..
En comparant les moyennes des oeufs déposés par les femelles de
chaque groupe, on constate que la différence entre ces deux moyennes n'est
pas significative.
- Influence sur l'accouplement
Sur les 12 femelles dont la reproduction a été suivie, 6 se sont
accouplées ; ces 6 femelles se répartissent de la façon suivante
Groupe l
2 femelles se sont accouplées, soit 50 %
Groupe II
5 femelles se sont accouplées, soit 62,S %
La comparaison de ces deux pourcentages d'accouplement montre que
le taux observé chez les femelles nourries au stade larvaire avec du milieu
sans fumidil B (Groupe 1) ne diffère pas significativement du taux observé
chez les femelles du Groupe II (d = 1,125 ; sd = 0,301).
- Influence sur la fertilité
La fertilité des pontes, c'est-à-dire le nombre d'oeufs éclos sur
le nombre total d'oeufs pondus, a été noté dans chaque groupe. Ces résultats
sont consignés dans le tableau 65.
1
Groupes
Nombre de femelles
Nombre d'oeufs
Nombre d'oeufs
%
pondus
éclos
fertili té
l
4
3709
1216
32,78
I I
8
7034
2386
33,92
TABLEAU
65
Effet de la fumagilline sur la fertilité d'Ho
a.Jt.rn.LgeJta..

---

- 222 -
Le taux de fertilité des oeufs déposés par les femelles du groupe
l ne différe pas significativement du taux enregistré dans le groupe II
(d = 0,011 ; sd = 0,031).
III - ESSAIS AVEC LE BENOMYL
Des
larves
de
3è stade ont été nourries sur du milieu contenant
du benomyl à différentes doses et contaminé ou non avec une suspension de spo-
4
res de N. maniekae à la dose de 2,21.10 . Les mortalités larvaire et nymphale
notées tous les jours ont permis d'établir le tableau 66.
a) Mortalité larvaire
La mortalité larvaire notée au cours de nos observations varie en
fonction de la quantité de benomyl ajouté au milieu d'élevage.
- Chez les larves nourries sur du milieu ou non contaminé avec les spores
de N. manie~ae,
la mortalité larvaire diminue pour atteindre le taux de 22 %
à la dose de 2,5 mg/IOO g. A partir de la dose de 5 mg/100 g, cette mortalité
croit de 32,5 % à 48,8 % à la dose de 50 mg/IOO g.
- Chez les larves nourries sur du milieu contaminé, la mortalité larvaire
dès la dose de 0,25 mg/IOO g, passe de 54,3 % à 39,1 % à la dose de 2,5 mg/IOO g.
Cette mortalité augmente ensuite pour atteindre 57,6 % à la dose de 50 mg/IOO g.
b) Mortalité nymphale
Contrairement à la ~rtalité larvaire qui augmente à partir de la
dose de 5 mg/IOO g, la mortalité nymphale, chez les nymphes élevées sur du mi-
lieu contaminé ou non, diminue dès la dose de 0,25 mg/IOO g pour atteindre le
taux de 18,1 % chez les nymphes saines et le taux de 43,6 % chez les larves
infestées pour la dose de 50 mg/IOO g.
c) Influence du be nomyl et de N. m~~ae sur la reproduction
Seul le nombre des imagos obtenus dans les essais faits avec du
benomyl à la dose de 2,5 mg/IDa g nous a permis de suivre la reproduction de
ces Insectes afin de voir si celle-ci peut être influencée ou non par le be-
nomyl et le parasite. A partir des imagos obtenus, 3 groupes ont été formés
• Groupe l : 5 femelles sa~nes + 5 mâles sains issus des larves élevées sur du
milieu sans benomyl. Ce groupe sert de témoin.
• Groupe II : 5 femelles infestées et 5 mâles infestés issus des larves élevées
sur du milieu contenant du benomyl à 2,5 mg/laD g .
• Groupe III : 4 femelles saines + 4 mâles sains issus des larves élevées sur
du milieu sans benomyl.

---

Doses
Larves
% mortalité
Nymphes
%
nymphes
% mortalité
Imagos
%
( 1)
mortes
larvaire
apparues
nymphose
mortes
nymphale
apparus
émergence
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
T
l
0
39/115 79/115
33,9
59,2
76
36
66,1
40,8
31
36
40,7
100
45
0
59,3
0
0,25 mg/IOOg 14/50
47/70
28,0
54,3
36
23
-n
45,7
13
Il
36,1
72,7
23
4
63,9
27,3
1
0,50 mg/IOOg 11/45
41/75
24,0
40,3
34
34
1
76
59,7
Il
25
32,3
60,9
23
9
67,7
39,1
2,5 mg/IOO g II/50
42/80
22,0
39,1
39
38
78
60,9
9
21
23,0
41,9
30
17
77
58,1
N
5 mg/IOO g
13/40
52/80
32,5
48,1
27
28
67,5
51,9
5
13
18,5
34,2
22
15
8 J, 5
65,8
N
W
25 mg/IOO g
17/45
53/75
37,7
52,9
28
22
62,3
47,1
5
Il
17,8
38,8
23
Il
82,2 :
61,2
1
50 mg/IOO g
23/45
47/60
48,8
57,6
22
13
51,2
42,4
4
7
18, 1
43,6
18
6
81,9 i
56,4
J
TABLEAU
66
Effets de différentes doses de benomyl sur la microsporidiose à No~ema manIe~ae chez (es larves
de 3è stade d'Ho a4mi9~a.
T = témoins ; l = larves infestées
( 1)
0,25 mg/IOO g
~ 250 ppm.

---

- 224 -
- Effet sur la fécondité
Le nombre d'oeufs déposés par les femelles de chaque groupe est
consigné dans le tableau 67 .
..
Groupes
Nombre de
Total d'oeufs
Nombre d'oeufs
femelles
déposés
par femelles
l
5
5155
1031
II
5
187
3714
III
4
3944
986
TABLEAU
67
Effet du benomyl et de N. m~e~ae sur
la fécondité.
La comparaison des moyennes d'oeufs pondus par les femelles de
chaque groupe montre qu'il n'y a pas de différence significative entre les
moyennes d'oeufs déposés par les femelles du groupe l et du groupe III. Par
contre, la moyenne des oeufs pondus par les femelles du groupe II diffère
significativement de celles des groupes l et III. Cette différence est due
à la longévité des imagos du groupe II qui est extrémemect réduite. En effet,
des 5 femelles soumises à l'expérience, 3 étaient mortes trois jours après
leur émergence~ et les deux autres, 5 jours après leur sortie. Cette mortalité
est dues à la nosémose.
- Effet sur l'accouplement
La bourse copulatrice des quatorze femelles soumises à cette expé-
rience a été disséquée afin de vérifier la présence ou l'absence de spermato-
phore, preuve qu'il y a eu ou pas eu d'accouplement. Les résultats obtenus
sont cons ignés dans le tab leau 68.
Groupes
Nombre de
Nombre de femelles
%
femelles
accouplées
d'accouplement
l
5
3
60
II
5
0
0
III
4
3
75
TABLEAU
68
Effet du benomyl et de N. manie~e sur l'ac-
couplement chez H. anmige~a.
Pour analyser statistiquement ces résultats, nous avons comparé
les taux d'accouplement notés dans les groupes. Il ressort de cette analyse

---

- 225 -
qu'il n'y a aucune différence significative entre les pourcentages du groupe l
et du groupe III. En revanche, le taux d'accouplement noté dans le groupe II
diffère significativement des taux des groupes l et III
(tableau 69).
Cette différence s'explique par la longévité des femelles qui est réduite par
la microsporidiose.
Groupes
Différence entre
sd
comparés
les pourcentages
l
- I I
0,60
0,28
l
-
III
0,15
0,31
I I - III
0,75
0,31
TABLEAU
69
: Comparaison des pourcentages d'ac-
couplement d'Ho akm~geka saines ou parasitées
nourries avec du milieu contenant du benomyl.
- Influence du benomyl et de N. m~e~a sur la fertilité des oeufs
La fertilité des pontes notée
dans chaque groupe est consignée
dans le tableau 70.
Groupes
Total d'oeufs
Nombre d'oeufs
%
éclos
fertilité
l
5155
1837
35,6
I I
187
°
°
III
3944
1471
37,2
TABLEAU
70
: Effets du benomyl et de N. manie~ae sur
la fertilité de ponte d'Ho ~migena.
En comparant ces pourcentages de fertilité, il ressort que la dif-
férence entre le nombre d'oeufs éclos dans le groupe l et dans le groupe III
n'est pas significative. Par contre, dans le groupe II, aucun oeuf a éclos.
L'absence d'oeufs éclos dans le groupe II peut s'expliquer par le fait qu'au-
cun accouplement n'a été noté dans ce groupe. Notons par ailleurs que, le
frottis de certains oeufs de ce groupe (II) a révélé la présence des spores
de N. marUekae.

---

'.~
- 226 -
Groupes
Différence entre
sd
comparés
les pourcentages
l
-
II
0,356
0,035
l
-
III
0,016
0,010
I I - III
0,372
0,035
IABLEAU
71
: Comparaison des taux de fertilité des
pontes d'Ho ~~geka saines et ~nfestées élevées sur
du milieu contenant du benomyl.
IV - DISCUSSION ET CONCLUSIONS
L'ensemble des résultats que nous venons d'exposer montre:
1°/ Que le fumidil B entraine une baisse de la mortalité chez les larves
infestées. Cette diminution est de l'ordre de 39,9 % pour la dose de 3,5 mg/
500 g. Chez les larves non infestées, on note par contre une augmentation du
taux de mortalité larvaire à partir de la dose de 2,5 mg/500 g. Le fumidil B,
à partir de cette dose, serait donc nocif pour les larves d' H. ~~g~a.
La mortalité enregistrée chez les nymphes saines ou infestées di-
minue au fur et à mesure qu'augmente la dose du fumidil B incorporé au milieu
nutritif. Cette baisse est, par exemple pour les nymphes infestées, de l'ordre
de 68,8 % pour la dose de 3 mg/500 g. Enfin, il semble que la fumagilline
n'a aucune influence sur la reproduction d' H. ~ge~a car au cours de nos
observations, aucune composante de cette reproduction (fécondité, accouplement
et fertilité) n'a été perturbée.
La fumagilline a été testée par beaucoup d'autres auteurs contre
des Microsporidies chez d'autres espèces d'Insectes:
KURTTI et BROOKS (1976) ont utilisé la fumagilline à la concentration de
ppm contre la Microsporidie de Mata~o~oma ~~~~a transmise aux cellules
ovariennes en culture des prénymphes d'Het{o~~ zea. Ils ont noté au cours de
leur étude que la fumagilline bloque le développement de la Microsporidie .
. SORI et WILSON (1979), en étudiant l'effet de la fumagilline sur N. ~~~ae
dans une culture d'hémocytes de Mata~o~oma ~~~a, ont constaté que cet
antimicrosporidien, aux doses de 2,5 pg/ml et 10 ~g/ml, élimine la Microsporidie.

---

- 227 -
• SUGDEN et FURGALA (1979) ont recherché l'effet de la fumagilline sur No~ema
ap~, parasite intestinal des adultes d'Ap~ metti6eQa. Ils ont noté qu'à la
concentration 20 ppm, la fumagilline réduit sensiblement l'infestation des
adultes.
Le~écanisme d'action de la fumagilline est encore mal connu. Selon
LIU (1973), le fumidil B altère l'enveloppe sporale alors que d'après KURTTI et
BROOKS (1976), le fumidil B agit sur les stades jeunes des Microsporidies en
bloquant leur développement ; cet antibiotique interférerait avec le DNA de
replication du parasite. Ils ajoutent que dès que le traitement cesse la Micros-
poridie retrouve sa capacité de développement.
Aucune mention à l'effet du Fumidil B sur la reproduction des Insec-
tes n'a été notée.
2°/ Le bénomyl provoque également une baisse de la mortalité chez les larves
infestées. Les doses de benomyl qui entrainent une baisse sensible de la morta-
lité sont 0,50 mg/laD g et 2,5 mg/IOO g car pour ces doses, la diminution est de
l'ordre de 18,9 % et de 20,1 %.
Chez les larves saines, on note en revanche une augmentation de la
mortalité à partir de la dose de 5 mg/IOO pour atteindre le taux de 48,8 % à
la dose de 50 mg/lOO g. Le benomyl, à partir donc de la dose de 5 mg/laD g,
serait nocif aux larves d'Ho ~ge~.
1
La mortalité notée chez les nymphes sa1nes et parasitées diminue au
fur et à mesure que la dose de benomyl incorporée au milieu nutritif augmente.
Cette baisse est de l'ordre de 56,4 % chez les nymphes infestées. Il semble là
que les doses de benomyl utilisées ne sont pas nocives pour les nymphes d'Ho
~ge~a.
La reproduction chez H. ~mige~a n'est pas influencée par le henomyl
car ni la fécondité, ni la fertilité des pontes et ni l'accouplement n'ont été
influencées par les doses de benomyl que nous avons employées. Par contre N.
manie~ae exerce une action néfaste sur la reproduction car elle diminue considé-
rablement la longévité des imagos et infeste les oeufs déposés.
Cet antimicrosporidien a été testé aussi contre d'autres Microspo-
ridies. Ainsi:
. BROOKS et al. (1977) ont également testé le benomyl à des concentrations de
250, 500 et 1000 ppm contre N. hetio~h1~ chez H. ~ge~a.
Ils ont enregistré
pour ces 3 doses, une réduction significative de la densité de l'infestation
des adultes.

---

228 -
• HARVEY et GAUDET (1977), utilisant du benomyl dans le milieu d'élevage des
larves de Cho~tone~a 6~6e~ana parasitéœy~r N. 6~6e~anae, ont noté qu'
avec 25, 75 et 250 ppm, la réduction de l'infection est sensible. Mais, paral-
lèlement à cette diminution de l'infection, ils ont constaté qu'avec des con-
centrations de 75 ppm, la croissance des larves, la fertilité des pontes et
l'accouplement sont sensiblement diminués .
. SORI et WILSON (1979) ont montré, pour leur part, que le bénomyl, à la con-
centration de 25 pg/l et utilisé pendant 7 jours, élimine sensiblement N. ~­
~ae des hoemocytes de Mataeo~oma ~tnia en culture. Mais dès que le traite-
ment cesse, l'infestation reprend. Le bénomyl est en effet très efficace contre
les Microsporidies, mais jusque là, son mécanisme d'action est très mal connu.
Selon BROOKSet al. (1977), le benomyl agirait sur la mérogonie et la sporogonie,
car au cours de leur études; ils ont observés des spores et des stades jeunes
ayant des formes aberrantes.
D'une façon générale, la fumigilline et le benomyl sont efficaces
contre les Microsporidies, plus particulièrement les No~ema, mais à partir de
certaines doses, ces produits deviennent nocifs pour les Insectes que l'on veut
protéger; c'est pourquoi, nous pensons que l'utilisation de ces antibiotiques
doit être faite avec beaucoup de précautions.

---

RESUME
ET
CONCLUSIONS
GENERALES

---

-
231 -
RÉSUMÉ ET CONCLUSIONS GÉNÉRALES
L'étude, dont nous venons d'exposer les résultats, concerne l'analyse
d'une microsporidiose expérimentale chez H~ot~ ~mig~, ravageur de plus
en plus redouté des cultures, surtout de grandes cultures de coton, de tabac,
de maïs et de plantes potagères dans de nombreux pays d'Afrique et d'Europe.
Le choix de ce prototype expérimental a été motivé par le fait que, malgré le
grand nombre de programmes de recherches consacrés à l'étude de l'utilisation
des agents biologiques (entomophages et entomopathogènes) contre H~ot~
~~~, aucune microsporidiose n'a été ni détectée, ni provoquée expérimen-
talement chez cet Insecte.
Pour mener à bien cette étude, un élevage permanent d'H~ot~ ~mi­
ge4a a été réalisé. Puis nous avons effectué des infestations expérimentales
visant à rechercher une action pathogène pour H. ~g~ de 3 espèces de Mi-
crosporidies : les Microsporidies de G. tuteota, de S. ~o~~ et de Ch.
zaeeo~. La Microsporidie de G. tuteota s'est révélée être sans action pa-
thogène, même sur les larves jeunes; celle de S. !ltto~~ s'est montrée
peu pathogène, alors que nous avons noté une haute pathogénicité de la Micros-
poridie de Ch. zaeeo~~. Cette Microsporidie provoque en effet une mortalité
très élevée aussi bien par inoculation qu'après ingestion des spores. A la
suite de ces résultats, l'étude de l'action de ce Protozoaire a été développée
parallèlement, nous avons cherché à l'identifier. La Microsporidie de C~o
zaeeo~~, infeste plusieurs tissus et les oeufs. C'est par un cycle désormais
classique que ce parasite envahit son hôte. Ce cycle débute par une mérogonie
où les mérontes possèdent soit un diplocaryon, soit deux diplocaryons. La mé-
rogonie est suivie de la sporogonie ou les sporontes, par cytodiérèse, don-
nent chacun deux sporoblastes qui se transformeront en spores. Tous les sta-
des de ce parasite sont à diplocaryon(s).

---

- 232 -
,.
L'étude ultrastructurale des différents éléments du cycle de la
Microsporidie a permis de mettre en évidence un certain nombre de carac-
tères morphologiques importants en taxonomie
- l'invasion du tissu-hôte est diffuse et le parasite est en contact
direct avec le cytoplasme de la cellule-hôte, tout au long du cycle.
- tous les stades de développement observés possèdent des noyaux
groupés 2 à 2 sous la forme de diplocaryon.
- la plasmotomie sporogonique se fait par bipartition du sporonte.
La cytodiérèse suit de près la caryocinèse.
- la structure sporale comprend : une enveloppe sporale (exospore et
endospore), un filament polaire, un polaroplaste et un sporoplasme binucléé.
Ces points ont permis d'intégrér la Microsporidie de Ch. zaeeo~~
dans le genre No~ema. En la comparant aux autres No~ema de Lépidoptères (90
espèces environ), nous avons constaté qu'elle présente des caractéristiques
la distinguant de toutes ces derniers. Nous l'avons nommée No~ema m~~ae
La taille des spores de N. m~~ae varie d'un hôte à l'autre, mais dans la
p~upart des cas, ces variations ne sont pas significatives. No~ema m~~ae
est définie par un spectre de spécificité large, car elle se développe non
seulement chez des Lépidoptères de la famille des Pyralidae et des Noctuidae
mais aussi chez des espèces appartenant à la famille des Pieridae et Tortri-
cidae.
No~ema m~~ae est peu résistante aux températures inférieures à
0° C. C'est dans la zone des températures comprises entre 0° C et 30° C qu'el-
le conserve le mieux et le plus longtemps sa virulence à l'égard des larves
d'Ho ~g~.
L'étude de l'action pathogène de N. m~~ae vis à vis d'Ho ~g~
a été abordée sous plusieurs angles :
- l'étude quantitative de l'effet pathogène de N. m~~ae a montré
que le taux de mortalité dépend de la quantité des spores administrées et de
l'âge des larves. En effet, chez les larves de même stade, plus la quantité
de spores ingérées ou injectées est grande, plus la mortalité est élevée et
cette mortalité intervient tôt après l'infestation. Par ailleurs, pour une
même quantité de spores administrées, la mortalité est plus forte chez les
larves infestées au stade jeune que chez les individus parasités à un stade
plus âgé. Les larves ayant échappé à l'action de N. ma~~ae effectuent leur
mue nymphale, mais aucune des nymphes apparues n'a donné d'imagos.

---

- 233 -
La mortalité enregistrée est probablement due à la prolifération de N. manie-
kae dans les tissus de son hôte. Mais, il a été aussi constaté une multipli-
cation de Bactéries diverses qui pourrait être également à l'origine de la
mortalité observée.
L'étude biométrique a montré que l'infection par N. mani~ae provoque un re-
tard de la croissance des larves, mais n'empêche pas les mues larvaires; el-
le retarde la nymphose et entraîne la mort des nymphes. Le poids des larves
et des nymphes parasitées est plus léger que celui des individus sains.
L'évolution de la microsporidiose a été suivie de l'étude histologique de
différents tissus des individus parasités. La plupart de ces tissus sont at-
teints. Si le tissu adipeux et le tube digestif sont les organes les plus at-
taqués par ce Protozoaire, celui-ci se développe également dans les muscles,
l'hypoderme, les gonades, les trachées, la masse cérébrale et les glandes
salivaires. Dans tous les cas, le cytoplasme est attaqué, de sorte que les
lésions se reconnaissent à l'accumulation des spores. La microscopie électro-
nique a révélé que seul le cytoplasme est atteint ; les noyaux restent in-
tacts.
L'action éventuelle de N. mani~e sur les enzymes digestives et les enzymes
de l'hémolymphe a été égal~~nt recherchée. Dans le tube digestif, plusieurs
activités enzYmatiques ont été mises en évidence chez les individus sains.
Chez les larves infestées, exception faite de la trypsine qui a une activité
nulle, il semble y avoir une légère augmentation de l'activité des glucidases,
alors que l'activité des phosphatases, des Lipidases et des protéinases res-
tent stables.
Dans l'hémolymphe des larves saines, 13 enzymes ont été mis en évidence. Chez
les larves parasitées, il a été noté une baisse des activités des phosphata-
ses alcaline et acide, une augmentation de l'activité de la leucine aminopep-
tidase et une activité nulle de la lipase (C14).
Nos expériences ont aussi montré que N. mani~e est susceptible de s'associer,
chez les larves d'Ho ~g~, à No~ema ~p. et s. titto~. No~ema ~p.,
seule, provoque une mortalité larvaire, nymphale et imaginale relativement
faible. Pour toutes les doses utilisées, beaucoup de larves ont effectué la
mue imaginale et certains imagos obtenus se sont accouplés pour donner des
larves saines. No~ema ~p. provoque une baisse de la reproduction chez H.
~mig~a ; cette baisse est due à la longévité des adultes qui a été réduite

---

-
234 -
par la microsporidiose. No~ema ~p. n'attaque que le tube diges~if d'Ho ~~­
g~. L'association de No~ema ~p. et de No~ema mani~ae provoque une morta-
lité larvaire plus importante. Aucun individu parasité n'atteind le stade
imaginal. Les études histologiques réalisées ont révélé la présence des spo-
res dans la plupart
des organes de l'hôte; ces spores provoquent la lyse
des tissus envahis. Pour savoir si la mort des larves doublement parasitées
pourrait être le point de départ d'infections nouvelles sous la forme de syn-
drome semblables, nous avons recueilli de ces larves des spores qui ont été
utilisées pour contaminer des larves saines. Il a été non seulement noté une
forte mortalité mais aussi les mêmes lésions histopathologiques. Ceci prouve
que l'association de N. mani~e et de No~ema ~p. de S. ~~~ est sus-
ceptible de constituer une source nouvelle d'infection double dans la nature.
Enfin, compte tenu de l'importance que prend l'élevage des Insectes
en Entomologie appliquée, nous avons testé deux antimicrosporidiens, le Fumi-
dil B et le Benomyl, contre la microsporidiose à N. mani~ae chez H. ~g~.
Ces deux produits ont provoqué une baisse de la mortalité chez les larves in-
festées, mais, utilisés à de fortes doses, ils deviennent nocifs pour les
larves.
L'ensemble de ces résultats paraît apporter une contribution sur trois
plans généraux :
- en pathologie des Invertébrés, nous avons mis en évidence l'existen-
ce d'une Microsporidie hautement pathogène vis à vis d'une espèce de Lépidop-
tère. Ce Protozoaire est caractérisé par la largeur de son spectre de spéci-
ficité.
- en entomologie agricole, en mettant en évidence la haute pathogé-
nicité d'une Microsporidie vis à vis d'Ho ~~g~a, ravageur de culture très
répandu en Afrique et en Europe, nous attirons l'attention sur la potentia-
lité des Microsporidiesdans la régulation naturelle des populations de cet
Insecte, pour lequel aucun facteur épizootique microsporidien n'est connu.
- en protozoologie, notre étude a permis d'identifier l'agent patho-
gène responsable de la mort des larves de Ch. zaeeaniuo observée}l'I.R.A.T.
(G.E.R.D.A.T.-Montpellier). Il s'agit d'une Microsporidie jamais décrite,
que nous avons nommée No~ema mani~ae.

---

- 235 -
Bien qu'un terrain d"investigations très vaste ait été abordé, cer-
tains sujets ont été à peine abordés, notamment l'analyse biochimique de
l'action des Microsporidies sur les Lépidoptères et l'étude des interactions
de ces Microsporidies chez leurs hôtes. Nous pensons que ces sujets méritent
~
d'être approfondis.

---

BIBLIOGRAPHIE

---

- 239 -
B 1 B LlO G R A PHI E
ABDALLAH S., SALAMA M.E., 1975 - Biological studies on the American bollworm,
Heliot~ zea (Boddie) in Egypt. Z. Angew. Entomol., 79 (4), 370-
376.
ABDALLAH M., ZAZOU H., KANDIL M., BALBA M.H., 1973 - Storage of insecticides
in the fat body of Spodopt~ titto~~ (Boids.) as a possible
mechanism of resistance. Experientia, 29 (3), 318-319.
ABE Y., 1978 - Propagative reproduction of No~ema bomby~ Naegeli in larvae
of silkwarm. Journ. Sericult. Sei. Japan, 47 (4), 279-284.
ABE Y., FUJIWARA T., 1979 - Mode of multiplication of a Protozoan Pl~topho~
~p. (Microsporidia : Nosematidae) in the
~idgut epithelium of silk-
worm larvae. J. Sericult. Sei. Japan, 48 (1), 19-23.
ABUL-NASR S., 1959 - Further tests on the use of a polyhedrosis virus in the
control of cotton leafworm P~odenia ~ Fabricius. J. Insect.
Pathol.,l (2),112-120.
AHMAD R., SALIM M., AHMAD S., GHANI M.A., 1977 - Studies on the seasonal inci-
dence and biological mortality factors of the pine cone borer, V~o­
~y~ ab~etetta (Schiff.) (Lep. pyralidae). Techn. Bull., Com-
monwealth Inst., Biol. Control, 18, 113-127.
AKBARIEH M., 1977 - Recherches ultrastructurales et biologiques sur les Protis-
tes parasites des Cladocères de la région languedocienne. Thèse 3è
Cycle, U.S.T.L., Montpellier, 174 p.
ALGER N.E., MADDOX J., UNDEEN A., 1977 - Studies preparatory to a field test of
No~ema alg~ae as a control of Anophet~ ~tephe~~. In abst. papers,
5th Internat. Congr. Protozool., New -:York, 322.
ALLEN H.W., 1954 - Nosema disease of Gno~o~chema op~culetia (Zeller) and
Macnoce~U6 ancyiono~U6 Roliwer. Ann. Ent. Soc. Amer., 47, 407-424.
AMARGIER A., ANGELINI A., VANDAMME P., VAGO C., 1968 - Un complexe de viroses:
granulose-polyédrie cytoplasmique chez les Lépidoptères ~gy~oplace
teuco~eta Meyrick. Conton Fibres trop., 23, 413-416.
AMARGIER A.; MEYNADIER G., VAGO C., 1968 - Un complexe de viroses: polyédrie
nucléaire et densonucléose chez le Lépidoptère Galte~ metionetia
L. Mikroskopie, 23, 245-251.

---

240 -
AMARGIER A., SMIRNOFF W.A., 1974 - Etude histologique d'un complexe de maladies:
polyédrose nucléaire avec faisceaux et microsporidiose, chez le Lépi-
doptère A~chyp~ ce~~vo~an~. Entomophaga, 19, 135-143.
ANDREADIS T.G., 1980 - No~ema py~aU6ta infection in Ma~oce~U6 g~an~, a Braco-
t..
nid, parasite of the European corn borer, O~t~nia nub~~.J.
Invert. Pathol. 35, 229-233.
ANGELINI A., LABONNE V., 1970 - Sur une technique d'élevage d'He~ot~ ~g~a
(Hüb.) et une possibilité de production de virose nucléaire en Côte
d'Ivoire. Cot. Fib. Trop., 25 (4), 501-504.
ANTHONY D.W., SAVAGE K.E., HAZARD E.I., AVARY S.W., BOSTON M.D., OLDACRE S.W.,
1978 - Field tests wi th NMema a..tg~e Vavra and Undeen (Microsporida,.
Nosematidae) against
Anophel~ a..tb~anU6 Wiedemann in Panama.
In Miscel. Publ. Entomol. Soc. Amer., II (1), 17-27.
ARATA A.A., 1977 - The developing role of microbiological agents in vector control.
Experientia 33 (1), 125-130.
ARMSTRBNG E., 1976 - The effects of the temperature on the longevity of adult
V~o~op~ ~toni infected with No~ema king~. Entomophaga 21
(2), 201-205.
ARMSTRONG E., 1978 -
No~ema w~~ : body weight changes in the larvae of T~­
bo~um c~taneum. Z. Parasitenkd. 56, 13-15.
ARMSTRONG E., 1979 - No~ema wh~ei : relationship of body weight gains and food
consumption of T~o~um ~taneum larvae. Z. Parasitenkd. 59, 27-29.
ATGER P., VAGO C., 1960 - Pathogenèse simultanée de virose et de Nosemose chez
les Lépidoptères. Rev. Pathol. Végét. et Entomol. Agric., France, 39,
205-209.
BAlLE Y., 1972 - The preservation of infective microsporidian spores. J. Invert.
Pathol., 20, 252-254.
BALACHOWSKY A.S., 1972 - Entomologie appliquée à l'Agriculture. Masson et Cie.,
Paris, II (2), 1059-1934.
BARRAS D.J., KISNER R.L., LEWIS W.J., 1972 - Effects of the parasitoïd, Mi~op~­
~ ~oc~p~ on the haemolymphes proteins of the corn earworm,
He~o~ zea. Comp. Biochem. Physiol., 43 (4), 941-947.
BELL J.V., 1969 - Se~atia m~c~ce~ found in eggs of H~ot~ zea : tests
against T~choplU6ia ni. J. Invert. Pathol.,
13 (1), 151-152.
BERGMEYER H.U., BERNT E., 1965 a - Determination in milk with phenylphosphate.
In methods of enzymatic analysis (H.U. Bergmeyer ed.) Acad. Press,
New York, 785.
BERGMEYER H.U., BERNT E., 1965 b - Glutamate-oxalacetate transmitase. In methods
of enzymatic analysis (H.U. Bergmeyer ed.) Acad. Press~ New-York, 851.
BERREBI P., BOUIX G., 1978 - Premièrœobservations sur une microsporidiose de
l'Athérine des ét~ngs languedociens, Ath~na boy~ Risso, 1810
(Poissons, téléostéens). Ann. Parasitol. Hum. et Comp., 53 (1), 1-20.
BERREBI P., 1978 - Contribution à l'étude biologique des zones saumâtres du
littoral méditerranéen français. Biologie d'une Microsporidie : Glu-
gea ath~ni n. ~p., parasite de l'Athérine Ath~na boy~ Risso,
1810 (Poisson, Téléostéen) des étangs côtiers. Thèse de 3è Cycle,
U.S.T.L., Montpellier, 196 p.

---

- 241 -
BERREBI P., 1979 - Etude ultrastructurale de Glugea ath~nae n. ~p., Micros-
poridie parasite de l'athérÎne, Ath~na boye~ Risso, 1810 (Poisson
Téléostéen) dan~ les lagunes du Languedoc et de Provence. Z. Parasi-
tenkd. 60, 105-122.
BOCTOR I.Z., SALEM S.I., 1973 - Free aminoacids of the heamolymph of the cotton
leaf-worm Spodopte~a lltto~~ Boisduval larvae (Lepidoptèra, Noc-
tuidae). Comp. Biochem., Physiol., 45 (4), 731-740.
BOCTOR I.Z., JWANNY E.W., 1974 - Fatty acid pattern of haemolymph lipids in
Spodopt~a lltto~ Boisduval larvae. J. Comp. Physiol., B, 93 (2)
151-155.
BOCTOR I.Z., JWANNY E.W., 1975 - Haemolymphe lipids of the cotton leaf worm,
Spodopteka ~o~~ (Boisduval) larvae. Zool. Jb. Abt. Allg., zool.
Physiol., Tiere, 79 (1-2), 105-110.
BOEMARE N., MAURAND J., 1976 - Recherches sur le métabolisme respiratoire des
larves de Simulies saines et atteintes de Microsporidioses. Bull.
Soc. Zoo1. France, 101 (3), 377-385.
BOUIX G., LOUBES C., MAURAND J., GASC C., 1976 - Cycle de développement d'une
Microsporidie parasite de Myriapodes Diplopodes. Données nouvelles
sur le genre Glugea Thelohan, 1891. Journ. Protozool., 23 (4), 5 A.
BORDAT D., BRENIERE J., COQUARD J., 1977 - Foreurs de Graminées africaines:
parasitisme et techniques d'élevage. Agr. Trop., 32 (4), 391-399.
BORDAT D., PICHOT M., 1979 - Chito zaeeo~U6 Blez. Technique d'élevage sur milieu
. artificiel et observations sur sa biologie en laboratoire. Agr. Trop.
33 (4), 337-343.
BOURGOGNE J., 1951 - Ordre des Lépidoptères. In Traité de Zoologie P.P. Grassé
! (1), Masson et Cie., 174-448.
BRADER-BREUKEL L.M., 1970 - Lutte contre V~p~op~~ wate~~ (Roths.) et He~ot~
aAmig~a (Hb). Attraction sexuelle et chimiostérilisation. Cot. Fib.
Trop., XXV (4), 505-508.
BREWER F.D., GLICK B., VINSON S.B., 1972 - An immunological investigation of the
factor responsable for the resistance of He~ot~ zea and suscepti-
bility of He~ot~ v~Uc.e~ to the parasitoid C~tÜ.oehitu ~gJU­
eep~. Comp. Biochem. Physiol. 43 (4), 781-786.
BROOKS W.M., 1968 - Transovarian transmission of No~ema he~ot~~ in the corn
earworm, H~ot~ zea. J. Invert. Pathol., Il, 510-512.
BROOKS W.M., 1971 - The inflammatory response of tobacco horworm, Manduea ~exta,
to infection by the Microsporidian, No~ema ~p~ng~~. J. Invert.
Patho1.,
17, 87-93.
BROOKS W.M., GRANFORD J.D.,
1972 - Microsporidioses of hymenopterous parasite,
Campol~ ~ono~en~~ and C~dioc.hite~ ~gJUc.e~, larval parasite of
Heliothis species. J. Invert. Pathol., 20 (1), 77-94.
BROOKS W.M., CRANFORD J.D., PEARLE L.W., 1977 - Benomyl : effectiveness against
the Microsporidian No~ema hilioth.J.~ in the corn earworm, Hiliot~
zea. J. Invertb. Pathol. 31, 239-245.

---

- 242 -
BROOKS W.M., CRANFORD J.D.,
1~78 - Host-parasites relationships of No~ema he-
tiot~~ Lutz and Splendore. In Miscel. Publicat. Entomol. Soc.
Amer., Il (1),51-53.
BROOKS W.M., 1980 - Production and efficacy of Protozoa. Biotechn. and Bioengin.
22, 1415- 1440.
BROOKS W.M., MONTROSS D.B., SPRENKEL R.K., CARNER G., 1980 - Microsporidioses
of Coleopterous pests of soybeans. J. Invert. Pathol., 35, 93-95.
BRYAN D.E., JACKSON C.G., PATANA R., 1970 - Biological comparison of two species
of Encelatoria parasitic in Heliot~ ~p. J. Econ. Entomol. 63 (5),
1469-1472.
BURGES H.U., vANNING E.u., HURST J.A.
1971-
genicity of No~ema o~l:fzaen:':o:
Mor~hoology, de~~lopmen~ and patho-
.
h
,~'vu..A- 11.. ~p. 1.n
~l:fzaepJUluL> ~wu..name.n6.i.o
and 1.ts
ost range among g
.
17. 419-432.
ram1.novorous Insects. J. Invert. Pathol.,
CANNING E.U., 1962 - The pathogenicity of NO~ema locuL>tae Canning.
Invert.
Pathology 4, 248-2S6.
J.
CANNING E.U., 19/6 -.Microsporid1.a 1.n vertebrates . Host-parasite relat1.ons at
the organ1.smal leval. ~n Comparative P
h~' 1
.
at Ow1.0 . Vol. l : Biology of
rhQ M1.crosporidia.
Plenum Press, New York, 137-161.
CANNING E.U.; MADH~I.R.~ 1977 - Studies on two new species of Microsporida hy-
perparas1.t1.c 1.n adult Allo~eadium 6~~atuL>~ (Trematoda, Allocrea-
diidae). Parasitology 75 (3). 293-300.
CANNING E.U., SINDEN R.E., 1973 - Ul.trastructural oo::;erVé1I..LOh" on the development
of No~ema alg~ae Vavra and Undeen (Microsporida, Nosematidae), in
the mosquito Al1.ophel~ ~tephe~~ Liston. Protistologica 9, 405-415.
CANNING E.U., FOONL.P., JOE L.K., 1974 - Microsporidian parasites of Trematode
from aquatic snails in west Malaysia. J. Protozool. 21 (1), ]Q-25.
CANNING E.U., HAZARD E.I., NICHüLA~ J.r., I~/~ - L1.gn~ =là electron miLLu~~OPy
of Ple.i.otopho~a ~p. from skeletal muscle of Blel1.l1.~uL> 6o~. Protis-
tologica 15 (3), 317-332.
CARTER J.B., 1976 - A microsporidian infecting the nerve ganglia of T~pula palu-
do6a larvae. J. Invert. Pathol. 27 (3), 409-410.
CHAUTHANI A.R., CLAUSSEN D., REHNBORG C.S., 1968 - Dosage-mortality data on a
nuclear polyhedrosis virus of the bollworm, Hetiot~ zea. J. Invert.
Pathol. 12 (3), 335-338.
CHE CHI, DREW W.A., YOUNG J.H., 1975 - Comparative morphology and histology of
the larval digestive system of two genera of Noctuidae (Lepidoptera)
HeWt~ and SpodopteJta.. Ann. Entomol. Soc. Amer. 68 (2), 371-380.
CHEUNG P.Y.K., GRULA E.A., BURTON R.L., 1978 - Hemolymph responses in H~ot~
zea: to inoculation with Ba~uL> thuJUn.g~en6~ or M<.cJtOCOCCuL> ll:f~o­
delkti~. J. Invert. Pathol. 31 (2), 143-156.
CLARK T.B., FUKUDA T., 1971 - Ple.i.otopho~a chapmani 11.. ~p. (Cnidospora : Micros-
pori da) in Culex te~a~ (Diptera : Culicidae) from Louisiana.
J. Invert. Pathol. 18 (3), 400-404.
CLAUS EN C.P., 1956 - Biological control of Insect pests in the continental United
States. U.S. Dept. Agr. Techn. Bull., 1139, 151 p.
CLAUSEN C.P., OATMAN E.R., 1978 - Crambidae. In Introduced parasites and preda-
tors of Arthropod pests and weelds : A word review. Agricul. Handbook
480. U.S. Dept. Agricul.,.Washington, 176-183.
CLINCH P.G., 1974 - Observations on the incidence of Nosema disease of honey bees.
New Zeal. J. Exper. Agric., 2 (4), 451-453.

---

- 243 -
CODREANU-BALCESCU D., CODREANU R., 1976 - L'ultrastructure d'une Microsporidie
hyperparasite d'une Grégarine d'Ephémère. J. Protozool. 23 (4), 8 A.
CODREANU-BALCESCU D., CODREANU R., TRACIUC E., 1981 - Ultrastructural data on
a Microsporidian infesting the ovaries of an Araneid. J. Invert.
Pathol. 37, 28-33.
COLLEY C.F., JOE L.K., ZAMAN V., CANNING E.U., 1975 - Light and electron micros-
copical study of Na~ema e~y~emae. J. Invert. Pathol. 26, 11-20.
COMMON I.F.B., 1975 - Evolution and classification of the Lepidoptera. Ann. Rev.
Entomol. 20, 183-203.
COSTE-MATHIEZ F., TUZET O., 1977 - Microsporidies de Chironomidae (Diptères,
Nématocères). Ann. Sei. Natur. Zool. Paris, 12è série, 19 (2), 113-
135.
COUILLOUD R., GlRET M., 1978 - Améliorations possibles dans la conduite de l'éle-
vage d'Helio~ ~ge~a. Note nO 7. Lab. Nutrit. Elev. Insect.
GERDAT, Montpellier,
1 -19.
CROIZIER G., ODIER F., 1973 - Etude des variations individuelles des protéines
de l'hémolymphe du Lépidoptère : Gatle~a meltanelta. Mise en évi-
dence de groupes sériques. Experientia 30, 189-190.
DAHLMANN D.L., VINSON S.B., 1975 - Trehalose and glucose levels in the hemolymph
of He.ti.a:t1U...6 v.0't~c.en6 parasitized by lM.~ap.ut.W ~ac.up~ or CM-
dia~e~ ~g~c.ep~. Comp. Biochem. Physiol., B, 52 (4), 465-468.
DANKS H.V., 1975 - Factors determining levels of parasitism by W~n:themia ~u6a­
p~cta (Diptera, Tachinidae) with particular reference to He.ti.a:t1U...6 ~p.
tLepidoptera : Noctuidae) as hosts. Canad. Entomol., 107 (6), 655-
684.
DAVIS C.J., 1958 - Recent introductions for biological control in HawaI-III.
HawaI Ent. ~oc. Proc., 17, 244-248.
DAXL R., 1977 - HeU.a:t1U...6 v~ c.enô (F.), He.ti.a:t1U...6 zea (Boddie). In Diseases,
Pests and Weeds in Tropical crops. Verlag Paul Parey, Berlin, 482-
487.
DELATTRE R., 1973 - Eléments de base pour une lutte intégrée dans les cultures
cotonnières d'Afrique. FAO Conf. Ecol. in rel. Plant. Pest. Control
Rome, 16 1- 18 1.
DELPLANQUE A., GRUNER L., 1975 - The use Bac.-UtM :thLl..!ling~en6~ Berliner against
some Lepidoptera injurious to vegetable crops in the Antille.
Nouv. Agr. Antilles et Guyane, l, 71-82.
DESPORTES 1., 1976 - Ultrastructure de S:temp~a mu:tab~ Leger et Hess, Mi-
crosporidie parasite de l'héphèmère Epheme~ vutga:ta L. Protistolo-
gi ca 12 (1), 12 1- 15 a.
DESPORTES 1., THEODORIDES J., 1979 - Etude ultrastructurales d'Amp~ambly~ lau-
b~e~ n. ~p. (Microsporidie, Metchnikovellidae) parasite d'une Gréga-
rine (Lec.udina ~p.) d'un Echiurien Abyssal. Protistologica, 15 (4),
435-457.
DEVENDRA N.V., UMESH C.S., 1976 - Distribution and significance of acide phospha-
tase in the enteric epithelial cells of PMalel.ti.a alg.0'ta (Lepidoptera)
during metamorphosis. Zool. Jb., Abst. Anat. Ontog. Tiere, 95 (4),
511-518.

---

- 244 -
DIALLO B., 1978 - Etude de l'infection à Densovirus chez le Lépidoptère Spodop-
~~ litt~~~ Boisduval. Thèse de 3è Cycle, U.S.T.L., Montpellier
141 p.
DWYER D.M., WEIDNER E., 1973 - Microsporidian extrasporular microtubules. Ultra-
structure, isolation and electrophoretic characterisation. Z. Zell-
forch., 140, 177-186.
EWEN AL.B., MUKERJI M.K., 1980 - Evaluation of No~ema loeU6tae (Microsporida)
as a control agent of Grasshoper populations in Saskatchewan. J. In-
vert. Pathol., 35, 295-303.
EZENWA A.O., HOWLETT T., HEDGE K., 1974 - Microsporidian infection of S~uiium
damno~um in West Africa. J. Parasitol. 60 (6), 975.
FACON L.A., KANE W.K., ETZEL L.K., LEUTENEGGER R., 1967 - Isolation of granulo-
sis from the noctuid Hetio~ zea. J. Invert. Pathol., 9 (1), 134-
136.
FENWICK B., 1972 - Recherches ultrastructurales sur la schizogonie et la sporo-
gonie de quelques Microsporidies : essai d'application à la systéma-
tique des genres. Thèse de 3è Cycle, U.S.T.L., Montpellier, 74 p.
FISCHER F.M., SANBORN R.C., 1962 - Observations on the susceptibility of some
insects to Nosema (Microsporida, Sporozoa). J. Parasitol., 48, 226-
932.
FISCHER F.M., SAN BORN R.C., 1964 - Nosema as a source of juvenile hormone in
parasitized insects. Biol. Bull. 126 (2), 235-252.
FLETCHER R.K., 1933 - Experiments
in the control of corn earworm, Hetio~~
ob~oleta (Fabr.) with T~ehogkamma minutum Riley. J. Econ. Ent. 26,
Q7R-982.
--
FOTI N., SERtl~~~~u ~., CRISAN I., 1971 - Influence de la nosémose sur le taux
de protéines dans l'hémolymphe d'abeilles (Ap~ metei6~ea L.). Bull.
Apic. 14 (?)
177-18A.
FOURNIER D., ETIENNE J.,
1979 - Effet àu parasitisme par des Nosematidae sur la
reproduction de C~o ~aeeh~phagU6 (Boj.) (Lép., Pyralidae).
Commun;~~~inn personnelle, 1-17.
FOWLER J.L.,
REEVES E., 19lj - Microsporidan spore as revealed by scanning ~LC~
trnn microscopy. J. Invert. Pathol., 26, 1-6.
FOWLER J.L., REEVES E.L., 1975 - In vivo propagation of a microsporidan pathoge-
nic to insects. J. Invert. Pathol., 25 (3), 349-353.
FUKUDA T., LINDEREN J.E., CHAPMAN H.C., 1976 - Hetieo~po~~um ~p., a new para-
sitp. of mosquitoes. Mosquito News, 36 (4), 514-517.
,_..
- - - - - . -.. _-"
FUXA J.R., 1979 - Interaccions ot cne microsporidium V~o~pha_nec~with
a Bacterium, Virus and Fungus in Helio~~ zea. J. Invert. Pathol.
33, 316-323.
1978
Pers ;stence of V~o~pha nee~x on tohacco,
FUXA J.R., BROOKS W.M.,
-
~
cotton, and soybean foliage. J. Econ. Entomol. 17 (2), 169.".172.
FUXA J .R. , BROOKS W.M.,
1~79 a - Mass production and storage of V~o~pha ne-
e~x (Protozoa, Microsporida). J. Invert. Pathol., 33,86-94.
FUXA J .R., BROOKS W.M., 1979 b - Effects of V~mo~pha neeatnix in sprays and
corn mael on H~o~~ species in tobacco, soybeans and sorghum. J.
Econ. Entowol. 72 (2)- 462-467.

---

- 245 -
FRYE R.D., OLSON L.C., 1974 - Fecundity and survival in populations of the Euro-
pean corn borer infected with Pe~ez~a py~aU6t~. J. Invert. Pathol.,
24 (3), 378-379.
GABE M., 1968 - Techniques histologiques. Masson, Ed., Paris, 1113 p.
GAHUKAR R.T., MOREAU J.P., 1976 - Effet de l'élevage continu sur milieu artifi-
ciel sur la physiologie d'un Lépidoptère O~t~~a nub~~ Hübner.
C.R. Acad. Sei. D, 282 (2), 203-205.
GARDNER W.A., SUTTON R.M., NOBLET R., 1977 - Persistence of Beauv~a b~~~~ana,
Nom~ea ~ey~, and No~ema nee~x on soybean foliage. Environmental
Entomology 6 (5), 616-618.
GASC C., LOUBES C., MAURAND J., BOUIX G., 1976 - Sur une nouvelle espèce de Mi-
crosporidie, parasite de Myriapodes Diplopodes du Sud-Dahomey. Acta
Tropica, 33 (2), 169-176.
GASSOUMA M.S.S., ELLIS D.S., 1973 - The ultrastructure of sporogonic stages of
Theioh~ and P~topho~ (Microsporida : Nosematidae) from ~~um
o~atum Larvae. J. Gen. Microbiol., 74, 33-43.
GAUGLER R.R., BROOKS W.M., 1975 - Sublethal effects of infection by No~ema h~o­
t~di6 in the corn earworm, Heiiot~ zea. J. Inverteb. Pathol. 26
(1), 57-63.
GBENOU A.G., 1977 - Elevage sur milieu artificiel d'un ravageur du cotonnier:
Heiiot~ ~9~ Hübner (Lep. Noctuidae). Elevage des principaux
ravageurs du cotonnier en Afrique ; leur incidence éventuelle sur les
autres cultures. Mémoire D.A.A., E.N.S.H. Montpellier, 27 p.
GEORGE C.R., 1971 - The effects of malnutrition on growth and mortality of the
red rust flour beetle T~boiium e~taneum (Coleoptera : Tenebrionidae)
parasitized by No~ema W~~ (Microsporidia : Nosematidae). J. Invert.
Pathol., 18, 383-388.
GEORGE C.R., TOWNES S., 1976 - The effects of No~ema w~~ on molting in T~­
boiium e~taneum. J. Stored Prod. Res., ]2 (9), 199-200.
GERBER G.H., 1975 - Occurence of a Microsporidian infection in the red turnip
beetle, Entomo~e~ am~eana (Coleoptera : Chrysomelidae). Cano
Entomol., 107 (10), 1081-1082.
GILLIAM M., SHIMANUKI H., 1967 - In vitro phogocyst0~~~ ~f No~ema ap~ spores by
Honey-bee hemocytes. J. Invert. Pathol., 9, 387-389.
GIRET M., COUILLOUD R., 1978 - Heiiot~ ~9~a Hübn. (Noctuidae). Améliora-
tions possibles dans la conduite de l'élevage. Note n° 7. Laboratoire
de Nutrition et d'Elevage d'Insectes, GERDAT, Montpellier, 19 p.
GOCHNAUER T.A., MARGETTS V.J., 1980 - A rapid method for concentrating No~ema
a~ spores. J. Invert. Pathol. 36, 278-280.
GRAHAM H.M., HERNANDEZ N.S.Jr, LLANES J.R., 1972 - The role of host plants in
the dynamic of populations of Heiiot~ ~p. Env. Entomol. 1 (4),
424-431.
GREMY F., SALMON D., 1969 - Bases statistiques pour la recherche médicale et
biologique. Dunod, Paris, 412 p.
GRY J. (communication personnelle). Détermination des
doses létales, 81-142.
GUENNELON G., SORIA F., 1973 - Mise au point au laboratoire d'un élevage permanent
de la pyrale du riz, ch~to ~upp~~~~ Walker (Lépidoptera - Pyralida)
sur milieu artificiel. Ann. Zool. Ecol. Animale 5 (4), 547-558.

---

- 246 -
GUERRA A.A., WOLFEN BARGER D.A., 1972 - Factors affecting reproduction of the
tobacco budworm in the laboratory. J. Econ. Entomol. 65 (5), 1341-
1343.
HAL~ I.M., OLIVER E.H.A., GIVEN B.P., 1977 - No~~a eo~t~ytnae n. ~p., a Mi-
crosporidian parasite of larvae Co~t~y~ zealan~ea (Coleoptera
Scarabaeidae) in New Zealand. New Zealand J. Zool., (4) l, 1-3.
HALL I.M., OLIVER E.H.A., GIVIEN B.B., 1976 - No~~a takapane~~ n. ~p. a
Microsporidan parasite of larvae of Co~t~y~ zealan~ea (Coleop-
tera : Scarabaeidae) in New
Zealand.
New Zealand Journ. Zool. 3 (3), 257-260.
HAMM J.J., YOUNG J.R., 1974 - Mode of transmission of nuclear-polyhedrosis vi-
rus to progeny of adult Hetiot~ zea. J. Invert. Pathol. 24 (1),
70-81.
HARDWICK D.F., 1965 - The corn earworm complexe Memoirs of the Entomol. of Ca-
nada, 40, 247 p.
,
HARPAZ 1., ZLOTKIN E., 1965 - A nuclear-polyhedrosis virus of the safflower leaf-
worm Heti ot~ pe ltig~ Schiff. (Lep., Noctuidae). Ann. Soc. En-
tomol. France, 1 (4), 963-972.
HARPER J.D., 1976 - Major developmental and applied program fro microbial control
of Invertebrate in the United States. In Proc. Ist Intern. Coll.
Invert. Pathol. & IXth An. Meet. Soc. Invert. Pathol., Queen's Univ.
Kingston, Canada, 69-73.
HARTWING A., PRZELECKA A., 1971 - Nucleic acids in intestine of Ap~ metti6~ea
infected with No~ema ap~ and treated with fumagillin DCH : cyto-
chemical and autoradiographie studies. J. Invert. Pathol., 18, 331-
336.
HARVEY G.T., GAUDET P.M., 1977 - The effects of Benomyl on the incidence of
Microsporida and the developmental performance of eastern spruce
budworm (Lepideptera
tertricidae). The Canadian Entomologist, 109,
987-993.
HAZARD E.I., LOFGREN C.S., 1971 - Tissu specificity and systematics of a No~ema
in some species of Aedeô, Anoph~eô, and Culex. J. Inv~. Pathol.,
18 (l), 16-24.
HAZARD E.I., OLDACRE S.W., 1976 - Revision of Microsporida (Protozoa) close
to Theloh~a, with description of one new family, eight new genera,
and thirteen new species. Techn. Bull. Agricul. Res. SerVe U.S.A.
dept. Agricult., 1530, 104 p.
HAZARD E.I., CHAPMAN H.C., 1977 - Microsporidian pathogen of Culicidae (Mos-
quitos). Bull. World Health Orge 55 (sup. 1), 63-67.
HELMS T.J., WEDBERG J.L., 1976 - Effects of BaUllU6 thwUn.9~eM~ on NMema
infected midgut epithelium of Loxa9~o~ alb~eo~ta (Lepidoptera :
Noctuidae). J. Invert. Pathol. 28 (3), 383-384.
HENRY J.E., 1976 - No~ema a~dophagU6 ~p. n., Microsporidian isolated from
Grasshoppers. J. Invert. Pathol. 9, 331-341.
HENRY J.E., 1971 - No~ema euneatum ~p. n. (Microsporida, Nosematidae) in grass-
hoppers (Orthoptera : Acrididae). J. Invert. Pathol. 17, 164-171.
HENRY J.E., 1971 - Experimental application of No~~a loeU6tae for control of
grasshoppers. J. Invert. Pathol. 18, 389-394.

---

- 247 -
HENRY J.E., 1972 - Epizootiology of infection by No~ema toeU6tae Canning
(Microsporida : Nosematidae) in grasshoppers. Acrida, 1 (2),
111-120.
HENRY J.E., 1978 - Microbial control of grasshoppers with No~ema toeU6tae.
In Miscell. Public. Entomol. Soc. Amer. Il (1),85-89.
HENRY J.E., OMA E.A., 1974 - Effects of infections by No~ema toeU6tae Canning
No~ema a~dophagU6 Henry and No~ema euneatum (Microsporida : Nose-
matidae) in MelanOptU6 b~V~U6
(Say) (Orthoptera : Acrididae).
Acrida 3 (4),
223-231.
HENRY J.E., OMA E.A., ONSAGER J.A., OLDACRE S.W., 1979 - Infection of the corn
earworm He~o~ zea, with No~ema a~dophagU6 and No~ema eunea-
tum from grasshoppers : relative virulence and production of spores.
J. Invert. Pathol. 34, 125-]32.
HILL D.S., 1975 - Agricultural Insect pests of the tropics and their control
Cambridge University Press 515 p.
HILL R.E., GARY W.J., 1979 - Effect of the Microsporidium, No~ema PYkaU6ta, on
field populations of european corn borers in Nebraska. Envir. Ento-
mo 1. 8 (1), 9 1-95 .
HOSTOUNSKY Z., 1970 - No~ema m~~ (Paill.), a Microsporidan of the Cabba-
geworm, P~~ b~~~eae (L.), in the parasites Apantel~ gtome-
~U6 (L.), Hypo~oteJt ebe.rUnU6 (Grav.) and P~mpila ~nI.J:ÜgatoJt (F.).
Acta Entomol. bohemosl. 65, 1-5.
HOSTOUNSKY Z., 1978 a - The rate of germination of spores of Nb~ema pto~ae
after peroraI administration to Mam~tJta b~~~ae L. caterpillars.
J. Protozool. 24 (2), suppl. 15 A.
HOSTOUNSKY Z., 1978 b - Successful transmission and multiplication of Micros-
poridians from Coleoptera on a substitute Lepidoptera hosto J.
Protozool. 25 (3), 37 A, na 110.
HOSTOUNSKY Z., 1978 c - A new method for purification of Microsporidian spores.
J. Protozoo1. 25 (3), 37 A, na 109.
HOSTOUNSKY Z., WEISER J., 1972 - Production of spores of No~ema pto~ae Kellen
and Lindergren in Mam~tJta b~~~eae L. after different infective
dosage 1. Vest. Ceskosl. Spol. Zool. 36 (2),97-100.
HOSTOUNSKY Z., WEISER J., 1973 - No~ema g~tJto~deae ~p. n. (Nosematidae '- Mi-
crosporidia) infecting G~tJto~dea potygo~ and Lep~ot~a deeem-
~eata (Coleoptera, Chrysomelidae). Acta Entomol. Bohemoslov. 70
(5), 345-350.
HOSTOUNSKY Z., WEISER J., 1975 - No~ema potygltammae ~p. n. and PwtophoJta M-
de~ ~p. n. (Microsporidia, Nosematidae) infecting Potygltamma ~n­
de~neata (Coleoptera : Chrysomelidae) in Cuba. Vest. Cs sopol.
zool 39 (2), 104-110.
HOSTOUNSKY Z., WEISER J., 1978 - Pt~tophoka gJto~~a ~p. n. (Pleistophoridae,
Microsporida) parasite of Chrysomelid beetles in Yougoslavia. Vest.
Ceskos1. Spo1. Zoo1. 42 (2) 112-114.
HRYNIEWIECKA-SZYFTER Z., BANASZA K., 1975 - Histological investigation of the
midgut of bees infected with spores of No~ema ap~ Zander by indi-
vidual and mass feeding. Bull. Soc. Amis Sci. Lettres Pozman, 15,
83-86.

---

".'"
- 248 -
HSLAO T.H., HSIAO C., 1973 - Benomyl : a novel drug for controlling a Micros-
poridian disease of the Alfalfa weevil. 1. Invert. Pathol. 23,
303-304.
HUGER A., 1960 - Untersuchungen zur patologie einer Mikrosporidiose von Ag~~
6egetum (Schiff.) (Lepidopt. Noctuidae), verursacht durch No~ema
p~~zo~d~ nov. ~pec. z. Pflanzenkr. 67, 65-77.
HUSSEY K.L., 1973 - Effects of Microsporidian infection on larval Trematode
infections with No~ema ~~geo~deae or N. echino~~o~. J. Invert.
Patho1. 22 (2), 193-198.
HYSLOP J.A., 1927 - A monthly survey report forme J. Econ. Ent. 20, 717-725.
IGNOFFO C.M., 1966 a - Effects of age on mortality of H~o~ zea and Hetio-
~~ v~~ce~ larvae exposed to a nuclear polyhedrosis virus. J.
Invert. Pathol. 8, 290-292.
IGNOFFO C.M., 1966 b - Susceptibility of the first-instar-of the bollworm, He-
Uo~ zea, and the tobacco budworm, Hilio~ v~~ce~, to nu-
clear-polyhedrosis virus. J. Invert. Pathol. 8, 531-536.
ISHlHARA R., 1969 - The life cycle of No~ema bomby~ as revealed in tissue
culture cells of Bomby~ mo~. J. Invert. Pathol. 14, 316-320.
ISSI T.V., 1965 - Changes in the normal growth and development of caterpillars
experimentally infected with microsporidian. Proc. 2nd Int. Conf.
Protozool., London, 207.
ISSI T.V., TKACH M.T., 1975 - 0 massovom zarazhemii mikrosporidiyami No~ema
hy~e~ae ~p. n. Leningradskoi populyatsii kartofel'noi sovki
Hy~e~a ~cacea Esp. (Noctuidae). Trudy V.I.Z.R., 42, 70-78.
JACOB A., SUBRAMANIANT T.R., 1972 - Nuclear polyhedrosis on some Lepidoptera.
Curr. Sci. 41 (14), 536.
JACOBS F.J., KELLNER N., VAN DER VORST E., 1978 - Development, diagnosis and
control of No~err.a. disease in honeybees (Ap~ me1.U6eca L.). Vlaams
Diergeneesk Tijds., 47 (3),242-251.
JACQUES R.P., 1977 - Field effacity of viruses infections to the cabbage looper
and imported.cabbagewormon latecabbage. J.Econ. Entomol. 70 (1)
111-118.
JACQUES R.P., FOX C.J.S., 1960 - The influence stickers on the effectiveness
of sprays of Bacil1.uo ~hwUngùYL6~ ValL. ~wUngÙ.nM Berliner and
Bacil1.uo en;tomo~ci.tul ValL. en:tomo~ci.tul Heimpel and Angus. J. Insect.
Patho1., 2, 17-23.
JASIC J., BIROVA H., 1958 - Die Fruchthartkeit des weissen Barenspinners
(Hyphanttia cunea Drury) und ibre Bestimmung. 1. Biologia 13,
793-809.
JONES R.L., LEWIS W.J., 1971 - Physiology of the host-parasite relationship
between H~o~ zea and M.i.~p~ ~c~p~. J. Insect. Phy-
s io 1. 17 (5), 921-927.
KAHN M.A.A.,
VINSON S.B., MITLIN N., 1976 - Effect of the parasitoid CaJL~O-­
chit~ n~g~cep6, on the nitrogen excretion of its hosts, H~o­
~hAA v~e~ce~. J. Insect. Patho1. 22 (1),51-56.
KALAVATI C., 1976 - Four new species of Microsporidians from Termites. Acta
Protozool 15 (4),411-422.

---

- 249 -
KALAVATI C., 1977 - Effect of temperature on the viability of spores of
ThetohaYLi.a. oJtc.heJ.dJJ. and P!Ù<JtopholUl ganapa.t,ü.. Acta Protozooi.
16 (l), 37-42.
KALAVATI C., NARASIMHAMURTI C.C., 1976 a - A Microsporidian parasite ~Ub04Cq~
coptoteJtm,{. bp. 11., from the gut of CoptotVtmeA heA..m-i.. (Wasm.). J.
Parasitoi. 62 (2),323-324.
KALAVATI C., NARASIMHAMURTI C.C., 1976 b - A new Microsporidian P!wtophoJu:l
eJteteA~ n. ~p. from EJteteA 4~cticU6 (L.) (Dystiscidae, Coléopte-
ra). Acta Protozooi. 15 (2), 139-142.
KANG Y.B., KIM O.S., JANG D.H., 1976 - Experimental studies on the pathogeni-
city and deveIopmental stages of N04eJna. a.pi...6 Zander, 1909. Korean
J. veter. Res. 16 (l), 11-25.
KAYA R.K., 1973 ':'" Pathogenicity of. P.i.W:tophoJut 4c.hubeJtg~ to Iarvae of the
orange~.triped,.aakwo.rmand others<:lepidopterus,.. inseats. J.,.IB17ert.
Pathol., 22, 356-358.
KAYA R.K., 1975 - Persistence of spores of P!WtopholUl 4c.hubeJtg~ (Cnidospora
Microsporida) in field, and their application in microbial control.
J. Invert. Pathol. 26, 329-332.
KAYA H.K., 1977 - Survival of spores of Va.iJrJ..moJtpho. (= N.) ne.e.a-tlLi.x (Microspo-
rida: Nosematidae) exposed te sunlight, ultravioletradiation, and
temperature. J. Invert. Pathel. 30, 192-198.
KELLEN W.R., HOFFMANN D.F., COLLIER S.S., 1977 - Studies on the biology and
ultrastrueture of NOaema tkan4~~e. 4P. n. (Microsporida : Nose-
matidae) in the navel orangeworm., PaJtD.mlJùo~ :tJta.n4~e1.1.a (Lepidop-
tera : Pyrallidae). J. Invert. Pathol. 29, 289-296.
KELLEN W. R., LINDEGREN J.E., 1968 - Bio logy of N04e.ma. p!ocU.a.e. 4P. n., a Mi-
crosporidian pathogeny of the indian meai moth, ptocUa. .&LtVlpW1.C-
te1.1.a (Hübner) (Lepidoptera : Phycitidae). J. Invert. Pathol. Il,
104-111.
KELLEN W.R .., LINDEGREN J.E., 1969 - Host-pathogen relationship of two previous-
ly uadescribed Microsporida from the indian meai math Ptodi4 ~nteJt­
pWtcteil.a.(Lepid~ptera : Phyeitiàae). J. lllvert. Pathol. Il, 104-
Il I.
KELLEN W.R., LINDEGREN J.E., 1971 - Modes of transmission of N04ema. p!odi4e.
(Kellen and Lindegren) a pathogen of P!ocUa. .&LteJtpu.ncte1.1.a (Hübner).
J. Stor. Prod. Res. 7 (1), 31-34.
KELLEN W.R., LINDEGREN J.E., 1973 a - Transovarian transmission of N04eJna.
p!ocUa.e. in the indian-meal math P!ocUa. ~e.JtpW1.ctet!a.. J. Invert.
Pathol. 21, 248-254.
KELLEN W.R., LINDEGREN J.E., 1973 b - N04eJna. ~v~de.n4 4P. n. (Microsporida -
Nosematidae) a pathogen causing inflammatory response in Lepidopte-
ra. J. Invert. Pathol. 21, 293-300.
KELLEN W.R., SABINA R., 1974 - Comparative virulence of N04e.ma. p!ocUa.e. in the
indian meal moth, P!ocUa. ~eJtpunctuet!a..
J. Invert. Pathol., 23,
242-245.
KHARAZI-PAKDEL A., 1968 - Recherches sur la pathogenie de N04ema. me.!o!ontha.e
Krieg. Entomophaga 13 (14), 289-317.
KHARAZI-PAKDEL A., AMARGIER A., 1973 - La pathogenèse des infections simulta-
nées à Ad~a. meto!ontha.e. et à N04eJna. meto!ontha.e. chez Meto!ontha.
meto!ontha.. Entomophaga 18 (3), 229-235.
KNELL J.O., ALLEN G.E., 'HAZARD E.I., r971 - Light-and'electron'microscope
study of ThelDhania. ~o!e.nop~a.e. n. ~p. (Microsporida : Protozoa) in

---

- 250 -
the red imported fire ant, Sotenop~~ ~v~eta. J. Invert. Pathol.
29, 19~-200.
KRAMER J.P., 1959 - On No~ema h~othi~ Lutz et Splendor, a Microsporidan
parasite of H~ot~ zea (Boddie) and He~t~ v~~ee~ (Fabri-
cius) (Lepidoptera, Phalaenidae). J. Insect. Pathol. 1,297-303.
KRAMER J.P., 1965 - No.oema neea.tJU.x. .op. n., Thetoh~a cUa.zoma ~p. n., Micros-
Q.,
poridians from the armyworm P~eudat~a ~puneta (Harworth). J.
Invert. Pathol. 7, 117-121.
KRAMER J.P., 1966 - On the octosporeosis of the muscoid flies caused by Oeto-
~po~ea m~eaedom~~ea~ Flu (Microsporida). The Amer. Midl. Natur.
75 (1), 214-220.
KRAMER J.P., 1971 - Longevity of Microsporidian spores with special reference
to Oeto~po~ea m~eaedom~~eae Flu. Acta Protozool. 8 (17),217-
224.
KRAMER J.P., 1973 - Susceptibility of sixteen species of muscoid flies to the
Microsporidian parasite Oeto.opo~ea m~eaedom~~eae. J. New York
Entomol. Soc. 81 (1) 50-53.
KRAMER J.P., 1976 - The extra-corporeal ecology of Microsparidian. In Compa-
rative Pathobiology, vol. l, Biology of the Microsporidia, Plenum
Press, N. Y., 127-135.
KRINSKY W.L., 1977 - No~ema pank~ ~p. n., a new Microsporidian from the ar-
gasid tick, O~hodo~~ pank~ Cooley. J. Protozool. 24 (1), 52-
56.
KRINSKY W.L.,HAYES S.F., 1978 - Fine structure of the sporogonie stages of
No~ema p~~~. J. Protozool. 25 (2), 177-186.
KUCERA M., 1976 - Further studies on enzymes of B ~ b~a6~~eae larvae (Le-
pidoptera) infected by a Microsporidian No~ema het~o~po~. Acta
Entomol. Bohemoslov. 73 (6),367-372.
KUCERA M., WEISER J., 1973 a - Alamine aminotransferase, alkaline phosphatase
and protease activity in B~a b~~~eae during microsporidian
infection. J. Invert. Pathol. 21, 121-122.
KUCERA M., WEISER J., 1973 b - Alamine aminotransferase in the three last ins-
tars of B~ b~~~eae infected by N. pto~ae. J. Invert. Pa-
thol. 21, 287-292.
KUCERA M., WEISER J., 1975 - Lactate dehydrogenase Isoenzyme in the larvae of
B~~ b~a6~~eae and Gatte~a metionetia during Microsporidian
infection. J. Invert. Pathol. 25, 109-114.
KUDO R., 1924 - A biologie and taxonomie study of the Microsporida. Illinois
Biological Monographs, 9, 268 p.
KURTTI T.J., BROOKS M.A., 1977 - The rate of development of a Microsporidan
in the moth cell culture. J. Invert. Pathol. 29, 126-132.
LAMOTTE M., 1962 - Initiation aux méthodes statistiques en Biologie animale.
Masson et Cie ed., Paris, 144 p.
LARRlMER W.A., 1935 - Corn earworm not controled in sweet corn by release of
Trichrogramma. J. Econ. Entomol. 28, 815-816.
LARSSON R., 1979 - Transmission of No~ema me~~ (Paillot) (Microsporida,
Nosematidae) a Microsporidian parasite of p~~ b~a6~~eae L.
(Lepidoptera, Pieridae) and its parasite Apantet~ gtom~~ L.
(Hymenoptera, Braconidae). 2001. Anz. Jena, 203 (3-4), S., 151-
157.

---

- 251 -
LARSSON R., 1980 - Insect pathological investigations on Swedish Tysanura. II.
A new Microsporidian parasite of Pe~b~ b~ev~ty~ Microcory-
phia, Machilidae) ; description of the species and creation of two
new genera and new family. Protistologica 16 (1),85-101.
LASGOUTTES F., 1976 - Etude de l'influence du parasitisme sur la flore bacté-
rienne et les enzymes digestifs des Brachyoures (Crustacés, Decapo-
des) D.E.A., U.S.T.L. Montpellier, 34 p.
LEHNERT T., SHlMANUKI N., 1979 - Population change and Nosema spore levels in
colonies started with package bees. Apidologie, 10 (1), 17-21.
LEWIS L.C., 1978 - Migration of O~~a nubit~ (Lepidoptera : Pyralidae)
infected with No~ema PY~U6ta (Microsporida : Nosematidae) and sub-
sequent dissemination of this Microsporidium. The Canadian Entomo-
logist 110 (9), 897-900.
LEWIS L.C., LYNCH R.E., 1978 - Foliar application of No~ema py~ta for sup-
pression of populations of European corn borer. Entomophaga, 23 (1)
83-88.
LEWIS L.C., GUNNARSON D.R., 1979 - Response of O~tninia nub~ to the Micros
poridium V~o~pha necatkix. Proc. Intern. Coll. Invert. Pathol.
and Xlth Ann. Meet. Soc. Invert. Pathol. Prague, 109-110.
LEWIS W.J., VINSON S.B., 1971 - Suitability of certain Helio~ (Lepidoptera
Noctuidae) as hosts for the parasite CaA~O~~ ni9~Qep~. Ann.
Entomol. Soc. Amer. 64 (4),970-972.
LIPPA J.J., 1966 - Miscellaneous observations on protozoan infections of Nepa
cin~ Linneaus including descriptions of two previously unknown
species of microsporidia, No~ema b~tov~~~anae n. ~p. and Theloha-
nia nepae n. ~p. J. Invert. Pathol. 8, 158-166.
LIPA J.J., 1968 a - Histopathological studies on simultaneous infections cau-
sed by Microsporidian and cytoplasmic and nuclear polyhedrosis Vi-
ruses in H~t~ zea (Boddie) (Lepidoptera - Noctuidae). Polskie
Pismo Entomol. 38, 611-616.
LIPA J.J., 1968 b - Pt~topho~geo~p~na ~p. n., a Microsporidian parasite
of dung beetles Geotkup~ ~pp CColeoptera, Scarahaeidae). Acta
Protozoologica 6 (29), 341-344.
LIPA J.J., 1968 c - Some observations on No~ema heliot~~ Lutz and Splendore,
a Microsporidian parasite of Helio~ zea ~ Boddie) (Lepidoptera,
Noctuidae). Acta Protozool. 6 (23), 273-278.
LIPA J.J., 1977 a - No~ema po~phy~niae n. ~p., a new Microsporidian parasite
of Po~phy~~ am~~na Eversman (Lepidoptera, Noctuidae). Acta pro-
tozoologica 16 (2), 131-134.
LIPA J.J., 1977 b - Infection of NotoQellia uddmanniana L. (Lepidoptera : Tor-
tricidae) by the Microsporidian No~ema ~poQap~ae Paillot. Acta
Protozool. 16 (2),201-205.
LIPA J.J., 1977 c - Microsporidian infections of Galte~ meltonetla (L.)
(Lepidoptera, Galleriidae) with the description of a new species
No~ema 9alt~ae. Acta Protozool. 16 (2), 141-149.
LIPA J.J., 1977 d - No~ema py~hoQo~~ n.~p., a new Microsporidian parasite
of red soldier bug (pY~OQO~ apt~ L.) (Heteroptera, Pyrrhoco-
ridae). Acta Protozool., 16 (2), 135-140.

---

- 252 -
LIPA J.J., 1977 e - Thelohania o~~~ae n.~p., a new Microsporidian parasite
of the european corn borer O~~~a nub~~ Hbn (Lepidoptera,
Pyralidae). Acta Protozool. 16 (2), 151-156.
LIPA J.J., 1979 - No~ema p~~omae ~p.n. a new Microsporidian parasite of the
variegated cutworm Pe~~oma ~aueia (Hbn) (Lepidoptera, Noctuidae).
Acta Protozool., 18 (3),461-464.
LIPA J.J., MADZIARA-BORUSIEWICZ K., 1976 - Microsporidians parasiting the green
To~x (To~x v~dana L.) in Poland and their role in the col-
lapse of Tortrix outbreak in Puszcza Niepolomicka during 1970-1974.
Acta Protozool. 15 (5), 529-536.
LIU T.P., 1973 - Effects of fumidil B on the spores of No~ema ap~ on lipids
of the Host cell as revealed by freeze-etching. J. Invert. Pathol.
22, 364-368.
LIU H.J., MCEWEN F.L., 1977 - No~ema b~~i ~p.n. (Microsporida : Nosematidae)
a pathogen of the chinch bug, B~~~ teuQopt~~ hint~ (Hemipte-
ra : Lygaeidae). J. Invert. Pathol., 29, 141-146.
LOUBES C., 1979 a - Recherches sur la méiose chez les Microsporidies : consé-
quences sur les cycles biologiques. J. Protozool. 26 (2),200-208.
LOUBES C., 1979 b - Ultrastructure, sexualité, dimorphisme sporogonique des
Microsporidies (Protozooaires). Incidences taxonomiques et biologi-
ques. Thèse d'Etat, U.T.S.L., Montpellier, 86 p.
LOUBES C., MAURAND J., 1975 - Etude ultrastructurale de Gunteya Q~onomi pa-
rasite des larves d'O~hoQtadi~ (Diptera - Chironomidae). Protis-
tologica, Il (2), 233-244.
LOUBES C., AKBARIEH M., 1978 - Etude ultrastructurale de la Microsporidie Ba-
Qutea daph~ae n.g., n.~p. parasite de l'épithélium intestinal de
Vaph~a putex Leydig, 1860 (Crustacé, Cladocère). Protistologica
14, 23-38.
LOUBES C., AKBARIEH M., 1977 - Etude ultrastructurale de No~ematoide6 6~O
Qephati n.~p. (Microsporidie) parasite intestinal de la Daphnie
SimoQephat~ vetut~ Muller, 1776, Z. Parasitenk. 54, 125-137.
LOUBES C., MAURAND J., 1976 - Etude ultrastructurale de Pt~tophoka debai-
~ieuxi Jirovec (Microsporida) : son transfert dans le genre Tuzetia
Maurand, Fize, Michel et Fenwick, 1971 et remarque sur la structure
et la genèse du filament polaire. Protistologica 12, 577-591.
LOUBES C., MAURAND J., GASC C., BOUIX G., 1976 - Cycle de développement et ul-
trastructure de Gtugea hab~ode6mi n.~p., Microsporidie parasite de
Polydesmidae (Myriapoda, Diplopoda). Acta Tropica 33 (3),246-253.
LOUBES C., MAURAND J., GASC C., BOUIX G., 1976 b - Etude ultrastructurale de
Gtugea hab~de6mi n.~p. (Microsporida, Glugeidae) parasite des My-
riapodes Hab~ode6m~ 6atx Cook et Oxyde6m~ g~uto~~ Palisot de
Beauvois (Myriapoda - Polydesmidae). Protistologica, 12 (3), 435-450.
LOUBES C., MAURAND J., COMPS M., CAMPILLO A., 1977 - Observations ultrastruc-
turales sur Ame60n n~o~ (Sprague, 1950), Microsporidie parasite
de crevetteP~penae~ tong~~~ Lucas. Conséquences taxonomiques.
Rev. Trav. Inst. Pêches marit. 41 (3),217-222.

---

- 253 -
LUBLINKHOF J., LEWIS L.C., 1980 - Virulence of No~ema PYkaUAta to the euro-
pean corn borer when used in combination with insecticide. Envir.
Entomol., 9 (1),67-71.
LUTZ A., SPLENDORE A., 1904 - Uber Pebrine und Verwandte Mikrosporidien. Nach-
tag zur ersten Mitteilung. Zentr. Bacteriol. Parasitenk., abt. 1
Orig.36, 645-650.
LYNCH R.E., LEWIS L.C., 1976 - Influence on the european corn borer of No~ema
PY~U6ta and resistance in maize to sheath-collar feeding. Envir.
entomol., 5 (1), 143-146.
LYNCH D.C., VINSON S.B., 1977 - Effects of temperature, host, age, and hormo-
nes upon the encapsulation of Can~oQhit~ ~g~Qep~ eggs by He-
lio~ ~pp. J. Invert. Pathol., 29, 50-55.
MADDOX J.V., SPENVEL R.K., 1978 - Some enigmatic Microsporida of the genus
No~ema. In Miscel. Public. Entomol. Soc. Amer., II (1), 65-84.
MANJUNATH T.M., PATEL R.C., YADAV D.N., 1976 - Observations on He!io~ pet-
~ge~ (Schiff) (Lep. Noctuidae) and its natural enemis in Amand
(Gujarat State, India). Proc. Indian Acad. Sei., B, 83 (2),55-65.
MARCOVITCH S., STANLEY W.W., 1941 - The tomato fruitworm in Tennesse. Tennes-
see Agr. Exp. Sta. Bull., 174.
MARTOJA R., MARTOJA-PIERSON M., 1967 - Initiation aux techniques de l'histolo-
gie animal~. Masson et Cie Edit., Paris, 345 p.
MARTHUR K.C., 1967 - Notes on Banchop~~ ~6~Qo~ Cameron (Hym. : Ichneumo-
nidae) an internal larval parasite of He!io~ aromig~ (Hübner)
in InHia. Curr. Sei., India, 36 (13),356-357.
MAURAND J., 1973 - Recherches biologiques sur les Microsporidies des larves
de Simulies. Thèse d'Etat, D.S.T.L., Montpellier, 199 p.
MAURAND J., 1975 - Les Microsporidies des larves de Simulies : systématique,
données cytochimiques, pathologiques et écologiques. Ann. Parasitol.
Hum. Comp. 50 (4), 371-]96.
MAURAND J., BOUIX G., 1969 - Mise en évidence d'un phénomène sécrétoire dans
le cycle de Theloha~ 6~b~ (Strickland, 1913) Microsporidie
parasite des larves de S~~um. C.R.Acad. Sei., 269, 2216-2218.
MAURAND J., FIZE A., FENWICK B., MICHEL R., 1971 - Etude au microscope élec-
tronique de No~ema ~6~um Kudo, 1921, Microsporidie parasite d'un
Copépode cyclopoide ; création du genre nouveau Tuz~ à propos
de cette espèce. Protistologica 7 (2),221-225.
MCLEOD P.J., YEARIAN W.C., YOUNG III S.Y., 1977 - Inactivation of BaQulov~
he~ot~ by ultraviolet irradiation, dew, and temperature. J.
Invert. Pathol., 30, 237-241.
MENEPACE D.M., SACKET R.R., WILSON W.T., 1978 - Adult honey bees are not sus-
ceptible to infection by No~ema tOQU6tae. J. Econ. Entomol. 71 (2)
304-306.
METSPALU L., 1976 - On the effect of Microsporidiosis on hibernating pupae of
Noctuidae. Izvest. Akad. Nauk. eston. S.S.R., Biol., 25 (1), 13-19.
MEYNADIER G., AMARGIER A., GENTY Ph., 1977 - Une virose de type densonucléose
chez le Lépidoptère Sib~e 6U6ca Stoll. Oleagineux 32, 703-706.
MICHEL B., 1979 - HetiQove~pa (H~o~1 ~ige~ (Hb, 1808) (Lep. Noctuidae)
Etude de l'accouplement en élevage et infestations expérimentales.
Rapport D.E.A., D.S.T.L., Montpellier 54 p.
MILNER R.J., 1972 - No~ema whit~ a Microsporidan pathogen of source species
of Tribolium. l - Morphology, life cycle and regeneration time
II - Ultrastructure ; III - Effect on T. ~taneum. J. Invert. Pa-
Thol., 19, 23]-255.

---

- 254 -
MILNER R.J., 1977 - The role of disease during an outbreak of Oneop~ albo-
guttata Tindale and O. kU60bnunnea Tindale (Lepidoptera : Hepiali-
dae) in the Ebor/Dorrigo region of N.S.W. J. Aust. Entomol. Soc.,
16,21-26.
MILNER R.J., BEATON C.D., 1977 - Pt~~ophona oneopenae ~p.n. (Protozoa :
Microsporida) from Oneopenea alboguttata (Lepidoptera : Hepialidae)
in Australia. J. Invert. Pathol., 29 (2), 133-140.
MOFFETT J.O., LAWSON F.A., 1975 - Effect of No~ema infection on 02 consumption
by honey bees. J. Econ. Entomol. 68 (5),627-629.
MOHAMED A.K.A., SIKOROWSKI P.P., BELL J.V., 1977 - Susceptibility of H~~~
zea tanvae ~o Nomunaea netey~ at various temperature. J. Invert.
Pathol. 30, 414-417.
MUSSGNUNG G.L., HENRY J.E., 1979 - Compatibility of malathion and No~ema toeuo-
tae Canning in Metanop~ ~angui~p~ (F.). Acrida 8, 77-81.
NETILES W.C., BURKS M.L., 1975 - A substance from HeLi.oth.A.-6 v-Ut.~eeM larvae
stimulation larviposition by females of tachinid, An~hy~~ manmo -
/ta;t/lA
1.
Insect. Phvsiol. 21 (5), 965-978.
NORDIN G.L., 1974 - Pathogens of Malaeo~oma ame~eanum in Kentucky (Lepidopte-
ra : Lasiocampidae). J. Kansas Entomol. Soc., 47 (2),249-253.
NORDIN G.L., 1975 -:r.r~?-sovarial transmission of No~ema ~p. infecting Malaeo-
~oma am~eanum. J. Invert. Pathol., 25, 221-228.
NORDIN G.L., 197? - Influence of natural No~ema ~p. infections on field po-
pulat~ons of Mataeo~oma am~eanum (Lepidoptera : Lasiocampidae).
J. Kansas Entomol. Soc., 49 (1), 32-40.
NORDIN G.L., 1981 - Dictary effects of methoprene on V~onpha nee~x spo-
re yield in HeP~o~~ v~~eeM. J. Invert. Pathol., 37, 110-112.
NORDIN G.L., MADDOX J.V., 1972 - Etrec~s or simultaneous vir~s ana M~CLUO~U­
ridian infections of larvae of Hyph~a eunea. J. Invert. Pathol.
20 ~ 1), 66-6~~_
NORDIN G.L., MADDOX J.V., 1974 - Microsporida on the fall webworm, Hyp~a
eunea. 1. Identification, distribution and comparaison of No~ema
~p., with similar No~ema ~pp. from other Lepidoptera. J. Invert.
Pathol. 24, 1-13.
NORTON W.N., VINSON S.B., 1977 - Encapsulation of a parasitoid egg within its
habitual host : an ultrastructural investigation. J. Invert. Pa-
thol. 30, 55-67.
OATMAN E.R., 1978 - Noctuidae. In Introduced Parasites and Predators of Ar-
thropod pests and weeds : a world review. Agriculture Hand-Book
n° 480. U:S. Dept. Agric. Washington, 205-210.
OATMAN E.R., PLATNER G.R., 1970 - Parasitization of corn earworm larvae infes-
ting sweet corn tassels in southern California. J. Econ. Entomol.
63 (1),326-327.
ODIER F., 1974 - Recherches sur les interactions et les complexes de maladies
liés à des viroses de types densonucléose chez les Lépidoptères.
Thèse d'Etat, U.S.T.L., Montpellier, 257 p.
OHSHlMA K., 1935 - Infectivity of C~o ~~ptex Butler by No~ema bomby~
and Phagoey~e action of the host hoemolymphocyte against the pa-
rasite. 2001. Mag. Tokyo, 47, 607-626.
ORMIERES R., LOUBES C., MAURAND J., 1977 - Etude ultrastructurale de la Micros-
poridie Penez~ tanQ~~~ae Léger et Duboscq, 1909, espèce type:
validation du genre Perezia. Protistologica, 13, 101-112.

---

255
ORMIERES R., BAUDOIN J., BRUGEROLLE G., PRALAVORIO
R., 1976 - Ultrastructure
de quelques stades de la Microsporidie Octo~po~ea mU6eae dom~tieae
Flu~, parasite de Ce~ eap~ata (Wiedemann) (Diptère, Trypeti-
dae). J. Protozool., 23 (2), 320-328.
ORMIERES R., PRALAVORIO C., YAMVRIAS C., LAUDEHO Y., 1977 - Octo~po~ea mU6eae
dom~~eae Flu. (Microsporidia) parasite de Ce~ eap~ata
Wied. et de Vae~ oieae Gmel (Diptère, Trypetidae). Biol. Gallo-
Hellenica, 6 (2), 259-270.
PALADE cité d'après GLAVERT A.M., 1952 - in "Techniques for electron Microsco-
py D.H. KAY Ed., 1965 BLACKWELL Scientific pub. Oxford.
PALMIERI J.R., SULLIVAN J.T.," 1977 - A technique for the location of Microspo-
ridae in host tissues. J. Invert. Pathol. 30, 276.
PATEL R.C., SINGH R., PATEL P.B., 1968 - Nuclear polyhedrosis of the gram pod
borer, Hetio~ ~g~. J. Econ. Entomol. 61 (1), 191-193.
PATEL R.C., PATEL J.C., PATEL J.K., 1971 - New records of parasites of Hetio-
~ aAmige~ (Hbn) and Hetiot~ pe~g~ Schiff from Gujarat.
Indian J. Entomol. 33 (2),223-224.
PATEL P.B., PATER R.C., 1972 - Biology of Eepho~op~~ pe~~~n~ Viereck.
A larval paras ite of Hetio~ aJl.m-i..g~ (Hb). J. Animal Morphol.
Physiol., 19 (2), 123-134.
PEARSON E.O .• 1958 - The insect pests of cotton in tropical africa. The Empire
Cotton Growing Corporation and The Commonwealth Institute of Ento-
mol., London, 1-355.
PERRIER R., 1963 - Hémiptères, Anoplomes, rallophages, lépidoptères. La Faune
de France T 4., Delagrave-Paris, 244 p.
PETRI M., 1976 - Microsporidia and Mammalian tumors. In Comparative Pathobiol.
Vol. 1
Biology of the Microsporidia. Plenum Press New-York, 239-
245.
PILLEY B.M., 1976 a - The preservation of infective spores of No~ema nee~x
(Protozoa : Microsporida) in Spodopte~ exempta (Lepidoptera : Noc-
tuidae) by lyophilisation. J. Invert. Pathol., 27 : 349-350.
PILLEY B.M., 1976 b - A new genus V~mo~pha (Protozoa : Microsporida), for
No~ema neeatkix Kramer, 1965 : Pathogenicity and life cycle in
Spodopt~ exempta (Lepidoptera : Noctuidae). J. Invert. Pathol.
28, 177-178.
POITOUT S., 1972 - Hetieov~pa aJl.m-i..g~ Hb. in Traité d'Entomologie Appliquée
à l'Agriculture. BALACHOWSKY A.S.,
2 (2), 1431-1445.
POITOUT S., BUES R., 1970 - Elevage de plusieurs espèces de Lépidoptères Noc-
tuidae sur milieu artificiel riche et sur milieu artificiel simpli-
fié. Ann. 2001. An. 2 (1), 79-81.
POITOUT S., BUES R., 1974 - Elevage de chenilles de 28 espèces de Lépidoptères,
Noctuidae, et de deux espèces d'Aractiidae sur milieu artificiel
simple. Particularités de l'élevage selon les espèces. Ann. 2001.
Ecol. anime 6 (3),431-441.
PURRINI K., 1975 a - Uber Mikrosporidien-Krankheiten einiger in Mühlen Schad-
licher Insekten in Jugoslawien. Anz. Schadling., Pf., Umweltschutz;
48,104-106.
PURRINI K., 1975 b - Uber die Verbreitung von Krankheits erregern heim Goldafter
Eup~o~ ~y~o~oea L. (Lep., Lymantriidae) un Gebiet von Kosova,
Yugoslawien. Anz. Schadling. Pf., Umweltschutz, 48, 182-183.

---

- 256 -
PURRINI K., 1975 c - Zur Kenntnis der Kraukheiten des gressen Ulmensplintkafers,
Scotyt~ ~cotyt~ F. im Gebiest Kosova, Jugoslawien. Anz. Schadling.,
Pf., Umweltschutz, 48, 154-156.
PURRINI K., 1975 d - Beitrag zur Kenntnis der Krankheiten der Mehlmotte,
EpheAtia. k.ii.hnieU.a. Zell. und der Getreidemotte, SUotltoga. ceJte.a.teLe.a.
Dl. im Gehiet Kosova. Acta phytopathol. Acad. Sci. Hungaricae,
10 (3-4),431-436.
PURRINI K., 1976 a - Zur Kenntnis der Mikrosporidienarten (Sporozoa, Nosematidae)
bei Vorratsschadlinger der Ordnung Coleoptera. Anz. Schadling., Pf.,
Umweltschutz, 49, 69-70.
PURRINI K., 1976 b - Zur Kenntnis der Mikrosporidien ar~en (Sporozoa, Nosemati-
dae) bei Vorrastsschadlingen der Ordnung Lepidoptera. Anz. Schadling.,
Pf., Umweltschutz. 49, 42-44.
PURRINI K., 1976 c - Zur Kenntnis der Insekten-fauna und ibre Kraukbeiten in
einigen alten Mühlen des Kosova Gebietes, Jugoslawien. Acta Phyto-
pathol. Acad. Sci., Hungaricae, Il (3-4),305-315.
PURRINI K., 1977 - ~er eine.neue Mikros~oridienkrankheit,No~e.ma. yponome.uta.e.
n. ~p. (M~crospor~da, Nosemat~dae) der Gespinstmotten Yponome.uta.
p~de.tta. L. und Y. e.vonyme.tta. L. (Lep. Yponomentidae). Anz. Schad-
l~ng, Pf., Umweltschutz, 50. 122-124.
--PURRINI K., WEISER j., 1975 - ~~~opho~ ai~p~ n. ~p., eine neue Mikrosporidie
der Stabschrecke Ba.~~ ~o~~~ F. Anz. Schadling., Pf., Umweltschutz
48, 40-42.
PURRINI K., SKATULLA U., 1978 - liber die naturlichen Krankheiten des Schwanmspin-
ners, Lymantnia ~p~ L. (Lep., Lymantriidae) in Sardinien, Italien.
Anz. Schadling, Pf., Umwelt.schutz, 51, 9-11.
REVEL I.L., 1960 - Longevity of refrigerated No~e.ma. spores. No~e.ma. a.p~ a pa-
rasite of honey bees. J. Econ. Entomol., 53, 1132-1133.
REYNOLDS E.S., 1963 - The use of lead citrate at ligh pH as an electron-opaque
stain in electron microscopy. J. Cell. Biol., 17,208-212.
ROBETS D.M., 1968 - Fatty acids in honeybees (Ap~ me.~6e.ka) infected with
the Protozoan No~e.ma. a.p~. J. Invert. Pathol., Il,234-236.
SAFTOIU A., CALOIANU-IORDACHEL, 1978 - New ultrastructural data on the develop-
ment of the Protozoan No~e.ma. tymantniae. Weiser) ( Microsporidia)
intercellular parasite on Lyma.~a. ~p~ L. (Lepidoptera). Trav.
Mus. Rist. Nat. "Grigore Antipa", 19, 83-87.
SCHWARTZ D., 1963 - Méthodes statistiques à l'usage des Médecins et des Biolo-
gistes. Flammarion Edit. Paris, 290 p.
SCHWARTZ D., LAZAR P., 1964 - Méthodes statistiques à l'usage des Médecins
et des Biologistes. Flammarion Edit., Paris, 144 p.
SHADDUCK J.A., 1980 - Effect of fumagillin on in vitro multiplication of Ence-
phatUozoon cuniculi. J. Protozool., 27 (2) 202-208.
SIKOROWSKI P.P., ANDREWS G.L., BROOME J.R., 1973 - Transovum transmission of
a cytoplasmic polyhedrosis virus of H~ot~ v~eAce.~ (Lepidop-
tera : Noctuidae). J. lnvert. Pathol. 21, 41-45.
StMMONS C.L., SIKOROWSKI P.P., 1973 - A laboratory study of cytoplasmic poly-
hedrosis virus on H~ot~ V~eAce~ (Lepidoptera : Noctuidae).
J. Invert. Pathol. 22 (3), 369-371.

---

- 257 -
SMIRNOFF W.A., 1975 - Histological studies on the development of the Micros-
poridian Thelohanla p~tophohae in larvae of Malaeo~oma ~~~a
and Mataeo~oma am~eanum. J. Invert. Pathol. 26, 401-403.
SOHI S.S., WILSON G.G., 1979 - Effect of antimicrosporidian and antibacterial
drugs on No~ema ~~~ae (Microsporida) infection in Mataeo~oma
~~~ (Lepidoptera : Lasiocampidae), cell cultures. Canad. J. Zool.
(57)
(6), 1222-1225.
SPRAGUE V., 1977 a - Classification and phylogeny of the Microsporidia. In
Comparative Pathobiol., vol. 2 : systematics of the Microsporidia.
Plenum Press, New-York, 1-30
SPRAGUE V., 1977 b - Annoted list of Microsporidia. In Comparative Pathobiol.
Vol. 2 : Systematics of the Microsporidia. Plenum Press, New-York
31-334.
SPRAGUE V., 1977 c - The zoological distribution of Microsporidia. In Compara-
tive Pathobiol. Vol. 2 : Systematics of the Microsporidia. Plenum
Press, New York, 335-386.
SPRAGUE V., 1978 - Caracterisation and compoS1t10n of the genus No~ema. Miscell.
Public. Entomol. Soc. Amer. Il (1),5-16.
SPRAGUE V., VERNICK H.S., 1969 - Light and electron microscope observations
on No~ema n~oni Sprague, 1950 (Microsporida, Nosematidae) with
particular reference to its Golgi complex. J. Protozool. 16 (2),
264-271.
STEINHAUS E.A., HUGHES K.M., 1949 - Two newly described species of Microspori-
dia from the potato tuberworm Gno~o~ehema op~euletla (Zeller),
(Lepidoptera, Gelechiidae). J. Parasitol., 35,67-75.
STREET D.A., SPRAGUE V., HARMAN D.M., 1975 - Brief study of Microsporidian
pathogens in the white pine wuvil, P~~od~ ~~b~. Chesapeak Scien-
ces, 16 (1), 32-38.
SUGDEN M.A., FURGALA B., 1979 - Enteroseptol ineffective against No~ema ap~.
Amer. bee Journal, 119 (8),594-596.
SUJAK P., ZIEMNICKI K., ZIEMNICKA J., LIPA J.J., OBUCHOWICZ L., 1978 - Acid
and alkaline phosphatase activity in the fat body and midgut of the
beet armyworm, Spodopt~ exigua (Lepidoptera : Noctuidae) infected
with nuclear polyhedrosis virus. J. Invert. Pathol. 31 (1), 4-9.
TANADA Y., 1962 - Effect of Microsporidian spore suspension on the incidence
of cytoplasmic polyhedrosis in the alfalfa caterpillar, CO~a6
e~ytheme Boisduval. J. Invert. Pathol., 4, 495-497.
TANADA Y., Epizootiology and microbial control. In Comparative Pathobiol. Vol.
Biology of the Microsporidia. Plenum Press, New York, 247-279.
TANADA Y., CHANG G.Y., 1962 - An epizootic resulting from a Microsporidian and
two virus infections in the armyworm P~eudatetia unipuncta (Haworth).
J. Invert. Pathol., 4, 129-131.
TANADA Y., REINER C., 1962 - The use of pathogens in the control of the corn
earworm H~~ zea (Boddie). J. Ins. Pathol., 4, 139-154.
TANABE A.M., TAMASHIRO M., 1967 - The biology and pathogenicity of a Microspo-
ridian, No~ema ~ehopl.~~ae ~p.n. of the cabbage looper, T~ehoptu­
~~ ni
(Hüber) (Lepidoptera : Noctuidae). J. Invert. Pathol. 9,
188-195.

---

- 258 -
TEAKLE R.E., 1977 - Diseases of the Heliothis caterpillar. Quesland Agr.
Journ. 103 (4), 389-390.
THOMSON H.M., 1958 a - Some aspects of the epidemiologie of a Microsporidian
parasite of the spuce budworm, Cho~~one~ 6u~6enana (Clem).
Cano J. Zool. 36, 309-316.
THOMSON H.M., 1958 b - The effects of the Microsporidian parasite on the de-
velopment, reproduction and mortality of the spruce budworm Cho~­
~ne~ 6umi6~ (Clem.). Canad. Journ. Zool. 36,499-511.
THOMPSON A.C., SIKOROWSKI P.P., 1979 - Effects of No~ema h~o~hi~ on faty
and aminoacids in larvae and pupae of the bollworm, H~o~ zea.
Comp. Biochem. Physiol. 63 A, 325-328.
TOUR S., 1969 - Ecologie des Microsporidies chez les Culicides du Midi Médi-
terranéen. Thèse 3è cycle, U.S.T.L. Montpellier, 82 p.
TUNSTALL J.P., 1977 - Hello~ ~gena (Hb). In Diseases, Pests and Weeds
in Tropical Crops. Verlag Paul Parey - Berlin, 479-481.
UNDEEN A.H., MADDOX J.V., 1973 - The infection of nonmosquito hosts by injec-
tion with spores of Microsporidian No~ema alg~ea. J. Invert. Pathol.
22,258-265.
UNDEEN A.H., ALGER N.E., 1975 - The effect of the Microsporidian, No~ema alge-
~e on Anophel~ ~~ephen6~. J. Invert. Pathology 25 (1), 19-24.
UNDEEN A.H., 1978 - Spore batching processes in some Nosema species, with par-
ticular reference to N. algenae Vavra and Undeen. In Miscel. Public.
Entomol. Soc. Amer., Il (1), 29-49.
United States Department of Agriculture, 1978 - Biological agents for pest
control. Status and prospects. Report Spec. study team coordin.
office Enver. Quality, activ., Washington, 138 p.
VAGO C., 1954 a - Enchainement d'une virose et d'une septicémie bactérienne
chez les larves de Thaumetopea p~gocampa Schiff. C.R.Soc. Biol.,
148, 1993-1995.
VAGO C., 1954 b - Action du permanganate de potassium comme désinfectant des
oeufs d'Insectes vis à vis des viroses. Bull. Soc. Zool. France
73 (2-3), 138-141.
VAGO C., 1956 a - Actions virusales indirectes. Entomophaga, 1,82-86.
VAGO C., 1956 b - Enchainement des maladies chez les Insectes. Ed. Spec. Comm.
Ser. Inter., Thèse Fac. Sci., Marseille, Ann. Epiphyt. n° hors série,
181 p.
VANDAMME P., ANGELINI A., 1966 - Complexe pathogène chez H~o~ ~ge~
(Hb) en Côte d'Ivoire. Cot. fib. trop., 21 (4), 333-338.
VANDAMME P., ANGELINI A., 1968 - Comparaison de trois milieux nutritifs arti-
ficiels pour l'élevage d'Ho ~gena (Hubn.). Cot. Fib. trop. 23
(4), 417-422.
VAVRA J., 1976 a - Structure of Microsporidia. In Comparative Pathobiol.,
vol. 1 : Biology of Microsporidia. Plennum Press, New-York 1-86.
VAVRA J., 1976 b - Development of Microsporidia in Comparative Pathobiol,
vol. 1 : Biology of Microsporidia. Plenum Press New-York, 87-110.
VAVRA J., 1977 - The Microsporidian mitotic apparatus. J. Protozool. 24 (2
suppl.) Ab, 115.

---

- 259 -
VAVRA J., MADDOX J.V., 1976 - Methods in Microsporidiology. in Comparative
Pathobiol., vol.
: Biology of Microsporida. Plenum Press, New
Yo rk, 28 1- 319 .
VAVRA J., BARKER R.J., VIVARES C.P., 1981 - A scanning electron microscop stu-
dy of a Microsporidian with a Pansporoblast : Thelo~a maenadi6.
J. Invert. Pathol., 37, 47-53.
VAVRA J., 1965 - Etude au microscope électronique de la morphologie et du
développement de quelques Microsporidies. C.R.Acad. Sci. Paris,
261 (12), 3467-3470.
VEBER J., JASIC J., 1961 - Microsporidia as a factor in reducing the fecundity
in Insects. J. Invert. Pathol. 3, 103-111.
VINSON S.B., BARRAS J.J., 1970 - Effects of the parasitoid, C~~oehit~ ~­
g~Qep~ on the growth, development and tissues of H~o~ v~~­
Qe~. Insect. physiol., 16 (7), 1329-]338.
VINSON S.B., 1972 - Effects of the parasitoid, Qampol~ ~onoAe~~ on the
growth of its host, H~~ v~~Qe~. J. Insect. Physiol., 18
(8), 1509-1514.
VINSON S.B., 1975 - Source of material in the Tobacco budworm which initiates
. host-searching by egg-Iarval parasited, ChelonU4 tex~. Ann.
Entomol. Soc. Amer. 68 (2), 381-384.
VIVARES C.P., 1978 - Grégarinoses et Microsporidioses de Brachyoures (Crus-
tacés, Décapodes) de la Méditerranée occidentale : Aspects cyto-
logiques, biochimiques et physiologiques. Thèse d'Etat, USTL,
Montpellier, 227 p.
VIVARES C.P., SPRAGUE V., 1979 - The fine structure of Am~on pulv~ (Micros-
pora, Microsporida) and its implications regarding classification
and chromosome cycle. J. Invert. Pathol. 33, 40-52.
VIVARES C.P., BOUIX G., MANIER J. F., 1977 - OJtm,i.eA~-i.a ~ûn-i. gen. n., ~p .n.,
Microsporidie du crabe méditerranée, C~ûnU4 me~~eU4 Czerniav-
sky, 1884 : cycle évolutif et étude ultrastructurale. J. Protozool.
24, 83-94.
VIVARES C.P., TRELLU J., CECCALDI H.J., 1977 - Etude de l'influence d'une mi-
crosporidiose sur les électrophorégrammes (Protéinogramme et zymo-
gramme) des protéines de l'hémolymphe de C~~U6 me~eAAaneU6
(Crustacé, Brachyoure). Experientia 33, Ill.
WAFA A.K., KOTBY F.A., 1977 - Histopathological studies of No~ema bomby~
Naegeli infecting the silk worm, Bombyx mo~ (L.). Bull. Soc. ento-
mol. Egypte 55, 259-274.
WANG D.l., MOELLER F.E., 1970 - Comparisori
of the free amino acid composition
in ~he hemolymphe of Healthy and Nosema infected female Honney bees. J. lnvert.
Pathol., 15, 202-206.
WATANABE H., 1976 A Nosema species of Egyptian cotton leafworm, Spodopt~a
t-i.tuna (Lepidoptera) : its morphology, development, host range and
taxonomy. J. lnvert. Pathol. 28, 321-328.
WEIDNER E., Some aspects of Microsporidian physiology. IN Comparative patho-
biol. Vol. l, Biology of Microsporidia. Plenum Press, New York,
111-126.
WEISER J., 1956 - Protozoare infektionen im Kampfe gegen Insekten. Z. Pflk.
Pflpath., Pflsch., 63,625-638.

---

- 260 -
WEISER J., 1957 - Uber Krankheiter des Wollafters E~oga6t~ tane6~ L.
Z. Angew. Entomol. 41, 243-245.
WEISER J., 1963 - Sporozoan infections. In Insect Pathology. Edit. E.A.
STEINHAUS, Acad. Press, New-York 2, 291-332.
WEISER J., 1970 - Life cycle of No~ema bomby~. Soc. Invert. Pathol. Newsl.,
2, 10.
WEISER J., 1976 - Microsporidia in invertebrates : Host-parasite relations at
the organismal level. In Comparative pathobiol. Vol. l, Biology
of Microsporidia, Plennum Press, New York, 163-201.
WEISER J., 1978 - An atlas of Insect diseases. The Hague Netherlands, Dr JUNK
W.B.V., 2nd Rev. Edit., 240 p.
WEISER J., 1978 - Transmission of Microsporidia to Insect via injection.
Vest. Ceskol. spol. Zool. 52 (4),311-317.
WEISER J., COLUZZI M., 1972 - The Microsporidian P~tophoka euli~ Weiser,
1946 in different Mosquito Hosts. Follia Parasitol. (Praha) 19,
197-202.
WEISER J., LYSENKO O., 1972 - Protein changes in the hoemolymph of Gatt~
metionetia (L.), larvae infected with virus and protozoan patho-
gens. Acta Entomol. Bohemoslov., 69, 97-100.
WEISSENBERG R., 1976 - Microsporidian interactions with host cells. In Com-
parative Pathology, vol. 1 : Biology of the Microsporidia. Plenum
Press, New York, 203-237.
WHITLOCK V.H., 1977 - Simultaneous treatments of Hetiot~ aromigeka with a
nuclear polyhedrosis and a granulosis virus. J. Invest. Pathol.
29, 297-303.
WILSON G.G., 1971 - No~ema juli n. ~p., a Microsporidian parasite in the milli-
pede V~pto~uluo ton~nenô~ eoe~eo~netuo (Wood.) (Diplopoda, Ju-
li~ae). Cano Journ. Zool. 49 (9), 1279-1282.
WILSON G.G., 1974 - Effects of larval age at inoculation and dosage of Micros-
poridan (No~ema 6umi6ekanael spores, on mortality of spruce budworm
(Cho~tone~ 6umi6ekana). Canad. Journ. Zool., 52 (8),993-996.
WILSON G.G., 1975 - Occurrence of Thetoh~a ~p. and Pt~tophoka ~p. (Micros-
porida, Nosematidae) in Cho~toneU4a 6umi6~a (Lepidoptera :
Tortricidae). Cano Journ. Zool., 53,
1799-1802.
WILSON G.G., BURKE J.M., 1971 - No~ema th0m60~ n. ~p. a Microsporidian from
Cho~tone~a eon6lietana (Lepidoptera : Tortricidae). Cano J.
Zool. 49 (5), 786-788.
WILSON G.G., KAUPP W.J., 1976 - A preliminary field trial using N. 6umi6~ae
against the spruce budworm, Cho~toneU4a 6umi6ekana. Bi-monthly
Research notes, 32 (1), 2-3.
WILSON G.G., SOHI S.S., 1977 - Effects of temperature on healthy and microspo-
ridia-infected continuous cultures of Malaeo~oma ~~~a haemocy-
tes. Cano Journ. Zool. 55 (4), 713-717.
WINDELS M.B., CHIANG H.G., FURGALA B., 1976 - Effects of No~ema PYkauota on
pupa and adults of european corn borer, O~~a ~ub~~. J. In-
vert. Pathol. 27, 239-242.

---

- 261 -
YOUNG S.Y., YEARIAN W.C., KIM K.S., 1977 - Effect,of dew form cotton and soybean
foliage on activity of Helio~~ nuclear polyhedrosis virus. J.
Invert. Pathol. 25, 105-111.
YOUSSEF N.N., HAMMOND D.M., 1971 - The fine structure of the developmental
stages of the Microsporidianfto~emaap~ Zander. Tissue and cell,
3 (2), 283-294.
~
ZISER S.W., WOJTOWICZ J.A., NETTLES W.C. Jr., 1977 - The effects of the number
of maggots per host on length of development, puparial weight and
adult emergence of Euc~o~a ~p. Ann. Entomol. Soc. Amer., 70 (5)
733-736.
ZIZKA Z., HOSTOUNSKY Z., PROSEK J., 1979 - A new method of staining microspo-
ridian spores and their nuclei. J. Protozool., 26 (3-1), 47 A.
! -:
('-
.",
)

---

..
ANNEXES

---

- l
-
ANNEXE 1
NOSEMA DE LËPIDOPTÈRES NON DÉCRITES, NE DONNANT AUCUN MOYEN
DE DI ST! NCT! ON 1
1/ N. ~ty4ae Lutz et Splendore, 1908
Hôte original : 8Jt~.60W ~;t!fM
Taille forme des spores : 4-4,5 x 2,5-3 pm, ovoïde.
2/ N. caecutiae Lutz et Splendore, 1908
Hôte original : Caecutia ~p.
Taille et forme des spores
5-6 x 2-2,5 pm, allongée, ovoïde.
3/ N. auni6!ammae Lutz et Splendore, 1908
Hôte ori~inal : Scea ~6lammae
Taille et forme des spores: 3,5-5 x 1,7-2,5 pm, ovale.
4/ N. canna.e Schwarz, 1929
Hôte ori~inal : N:JYlaqJÛa c.a.nna.e
Taille et forme des spores : non décrites.
5/ N. eo~~i Schwarz, 1929
Hôte original : Co~~~ eo~~~
Taille et forme des spores : non décrites.
6/ N. ea4t.aeqana.e Weiser, 1961
Hôte ori~inal : Caeaecia ca4t.aeqana.
Taille et forme des spores: 4,5-5,3 x 2,8-3,2 pm, ovoïde.

---

- II -
7/ N. ep~ Lutz et Splendore, 1808
Hôte original : Ephi~ anguto~a
Taille et forme des spores : 3,5-5,5 x 2 pm, ovocylindrique.
8/ N. vtippi Lutz et Splendore, 1808
Hôtes originaux
Van~ vtippUh et V. g~ppUh
Taille et forme des spores : 3~3,5 x 1,5-2,5 pm
polyforme.
9/ N. hai~idoti~ Lutz et Splendore, 1904
Hôte original : Hal~ida~ ~p.
Taille et forme des spores: 5 x 2,5 pm, ovoïde.
10/ N. hy~e Lutz et Splendore, 1904
Hôtes
originaux : Hy~ ~p. et Vione ~M
Taille et forme des spores
4-5,5 x 1-1,5 pm, elliptique.
Forme
~
3,5-5,5 x 2,3
chez V. juno : 3,5-5,5 x 1,7-2 pm.
11/ N. hydtaecleae Issi et Tkach, 1968
Hôte original : Hy~ecia mieaeea
Taille et forme des spores : non décrites.
12/ N. juno~ Lutz et Splendore, 1903
Hôte original : Viane juno
Taille et forme des spores
8 x 2 pm, cylindrique.
13/ N. iophoeampae Lutz et Splendore, 1903
Hôte original : Lophoeampa 6iavo~tiea
Taille et forme des spores: 3,5-4 x
J,2 pm.
14/ N. iy~im~ Lutz et Splendore, 1904
Hôte horizontal : Meeha~t~ iy~im~
Taille et forme des spores : 4,6 x 2-2,5 pm.
15/ N. mi~~ Lutz et Splendore, 1904
Hôte original : Mietatta~ nana
Taille et forme des spores: 3,5-4 x 1,5-2 pm, ovoïde ou ovocylindrique.

---

- III -
16/ N. m~anae Weiser, 1956
Hôte original : Caeaecia mUkinana
Taille et forme des spores : 5 x 2-2,5 pm~
17/ N. neb~um Weiser, 1961
Hôte original : Homeo~oma nebulellum
Taille et forme des spores: 4,7-5,7 x 3,2-3,4 pm, ovale.
18/ N. phaienae Issi et Lipa, 1968
Hôte original : Phatena bueephala
Taille et forme des spores: 2,2-4,5 x 1,3-2 •
19/ N. ~abaunae Lutz et Splendore, 1908
Hôte original : non signalé
Taille et forme des spores: 6-7 x 2-2,5 pm, allongées et ovoides.
20/ N. ~ u.w.e Schwarz , 192 9
Hôte original : Sciapt~on tabani6o~
Taille et forme des spores : sphérique.
21/ N. ~~b.iea Weiser, 1964
Hôte original : LymantJrl.a fupaJ!.
Taille et forme des spores : 6-8 x 4 pm, ovale.
22/ N. van.i.l.i.a.e a
Lutz et Splendore, 1903
Hôte original
V.ione vanittae
Taille et forme des spores: 2,5-3,5 x 1-2 ~ .
23/ N. vanittae ~ Lutz et Splendore, 1903
Hôte original
V.ione van.i.l.i.a.e
Taille et forme des spores : 2,5-3,5 x 1-2 ~, ovoide, cylindrique.
24/ N. van<..U.a.e 'Y Lutz et Splendore, 1903
Hôte original : V.ione vanittae
Taille et forme des spores: 3,5-6 x 2,3 pm, allongée, cylindrique.
25/ No~e.ma. Jp. Asayama,
1969
Hôte original : Eup~o~ Jub6lova
Taille et forme des spores: 7-9 x 1,3-1,6 ~.

---

- IV -
26/ No~ema ~p. Banerjee, 1968
Hôte original : C~buo ~e~
Taille et forme des spores : 5-6,3 x 2,27 pm.
27/ No~ema ~p. Bucher et Cheng, 1971
Hôte original : Euxoa m~~o~a
Taille et forme des spores : 5 x 2,5 pm, ovale.
28/ No~ema ~p. Ishiwata, 1917
Hôte original : Attaeuo eymphia
Taille et forme des spores: 3-3,5 x 1,2-2,2 pm, ovoide.
29/ No~ema ~p. Issi et Lipa, 1968
Hôte original : L~peY4~~ ~tkob~etta
Taille et forme des spores: 2,7-4,2 x 1,2-2,2 pm, ovale.
30/ No~ema ~p. Kellen et Lindegren, 1970
Hôte original : P~yeto~ tnan6~etta
Taille et forme des spores: 5,25 x 2,10 pm.
31/ No~ema ~p. Lom et Weiser, 1972
Hôte original : Anth~ea p~ny~
Taille et forme des spores: non décrites.
32/ No~ema ~p. Lom et Weiser, 1972
Hôte original : Eup~~ ~~o~hoea
Taille et forme des spores: 1,6 x 1 et 6x1,6 pm, variable.
33/ No~ema ~p. Lom et Weiser, 1972
Hôte original : P~eudoal~ eo~ecta
Taille et forme des spores : ovale.
34/ No~ema ~p. Sidor et Mecelijski, 1974
Hôte original : Autognapha g~a
Taille et forme des spores: non décrites.
35/ No~ema ~p. Ohishima, 1931
Hôte original : Anthenaea p~ny~
Taille et forme des spores: 3,9 x 1,73 pm.

---

.....
- v -
36/ No~ema ~p. Tanada, 1962
Hôte original : P~e.uda1.e.:üa. urU.punc;ta;ta.
Taille et forme des spores: non décrites.
37/ No~ema 6p. Tanada et Beardsley, 1958
Hôte original : Spodopt~ m~ ~onycto~de6
Taille et forme des spores : non décrites.
38/ N06ema ~p. Lutz et Splendore, 1903
Hôte original : Catop~~ eubule
Taille et forme des spores : 2-5 x 1-2,5 um, polymorphe.

---

- VI -
ANNEXE II
NOSEMA DES LËPIDOPTËRES AYANT DES SPORES DE GRANDE TAILLE,
SUPËRIEURE À 5 ~M,
1/ N.
ca.c.:tobia.6fu Fantham, 1939
Hôte original : Cactob~~ cacto~
Taille et forme des spores: 4-6 x 1,2-2,2 pm, ovale.
2/ N. cac.:to~, Fantham, 1939
Hôte original : Cactob~~ ~p.
Taille et forme des spores: 4,5-7,2 x 2-3,5 ~' ovale
3/ N. co~ Jauch et Jauch, 1948
Hôte original : Colia.6 i~b~a
Taille et forme des spores: 4,2-5,6 x 1,4-2,8 pm, ovale
4/ N. he.tiothi~ Lutz et Splendore, 1904
Hôte original : He.tio~ zea
Taille et forme des spores: 2,5-5,5 x 1,7-2,8 pm et 6 x 2,5-3,7 um,
allongée, ovale.
5/ N. hetenn~po~um Kellen et Lindegren, 1969
Hôte original : Piodia ~nt~puncte.e..e.a
Taille e t forme des spores: 5,46 x 1,99 pm, fusiforme, cylindrique, ellip-
tique.
6/ N. iyma~ae Weiser, 1957
Hôte original : Lyma~a ~p~
Taille et forme des spores : 5-6 x 2-2,5 pm, fusiforme.

---

- VII -
7/ N. ~n6e6ta Hall, 1952
Hôte original : C4ambU6 bo~6at~
Taille et forme des spores : 5-8 x 2-3 ~.
8/ N. mU6eut~ Weiser, 1957
Hôte original
Lymantnia ~p~
Taille et forme des spores : 4,8-6 x 3-4 ~, ovoidale.
9/ No~ema ~p. Lipa, 1963.
Hôte original : p~~ ~pae
Taille et forme des spores : 4,5-6 x 2,5 pm, ovale.
10/ No~ema ~p. Lipa, 1964
Hôte original : Eup~~ eh4y~o~hoea
Taille et forme des spores : 4,5-8,2 x 2-3,5 ~, allongée, ovoide,
fusiforme.

---

- VIn -
ANNEXE III
NOSEMA DE LÉPIDOPTtRES AYANT DES SPORES DE PETITE TAILLE,
INFÉRIEURE À 4 ~M DE LONG.
1/ N. th0m60~ Wilson et Burke, 1971
Hôte original : Cho~tone~ con6iictana
Taille et forme des spores: 2,1-3,1 x 1,1-1,8 pm, ovoïde.
2/ NoJ.Je.ma. J.Jp. Nordin, 1975
Hôte original : MalacoJ.Joma am~canun
Taille et forme des spores: 2 x 3,4 pm.
3/ NOJ.Jema J.Jp. Watanabe, 1976
Hôte original : Spodoptena ~
Taille et forme des spores
3,6!O,2 x 2,O!O,1 pm, ovoïde.
4/ N. p~~omae Lipa, 1979
Hôte original : P~~oma J.Jau~
Taille et forme des spores: 2,8-3,3 x 1,8-2,2 pm, ovale
5/ N. ~chopiU6~ae Tanabe et Tamashiro, 1967
Hôte original : TJU..chopiU6~a ru.
Taille et forme des spores: 3,63 x 1,99 pm
6/ N. me6~ Paillot, 1918
Hôte original : P~~ b~J.J~cae
Taille et forme des spores: 3,5 x 1,5-2 pm, ovoïde, allongée

---

- IX -
7/ N. caeeoe~eae Weiser, 1956
Hôte original : Caeoeeia m~ana
Taille et forme des spores: 2-2,6 x 1,5 ~, ovale.

---

- x -
ANNEXE IV
NOSEMA DE LÉPIDOPTÈRES PRÉSENTANT DEUX TYPES DE SPORES
(MICRO- ET MACROSPORES) 1
1/ N. dut!tuc:toIL Steinhaus et Hughes, 1949
Hôte original
GnoJtimo~ehema opeJteuletta
Taille et forme des spores: 4,0 x 2,8 et 6,0 x 2,81 pm, elliptique.
2/ N. kovaeevi~ Purrini et Weiser, 1975
Hôte original : Eup!LO~ ehJty~o!L!Lhoea
Taille et forme des spores: 2,5 x 2,3
6 x 2
5 x 2 pm, allongée, ovale.
3/ N. laphygmae Weiser, 1959
Hôte original : Laphygma n!LUgipeJtda
Taille et forme des spores: 4,0-5,0 x 1,5-2,2 et 8-9 x 2-2,5 pm.
4/ N. opeJtophteJtae Canning, 1960
Hôte original : OpeJtophteJta bILumata
Taille et forme des spores: 2,5-3,5 x 1-1,3 et 5~7 x 1,0-1,5 pm.
5/ N. phILygaiU.diae Lipa Martignani, 1960
Hôte original : PhlLygaiU.dia ~nolLiU.ea
Taille et forme des spores: 4,69 x 2,14 et 6,5-9 x 2,14 pm, ovoide, allongée,
incurvée.
6/ N. py~ta Paillot, 1927
Hôte original : Py~ta nub~
Taille et forme des spores: 4-4,5 x 2 et 3,5-6 x 1,8-3 pm
7/ N. tna~itellae Kellen et al., 1977
Hôte original : PalLamYe1.tUA .tJta.~itella
Taille et forme des spores: 3,62!0,26 x 2,38!0,15 et 7,0!0,56 x 3,23!0,12 pm

---

- XI -
ANNEXE V
NOSEMA DES LËPIDOPTËRES NE PARASITANT PAS PLUS DE DEUX ORGANES
OU TISSUS DE LEUR HÔTE D/0RIGINE.
1/ N. lotrn~e Weiser, 1961
Hôte original : T~neola b~~~ela
Tissus parasités : tube de Malpighi et glandes séricigènes
2/ N. totr.:tJU..w Weiser, 1956
Hôte original : To~x v~~na
Tissu parasité : corps adipeux
3/ N. ~oel6eni Weiser, 1957
Hôte original : Ekiog~t~ lan~~
Tissu parasité: tube digestif.

---

- XII -
ANNEXE VI
Il;
No~ema DE LÉPIDOPTËRES AYANT DES SPORES DONT LA LONGUEUR VARIE
ENTRE 4 ET 5 ~M, PROVOQUANT UNE INFESTATION GÉNÉRALISÉE, MAIS
AYANT DES CARACTÉRISTIQUES QUI LES DISTINGUENT DE LA MICROSPORIDIE
DE Ch. Zaeeon~u~.
1/ N. bomby~ Nageli, 1857
Hôte d'origine: Bombyx mo~
Méronte : 2 types : à micronoyaux et à macronoyaux
Sporonte : fusiforme
Forme des spores : ovale •
2/ N. apo~voka Veber, 1957
Hôte d'origine: Apokia enatag~
Méronte : à diplocaryon
Forme des spores : ovale
3/ N. e~poeap~ae Paillot, 1938
Hôte d'origine : C~poeap~a pomonelta
Méronte : ovale ou rond avec 1 ou 2 noyaux
courtes chaines
multinucléé.
Sporonte : fusiforme avec 1 ou 2 noyaux
Forme des spores : ovoïde.
4/ N. e~~~VOkaMe Thomson, 1960
Hôte original : AJtcJU~ eekauVOkana
Méronte : binucléé ou plasmode à 6 paires de noyaux
Sporonte : binucléé
Forme des spores : allongée ou ovale.

---

- XIII -
5/ N. 6umi6~nae Thomson, 1955
Hôte original : Cho~toneU4a 6wmi6~ana
Méronte : uninucléé ou plasmode à 16 noyaux
Sporonte : allongé
Forme des spores : ovoide ou incurvée
6/ N. di6~~e Thomson, 1955
Hôte original : Mataeo~oma ~~
Méronte : à diplocaryon, diamètre: 1,5 pm
Sporonte : binucléé
7/ N. ~nvaden6 Kellen et Lindegren, 1973
Hôtes originaux : Cadta e~etta et C. 6~gutiletta
Méronte : 2 types : à noyaux compacts et à noyaux diffus
Forme des spores : ovocylindrique
8/ N. gall~ae Lipa, 1977
Hôte d'origine : Gall~ rnetionetta
Méronte : Sphérique ; diamètre : 3-5 pm
binucléé ou tétranucléé
Sporonte : allongé : long. : 5-7 ~
Forme des spores : ovoide
9/ N. plo~e Kellen et Lindegren, 1968
Hôtes d'origine: Piodia ~nt~puncteiia
Méronte : à 2 noyaux ou plasmode à 6 diplocaryons
10/ N. nonag~e Schwarz, 1929
Hôte d'origine : Nonag~ ~yphae
Mêronte : uninucléé, plasmode cylindrique
11/ N. p~ezio~d~ Huger, 1960
Hôte d'origine : Ag!tc,~ ~ege.,twn
Méronte : Plasmode à 16 noyaux ou chaines de 4,5 et 8 éléments
Sporonte : tétranucléé
Forme des spores : ovocylindrique

---

- XIV -
121 N. po~phy~niae Lipa, 1977
Hôte d'origine : Po~phy~~ amaô~na
Méronte : uninucléé, binucléé et tétranucléé. Diamètre
3-6 pm.
Sporonte : allongé et binucléé. Long. : 5 pm
Forme des spores : ovoïde.
131 N. ~p~ng~ Brooks, 1970
Hôte d'origine; Manduca ~exta
Méronte : un à huit noyaux
Sporonte : binucléé
Forme des spores :ovocylindrique.
141 N. yponomeutae Purrini, 1977
Hôtes d'origine: Yponomeuta padelta et Y. evonymelta
Méronte : plurinucléé et binucléé. Diam. : 6,2-8 pm
Sporonte : binucléé
Forme des spores : ovoïde.

---

- xv -
ANNEXE VII
FIGURES CITËES DANS LE TEXTE·
PLANCHE 1 : Elevage d'Ho aJr.migeJta.
Fig. 1
Boîtes-pondoirs
Fig. 2
Boîtes d'incubation
Fig. 3
Boîtes de dimension 260 x 130 x 77 mm servant à l'élevage
des larves âgées.
PLANCHE 2 : Elevage d ' HeLi-o:tfvi.6 aJr.migeJta. (suite)
Fig. 4
Boîtes de nymphose
Fig. 5
Boîtes où à lieu l'émergence des adultes
Fig. 6
Elevage en boîte individuelle.
PLANCHE 3 : Oeufs d'Ho akmigena. en microscopie électronique à balayage
Fig. 7
Oeuf d'Ho aJtmigena.
Fig. 8
Région micropylaire d'oeuf d'Ho akmigena.
PLANCHE 4 : Différents stades de développement d'Ho akmigeJta.
Fig. 9 : Larves de dernier stade
Fig. 10
Nymphes
Fig. Il
Adultes.
PLANCHE 5 : Chétotaxie des larves de premier stade d'Ho akmigena.
Fig. 12
Répartition des soies sur la moitié droite du prothorax
Fig. 13
Répartition des soies sur la moitié droite du mésothorax
Fig. 14
Répartition des soies sur la moitié droite du métathorax
Fig. 15
Répartition des soies sur la moitié droite du premier
segment abdominal.
Fig. 16
Répartition des soies sur la moitié droite du 2è segment
abdominal.

---

- XVI -
Fig. 17
Répartition des soies sur la moitié droite du 3è segment
abdominal.
Fig. 18
Capsule céphalique
Fig. 19
Répartition des soies sur la moitié droite du 7è segment
abdominal
Fig. 20
Répartition des soies sur les 9è et 10è segments abdominaux.
Fig. 21
Crochets des pattes anales.
PLANCHE 6 : Chétotaxie des larves de 2è, 3è, 4è, 5è et du dernier stade d'Ho
aJr.1n.tg eJz.a. •
Fig. 22 et 23 : Crochets des pattes abdominales et des pattes anales
des 1 2
Fig. 24 et 25 : crochets des pattes abdominales et des pattes anales
des 13
Fig. 26, 27 et 28 : Répartition des soies sur la moitié droite du
prothorax et crochets des pattes abdominales et anales des 1 .
4
Fig. 29 et 30
Crochets des pattes abdominales et des pattes anales
1 •
5
Fig. 31 et 32 : Crochets des pattes abdominales et des pattes anales
des larves de dernier stade.
PLANCHE 7 : Genitalia mâle et femelle en microscopie à balayage d'H~o~
(= H~eov~pa)
aJr.1n.tgeJz.a.
Fig. 33
Bourse séminale et bourse copulatrice
Fig. 34
Pénis.
PLANCHE 8 : Schéma théorique des génitalia mâle et femelle chez les genres
H~o:thiA et H~eov~pa.
Fig. 35
Genitalia mâle d'H~o~ cU.p.oaee.a
Fig. 36
Genitalia femelle d'Ho cU.p.oaee.a
Fig. 37
Genitalia mâle d'Helio~ (= H~eov~pa) aJr.1n.tgeJz.a.
Fig. 38
Genitalia femelle d'H~o~ (= H~eov~pa) aJr.1n.tg~.
PLANCHE 9 : Méronte et mérogonie de No.oe.ma manieJz.a.e..
Fig. 39 : Méronte.
Fig. 40 et 41 : Deux aspects de la mérogonie avec mérontes à deux
diplocaryons.

---

- XVII -
PLANCHE la : Sporontes de No~ema mani~e
Fig. 42 et 43 : Deux aspects des sporontes.
PLANCHE Il : La sporogonie chez No~ema mani~e
Fig. 44, 45 et 46 : Quelques images de la sporogonie.
PLANCHE 12 : Sporoblastes de No~ema mani~e
Fig. 47 et 48 : deux aspects des sporoblastes.
PLANCHE 13 : Formations du filament polaire: premiers stades.
Fig. 49 : Stade initial avec formation de la vacuole commune du
filament à partir des vésicules golgiennes.
Fig. 50 et 51 : Stades plus avancés avec différenciation antérieure
du sac et du capuchon polaires.
PLANCHE 14 : Formation du filament polaire: suite de l'évolution.
Fig. 52 et 53 : Deux sporoblastes âgés.
Fig. 54 : Détails de la partie antérieure du filament polaire.
PLANCHE 15 : Sporogenèse de No~ema mani~e.
Fig. 55 : Spore immature en microscopie électronique et spores vues
en microscopie photonique.
Fig. 56 : 'Histogramme de fréquence des largeurs et longueurs des spo-
res de N. mani~e recueillies chez Ch. zaeeo~.
Fig. 57 : Schéma du cycle de développement de N. mani~e.
Fig. 58 : Variation de la forme des spores de N. mani~e en
fonction de l'hôte.
PLANCHE 16 : Spores en microscopie à balayage des trois Microsporidies testées
chez les larves d'Ho ~g~.
Fig. 59
Spores de N. mani~e
Fig. 60
Spores de No~ema ~p.de
S. ~~
Fig. 61
Spores de Pteio~opho~ ~p. de G. tuteota.
Fig. 62
Courbe de mortalité des L
infestées par ingestion des
3
spores de N. mani~e, No~ema ~p. et Pteio~pho~ ~p.
Fig. 63 : Courbe de mortalité des L
infestées par injection de
4
spores de N. mani~e, de No~ema ~p., de Pt~~opho~ ~p.,
de G. tuteota.
Fig. 64 : Courbe de mortalité des larves de différents stades in-
festés, par voie orale ou par injection, avec des spores de
N. mani~e à différentes concentrations.

---

- XVIII -
Fig. 65 : Mortalité cumulée chez lez L
infestées par voie orale
2
avec des suspensions de spores de différentes concentra-
tions.
Fig. 66 : Action des différentes doses de spores de N. mani~e
sur les mues larvaires chez les L .
2
Fig. 67 : Courbe de taux de nymphose des larves de différents sta-
des d'Ho anmig~ infestées, par voie orale ou par injec-
tion avec différentes doses de spores de N. no~emae.
Fig. 68 : Mortalité cumulée des L
infestées par ingestion avec des
suspensions de spores de àifférentes concentrations.
Fig. 69 : Action des différentes doses de spores de N. mani~e sur
les mues larvaires chez les L .
3
Fig. 70
Mortalité
cumulée des L
infestées par voie orale.
4
Fig. 71
Influence des différentes doses des spores de N. mani~e
sur les mues larvaires des L
infestées par voie orale.
4
Fig. 72
Mortalité cumulée des L
infestées par injection.
4
Fig. 73
Mortalité cumulée des L
infestées par voie orale.
S
Fig. 74
Mortalité cumulée des L
infestées par injection.
5
Fig. 7S
Mortalité cumulée des larves de dernier stade infestées
par voie orale.
PLANCHE 17 : Taille des larves et nymphes saines et infestées.
Fig. 76
Larves saines et infestées.
Fig. 77
Nymphes saines et infestées.
Fig. 78
Influence de N. mani~e sur la croissance des larves de
2è stade d'Ho anmigvr.a..
Fig. 79 : Influence de N. manivr.a.e sur le moment de la nymphose pour
les larves de 2è stade.
.
Fig. 80
Influence de N. manieJtae sur le moment de la nymphose pour
les L .
3
Fig. 81 : Influence de N. mani~e sur le moment de la nymphose pour
les L •
4
PLANCHE 18
Histopathologie.
Fig. 82
Intestin moyen sain.
Fig. 83
Intestin moyen parasité par N. manieJtae
Fig. 84
Tube de Malpighi infesté par N. manivr.a.e
PLANCHE 19 : Histopathologie (suite)
Fig. 85
Muscle abdominal sain.
Fig. 86
Début de l'infestation du muscle abdominal.
Fig. 87
Muscle abdominal fortement infesté.

---

- XIX -
PLANCHE 20 : Histopathologie (suite)
Fig. 88
Lésions des cellules péri trachéales
Fig. 89
Tissu adipeux sain.
Fig. 90 et 91 : Tissu adipeux et hémocytes fortement infestés.
Action phagocytaire des hémocytes.
PLANCHE 21 : Histopathologie (suite)
Fig. 92
Hypoderme sain
Fig. 93
Hypoderme infesté
Fig. 94
Glande salivaire saine
Fig. 95
Glande salivaire parasitée.
PLANCHE 22 : Histopathologie (suite)
Fig. 96
Gonade femelle infestée
Fig. 97
Cerveau infesté.
PLANCHE 23 : Histopathologie et microscopie électronique à transmission
Fig. 98
et 99
: Relation topographique entre le tissu musculaire
et les mérontes de N. mani~e.
PLANCHE 24 : Histopathologie et microscopie électronique à transmission (suite)
Fig. 100 : Cellule adipeuse infestée
Fig. 101 : Spectre enzymatique du tube digestif des larves d'Ho
~~geka saines et infestées par N. m~~ae.
Fig. 102 : Spectre enzymatique de l'hémolymphe des larves d' H.
~~ge~ saines et infestées par N. m~~ae.
Fig. 103 : Courbe de mortalité des larves d'Ho arom~ge~a infestées
avec différentes doses de spores de No~ema ~p. de S. titto~a­
W.
Fig. 104 : Courbe de mortalité des nymphes d'Ho ~ge~ infestées
avec différentes doses de spores de No~ema ~p. de S. titto~a­
W.
Fig. 105 : Influence de NMema ~p. de S. tittoJr.a.Ü,!> sur la fécondité
d'Ho ~ge~.
Fig. 106 : Influence de No~ema ~p. de S. titto~aW sur l'accouple-
ment d'Ho ~~a.
Fig. 107 : Influence de No~ema ~p. sur la fert ili té des pontes d'
H. ~ge~.

---

- xx -
PLANCHE 25 : Histopathologie
Fig.
\\08 : Infestation de l'épithélium intestinal des larves d'
H. aJt.m,{.gvr.a. par No.6 e.ma. .0 p. de S. .u:t:tOItaLi..-6.
Fig.
\\09 : Tissu adipeux d'Ho a.Itrn~geJta. parasité après infestation
des larves par une suspension de spores de N. m~elta.e asso-
ciée à No.oema. .op. de Spodoptvr.a. U:ttOIt0...U6.
Fig. 1\\0 : Epithélium intestinal des larves d'Ho aJt.m,{.gelta. infesté
par l'association: N. ma.rU.eJta.e-N0.6ema. .op. de S . .u:t:tOItaLi..-6.
PLANCHE 26 : Histopathologie (suite)
Fig. 1\\\\ : Muscle abdominal des larves d'Ho altmigelta. infestée par
l'association: N. m~vr.a.e-No.oe.ma. .op. de S • .u:t:tOItaLi..-6.
Fig. \\\\2 : Tissu adipeux et hypoderme parasité après infestation des
larves par N. m~elta.e et NO.6ema. .op.
Fig.
\\\\3 : Glande salivaire parasitée après infestation des larves
par l'association de No.6ema. m~elta.e et No.6ema. .op. de S. ~­
ta ltaLi..-6 •
Fig. \\14 : Mortalité des larves d'Ho altmigvr.a. infestées au 2è, 4è
et dernier stade larvaire avec des spores de N. m~elta.e et
N0.6 ema. .op. de S. .u:t:tOIt~.
Fig.
\\15 : Mortalité des larves d'Ho ~gelta. infestées au 3è stade
avec des spores de N. man~vr.a.e et de No.6e.ma. .op. de S . .u:t:tOIta.-
~ recueillis chez H. altmigeJta..

---