Evaluation de la qualité hygiénique de six plantes médicinales et des phytomedicaments traditionnels

Pharm. Méd. Trad. Ai;- 2001, Va!.11, pp. 83-92
EVALUATION DE LA QUALITE HYGIENIQUE DE SIX PLANTES
MEDICINALES ET DES PHYTOMEDICAMENTS TRADITIONNELS
AGASSOUNON DJIKPO TCHlBOZO , M. I , ANANI, K. T.2, AMEYAPOH, v? ,
TOUKOUROU, F. I ,de SOUZA, C. 2, GBEASSOR, M. 2
1. Département de Biologie Végétale, FAST, Université Nationale du BENIN - COTONOU
2. Laboratoire de Microbiologie, Centre de Recherche et de Formation sur les Plantes Médicinales,
Université de Lomé - Lomé TOGO.
Résumé
Dans le but d'apprécier la qualité hygiénique des organes de six plantes médicinales
et de réaliser le contrôle de la qualité micro biologique des phytomédicaments
traditionnels, nos travaux ont porté d'une part, sur les plantes médicinales les plus
utilisées à Cotonou (BENIN) pour le traitement du paludisme et des maladies d'origine
microbienne: DiaLium guineense, Pavetta corl'mbosa, Rvtigvnia canthioides. Securinega
virosa. Sanseviera Liberiea et Uvaria chal/Ille .. et d'autre part, sur leurs macérations et
décoctions. Les résultats de l'étude de la qualité hygiénique des plantes indiquent la
présence de coliformes totaux (30°C), de coliformes thermotolérants (44°C), de levures
et de moisissures (Aspergillus niger et Mueor w..). Le nombre des coliformes varie entre
250 et 110 .103 germes/ml et celui des levures et moisissures est de 3.10 3 à 84.10 3 • Les
essais de conservation réalisés à 26°C (température ambiante) et au réfrigérateur (4°C ± 1)
pendant quinze jours avec deux macérations constituées d'associations de Rvtigvnia
ccmthioides et de Securinega virosa (Rc Sv-2) et de Dialium guineese, Pavetta corymbosa,
Rvtigynia canthioides. Sansevieria liberiea et Uvaria chamae (DPRSU-S) ont montré la
présence de bacilles Gram positifs (catalase + oxydase +; calatase + oxydase - et
catalase - oxydase -) et Gram négatif, de levures et moisissures.
La concentration microbienne initiale des macérations conservées au réfrigérateur
(4°C ± 1) a subi un effet microbiostatique.
La conservation des macérations à 26°C a par contre révélé une augmentation de
cette flore.
Les décoctions et les macérations filtrées, utilisées comme témoins et conservées dans
les mêmes conditions 4°C ± 1 et 26°C) sont demeurées stériles.
Deux phytomédicaments SN-1 et TÜLA-1 testés comme contrôle sont contaminés
par les mêmes germes que ceux isolés des macérations.
L'utilisation des phytomédicaments traditionnels comporte donc des risques de toxi-
infection pour les consommateurs. Les tradithérapeutes et les vendeuses (ou vendeurs)
SJ

Pharm. Méd.Trad. Afr. 2001, VoU 1, pp. 83-92
de
plantes médicinales doivent
être informés sur les bonnes pratiques d'hygiène, de
préparation et de conservation de leurs produits.
Mots clés: Plantes médicinales- Phytomédicaments - Qualité microbiologique.
1 - INTRODUCTION
Depuis le temps ancestral la population africaine a toujours résolu les
problèmes de santé primaire par l'intermédiaire de la médecine traditionnelle.
Ainsi bon nombre de plantes médicinales sont utilisées sous différentes
formes pour traiter diverses maladies (angine, paludisme, maux de ventre, la
stérilité, la diarrhée, etc.).
De toutes les maladies qui menacent l'Afrique en général et le BENIN en
particulier, le paludisme constitue avec les maladies d'origine microbienne les
affections les plus fréquentes.
Cette étude a été entreprise dans le but de contrôler la qualité hygiénique
des six plantes les plus citées dans le traitement de ces affections à Cotonou et
des phytomédicaments traditionnels.
II - MATERIEL ET METHODES
2.1 - Matériel
2.1.1- Plantes médicinales et les associations étudiées
Nos analyses ont porté sur six plantes médicinales citées en associations et
couramment utilisées dans le traitement traditionnel du paludisme et des
maladies d'origine microbienne à Cotonou au BENIN.
Les associations de plantes concernées sont: Re Sv-2 composé des feuilles
de Rytigynia canthioides et de Securinega virosa et DPRSU-S composé des
feuilles de Dialium guineense, Pavetta corymbosa, Rytigynia canthioides et
des racines de Sansevieria liberica et Uvaria chamae. Lesdites plantes sont
achetées sur les marchés de Dantokpa, Gbêdjromêdé et Godomey au BENIN.
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Pharm. Méd.Trad. Afr JODl, VoU t. pp.83~92
L'authentification de ces plantes a été faite par le laboratoire de Biologie
végétale de l'Université Nationale du BENIN et le Département de botanique
de l'Université de Lomé au TOGO où des échantillons ont été déposés.
2.1.2- Phytomédicaments analysés
Deux phytomédicaments achetés sur les marchés de la ville de Lomé ont
été analysés. Il s'agit des phytomédicaments codés SN-I et TOLA-l.
2.1.3- Milieux de cultures
Les bouillons lactosés au bromocrésol pourpre et au vert brillant, la gélose
Sabouraud chloramphénicol, la gélose Plate Count Agar (PCA), le tryptone-
sel et le milieu Chapman ont été utilisés
2.2- Méthodes
2.2.1- Préparation des macérations et des décoctions codées RcSv-2 et
DPRSU-S.
La méthode de préparation de ces formes galéniques est une modification
de celle déjà rapportée (6 ; 7).
La macération RcSv-2 est un mélange à 50% (p/p) des poudres de feuilles
de Rytigynia canthioides et de Securinega virosa. Celle de DPRSU-5 est
constituée des poudres de feuilles de Dialium guineense, Pa vetta corymbosa,
Rytigynia canthioides et de racines de Sansevieria liberica et de Uvaria
chamae à part égale.
Une suspension de 100 mg/ml de chaque association a été préparée avec
l'eau de robinet stérile. Chacune des suspensions a été divisée en trois lots:
le lot N°l constituant la macération est laissé pendant l5mn à 26°C puis
décanter;
le lot N°2 est stérilisé par filtration sur membrane millipores 0,4511m ;
et le lot N°3, la décoction, portée à une température de SO°C pendant
l5mn.
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2.2.2 - Evaluation de la qualité hygiénique des plantes, des macérations
et décoctions
Nous avons utilisé la technique de dénombrement en milieu liquide
associée à l'étalement sur milieu solide approprié (VALLEMONT et coll.,
1981 ; BOURGEOIS et LEVEAU, 1980; GUIRAUD et GALZY, 1980).
Dix grammes (lOg) de chaque poudre de plante et 10 ml de chaque
phytomédicament ont été dilués dans 90 ml de Tryptone-Sel.
Les germes totaux ainsi que les levures et moisissures ont été dénombrés
respectivement sur les géloses Plate Count Agar (PCA) et Sabouraud
Chloramphénicol tandis que les coliformes totaux et thermotolérants (44°C)
ont été recherchés et dénombrés par la technique du Nombre le Plus Probable
(NPP) dans les bouillons lactosés au bromocrésol pourpre et au vert brillant.
2.2.3 - Evaluation de la qualité hygiénique des phytomédicaments
Dans les phytomédicaments sélectionnés, les germes anaérobies sulfito-
réducteurs ont été recherchés et dénombrés sur le milieu tryptone- sulfite-
néomycine (TSN) en plus des germes recherchés dans les décoctions et
macérations par la même méthode décrite précédemment.
2.2.3-Essais de conservation des décoctions et macérations
Les macérations et les décoctions ont été conservées à 26°C (Température
ambiante) et à 4°C ± 1 (au réfrigérateur) pendant 15 jours.
La qualité hygiénique de ces formes galéniques a été appréciée toutes les
72 heures par la technique de dilution couplée à l'étalement sur des milieux
gélosés appropriés (3 ; 5).
Une aliquote de macération filtrée sur membrane millipore 0,45/lm a été
utilisée comme témoin.
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III - RESULTATS ET DISCUSSION
3.1. Evaluation de la qualité hygiénique
3.1.1-Les plantes étudiées
Les résultats obtenus sont consignés dans le tableau n° 1.
Ces résultats indiquent que les organes des plantes étudiés sont contaminés
à des degrés divers par les coliformes totaux, les coliformes thermotolérants
(44OC), les levures et les moisissures.
Par rapport à ces trois catégories de germes, les racines de Rytigynia
canthioïdes (Rubiaceae) sont les plus contaminées (Coliformes totaux et
thermotolérants (44°C) : 110.103/g ; levures et moisissures: 82.10 3/g ).
3.1.2-Les décoctions et macérations
3.1.2.1. Décoctions
Les décoctions RcSv-2 et DPRSU-S analysées ne renferment aucun des
germes recherchés. Ils sont donc de bonne qualité hygiénique.
3.1.2.2 - Macérations RcSv-2 et DPRSU-S
Les tableaux N°2 et N°3 illustrent les résultats obtenus.
La flore totale initiale dénombrée dans les macération RcSv-2 et DPRSU-S
est respectivement de 320.103 germes/ml et 322.105 germes/ml.
• Macération RcSv-2
Les résultats au cours de la conservation à 26°C de la macération RcSv-2
indiquent une augmentation de la flore mésophile totale (30°C) jusqu'au
neuvième jour où elle atteint 229.109 germes/ml suivie d'une régression à
325.103 germes/ml au 15ème jour.
La flore fongique, 84.1 03 germes/ml au début, a connu une augmentation
au cours de la conservation (312.10 13 germes/ml après 15 jours).
Tandis qu'à 4°C, les flores mésophile totale et fongique ont diminué de
manière significative.
i)7

Pharm. MédTrad. Afr. 2001, Va/.U, pp.83-92
• Macération DPR8U-S
A 26°C, la flore mésophile totale (30°C) qui est de 322.105 germes/ml au
début, a subi une augmentation au cours de la conservation et est de l'ordre
de 55.10 11 germes/ml après 15 jours.
A la même température la flore fongique qui n'est apparue qu'au 3e jour a
atteint 54.10 11 germes/ml à la fin de la conservation.
On note une diminution de la flore mésophile totale (30°C) à 4°C tandis
que la flore fongique présente une variation très peu sensible.
La flore mésophile totale (30°C) dénombrée dans les macérations est
essentiellement constituée de bacilles Gram positifs et négatifs. La flore
fongique est constituée de levures et de moisissures (A. niger et Mucor sp.)
3.1.3-Les phytomédicaments
Les phytomédicaments SN-1 et TOLA-1 analysés ne contiennent pas de
germes anaérobies sulfito-réducteurs ni de Staphylococcus aureus.
Les phytomédicaments SN-1 et TOLA-1 renferment respectivement une
flore mésophile totale (30°C) de 104 germes/ml et 120 germes/g ; des levures
et moisissures 700 germes/ml et 103 germes/go
La flore mésophile totale (30°C) dénombrée est essentiellement constitué
de bacilles Gram positifs, catalase positive ou négative, des bacilles du genre
Bacillus et non Bacillus, des coccobacilles Gram négatifs tandis que les
moisissures isolées sont Aspergillus niger et Mucor sp.
CONCLUSION
Le présent travail montre que les plantes médicinales et les phytomécaments
testés sont contaminés par des micro-organismes qui peuvent affecter leur
qualité hygiénique et organoleptique et dont certaines espèces sont susceptibles de
provoquer des toxi-infections.
La production des phytomédicaments doit donc respecter les bonnes
pratiques d'hygiène et de préparation pour réduire les contaminations décelées.
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Pharm. Méd.Trad. Afr. 20Dl, VoU l, pp. 83-92
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
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Evaluation
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par les Universités de Côte d'ivoire. Communication N° 612.
2 - ANONYME, DIAGNOSTICS PASTEUR. (1986). La Mycologie Médicale-
Prélèvement-Identification-Antibiogramme-Sérologie. Imprimé en
France - Promoform,15p.
3 - BOURGEOIS, C .M. ; LEVEAU J. Y.(1980).Technique d'analyse et de
contrôle dans les industries agroalimentaires. Contrôle microbiologique.
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4 - de SOUZA ,e. ; ANANI, K.T. ; GUEDE-GUlNA, F. ; KABORE, 1. ,KOUMAGLO,
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industries alimentaires. Collection Génie alimentaire. Les éditions de
l'usine nouvelle, 239p.
6 - SOFOWORA, A. (1984). Medicinal plants and traditional medicine in
Africa. John Wiley and sons, Chichester. Pp142-l43.
7 - SOFOWORA, A. (1982). Plantes médicinales et médecine traditionnelle
d'Afrique traduit par FELICUTAS CEPLEANU. KATHALA - Edition
Diffusion. (1996,75013 Paris, pp 25 -295)
8 - VALLEMONT, P. (1981). Analyse bactériologique des denrées alimentaires.
Méthodes généraleset Normes. OPERON, 01 FICHE TECHNIQUE. pp 19 - 26
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Pharm. Méd.Trad. Afr. 2001, VoU1, pp. 83-92
Tableau N°l: Evaluation de la qualité hygiénique des plantes
N°
NOMBRE DE GERMES / GRAMME DE MATIERE
NOM
ORGANES
SECHE
SCŒNTlFlQUE
UTlLlSES
Coliformes
Coliformes
Levures et
totaux (30°C)
thermotolérants
Moisissures
(44°C)
(30°C)
j
46.IO
1
Dialium guineense
Feuilles
25.102
25.102
(Caesa1pi niaceae)
2
Pavetta corymbosa
Feuilles
6. 102
6.10 2
16.10 3
(Rubiaceae)
3
Rytigynia
Feuilles
70.103
25.102
32.103
canthioides
(Rubiaceae)
4
Sansevieria
Racines
110.10 3
110.103
82.103
liberica
(Agavaceae)
3
5
Feuilles
250
250
3.10
Securinega virosa
(Euphorbiaceae)
3
6
Feuilles
6.10 3
6.10
84.103
Uvaria chamae
(Annonaceae)
Racines
25.103
6.10 3
7.10 3
90

Pharm. Méd.Trad. Ali' 2001, VoU I, pp.83-92
Tableau N°2 : Le dénombrement des germes aux différentes étapes de la
conservation de la maceration rcs,-2 au refrigerateur (4°c) et à la
température ambiante (26°c).
DUREE DE
CONSERVATION
ETAPES
NOMBRE DE GERMES / ML
(jours)
Flore mésophile totale
Levures et moisissures
(30°C)
1
0
320.10"
84.10 3
4°C±1
26°C
4°C±1
26°C
II
3
172.103
237.10'
8.103
143.10'
III
6
Il.l 03
155.107
3.10 3
123.10'
IV
9
15.10"
229.10"
10.10"
234.10
V
12
27.10"
362.10"
25.10"
338.10 11
VI
15
32.10"
325.IO j
n.io-
312.10 13
Notes: RcSv-2
= mélange des feuilles de Rvtigynia canthioides et de Securinega virosa
91

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Tableau N° 3 : Le dénombrement des germes aux différentes étapes de la
conservation de la macération dprsu-S au réfrigérateur (4°c± 1) et a la
température ambiante (26°c)
DUREE
ETAPES
CONSERVATION
NOMBRE DE GERMES / ML
Gours)
Germes mésophile totaux
Levures et moisissures
(30°C)
322.10
0
[
0
4°Ct1
26°C
4°Ct1
26°C
89.10)
345.10 5
75.10 5
II
3
0
31.10)
463.10 5
367.10 5
III
6
0
69.10'
1\\5.107
37.\\05
209.10 7
IV
9
38.\\0)
120.109
36.10 5
234.10 9
V
12
33.\\0)
55.10 11
31.10 5
54.10 11
VI
15
Notes:
DPRSU-5 = mélange des feuilles de Dialium guineense, Pa vetta corymbosa, Rytiginia canthioides
et des racines de Sansevieria liberica et de Uvaria chamae.
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