Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, VoU 1, pp. 1-11
ETUDE DES PROPRIETES ANTI-INFLAMMATOIRES
DE LA RACINE DE PLUCHEA oVALlS (PERS.) DC.
(ASTERACEAE) CHEZ LE RAT.
AGBONON, A., AKLIKOKOU, K., AKPAGANA, K., et GBEASSOR, M.*
* Centre de Recherche et de Formation sur les Plantes Médicinales (CERFOPLAM)
Faculté des Sciences (Université de Lomé); Laboratoire JER 3006.
Résumé
Les effets anti-inflammatoires et antipyrétiques de la racine de Pluchea ovalis ont été
évalués sur les rats wistar de poids allant de 100 à 120 grammes.
Le décocté et l'extrait éthanolique de la racine de P. ovalis sont administrés par voie sous
cutanée 30 minutes avant l'induction de l'inflammation (l'œdème de la plante de pied) par 0,1
ml
de formaldéhyde à 1%. Le décocté inhibe l'inflammation de 67,21 % à la dose de 2 g
éq.mv/kg alors que l'extraitéthanoliqueà la dose de 750 mg/kg l'inhibe à 72,13%. La drogue
de référence, utilisée est indocide, à la dose de 100 mg/kg inhibe l'inflammation de 47,41 %.
L'extrait éthanolique de la racine de P. ovalis réduit également de manière significative
l'hyperthermie induite par 2 mUkg de la levure de bière à 12%.
Mots clés: anti-inflammatoire, antipyrétique, oedème, Pluchea ovalis
Summary : The root of Pluchea ovalis (PERS.) De. (Asteraceae) had been
investigatedfor its anti-inflammatory and antipyretic effect on rats ofeither sex (l00-
120 g). Aqueous and ethanolic extacts of the root of P. ovalis administrated
subcutanously inhibited significantlyformaLdehyde-inducedpaw oedema. Moreover,
ethanolic extract inhibited brewers ' yeast-induced hypertthermia.
Kev words: Pluchea ovalis; anti-inflammatory; antipyretic; oedema.
Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, Vol.11, pp. 1-11
1. INTRODUCTION
Pluchea ovalis (PERS.) De. (Asteraceae) est considérée au Togo comme une
espèce rare. Elle n'ajamais fait l'objet d'une étude pharmacologique mais, l'espèce
voisine, P. indica est étudiée en Inde par Sen et N ag (1991) pour ces propriétés anti-,
inflammatoires. D'autres espèces comme P. lanceolata et P. odorata sont utilisées
en médecine traditionnelle dans les Antilles.
L'objectif visé dans ce travail est d'effectuer des tests préliminaires pour voir si
P. ovalis possède des propriétés pharmacologiques similaires à celles de P. indica,
car les maladies inflammatoires sont des pathologies fréquentes dans les milieux
tropicaux. En effet, 58,9% des enfants de moins de quatre ans au Sud du Togo
souffrent de maladies inflammatoires (Senayah, 1990).
2. MATÉRIEL ET MÉTHODES
2.1. Matériels
Le matériel végétal est constitué par la racine de Piovalis récoltée dans la zone
lagunaire Est de Lomé en juillet 1998. Un échantillon de la plante est récolté et
identifié par le Département de Botanique de la Faculté des Sciences de l'Université
du Bénin où un spécimen est conservé.
Les rats Wistar adultes (100 à 120 grammes) sont utilisés pour les tests anti-
inflammatoires et antipyrétiques. Pour cet intervalle de poids le volume du pied des
animaux est de 0,8 ml. Ces animaux sont produits par le Départernentde Physiologie
Animale de la Faculté des Sciences. Ils ont une alimentation composée de maïs
(48%), blé (24%), poisson (22%), huile d'arachide (5%) et un supplément de sels
minéraux et de vitamines.
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Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, Vol. Il, pp. 1-11
Nous avons utilisé le dispositif de Bhatt et al., (1977) modifié pour évaluer le
volume du pied des rats. Pour mesurer la température anale des rats nous avons
utilisé une sonde thermique connectée au physiographe BIOPAC qui comporte un
amplificateur SKT 100 (Skin Temperature Amplifier) et un micro-ordinateur
(système Acq MP100 sous windows 95).
2.2. Méthodes
2.2.1. Préparation des extraits
Les racines de Piovalis sont coupées en petits morceaux et séchées à l'ombre puis
réduites en poudre. L'extrait éthanolique est préparé en macérant 230 grammes de
poudre dans 3 litres d'alcool à 95° pendant 72 heures en agitation continue. Après
la décantation le surnageant est filtré et le filtrat est évaporé sous vide à 35°C dans
un évaporateur rotatif. Nous avons 24,38 grammes d'extrait éthano1ique sont ainsi
obtenus. Cet extrait sera rendu soluble par le Tween 80. Le volume de Tween 80
utilisé n'a aucun effet sur les paramètres physiologiques testés.
Le décocté est préparé à partir de la même poudre soit 10 grammes dans 15 ml
d'eau distillée en ébullition pendant 15 minutes. Le volume final recueilli est ajusté
à 5 ml ce qui donne une concentration de 2 g éq.mv/ml .
2.2.2.Induction et détermination du volume de l'œdème
L'œdème est provoqué par l'injection dans l'aponévrose de la plante du pied de
0,1ml de formaldéhyde à 1% (Sen et Nag, 1991). Les mesures du volume du pied
sont effectuées à 0; 30; 60; 120 et 180 minutes après l'injection du formaldéhyde.
Trente minutes avant l'injection du formaldéhyde, les rats à traiter ont reçu par
voie sous cutanée 50, 100,500 et 750mglkg d'extrait éthanolique ou 0,2; 0,5 ; 1 et 2g
éq. mvlk:g du décocté de Pluchea ovalis. L'indocide est utilisé comme produit de
référence à la dose de 100mglkg.
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Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, VoU 1, pp. 1-11
Le volume du pied est déterminé par immersion qui provoque une augmentation
du ni veau d'eau. Nous ramenons le niveau de l'eau à sa position initiale dans la grande
seringue à l'aide des deux petites seringues. Le volume du pied qui correspond à la
quantité d'eau déplacée est directement lu sur les petites seringues. Le volume de
l' œdème VT à un temps t donné est:
VT=Vt-Vo
- V0 : le volume initial du pied,
- V ti: le volume du pied au temps t .
Le pourcentage d'inhibition de l'oedème est selon Szekely et al., (1997) :
% d'inhibition = 100 (VTf -VTp) / Vtf
- VTf: le volume de l'oedème chez les rats témoins ayant reçu uniquement le
formaldéhyde,
- VTp : le volume de l'œdème chez les rats traités avec les extraits de P. ovalis.
Le nombre de rats utilisé pour chaque dose est de 6 ( six ).
2.2.3. Evaluation de l'activité antipyrétique
L'hyperthermie est induite chez les rats par l'administration sous cutanée au
niveau de l'abdomen de la levure de bière (Lb) à 12%, à la dose de 2mllkg . Trente
minutes avant cette induction les rats à traiter reçoivent par voie sous cutanée les
doses de 500 et 750mg/kg d'extrait éthanolique de P. ovalis ou 50mglkg d'acide
acétylsalicylique (Aspégic R) (Abena et al., 1997). Les rats témoins reçoivent
uniquement de La Levure de bière. La mesure de la température anale est faite à 3; 5 et
7 heures à L'aide de la sonde thermique. Le nombre de rats utilisé pour chaque dose
est de 5 (cinq).
Dans tous les cas, les différerces entre les groupes témoins et les groupes traités
sont étudiés par le test "t" de Stutent par le logiciel SYSTAT sous WINDOWS 95.
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Pharm. Méd. Trad. AF. 2001, Vol.11, pp. 1-11
3. RÉSULTATS
3.1. Les tests sur l'œdème
Le volume de l'œdème (l'état inflammatoire) induit par le formaldéhyde augmente
avec le temps. Après trois heures il est de 0,61 ± 0,02 ml chez les rats témoins
(Tableau 1). Cette valeur correspond à un pourcentage d'augmentation de 76,25%
par rapport au volume initial du pied.
Les différentes doses de l'extrait aqueux
administrées par voie sous cutanée
30min avant l'injection du formaldéhyde réduisent l'oedème
(tableau 1). Ces
résultats sont significatifs par rapport aux témoins (P < 0.0 1 et P < 0.001). Les
pourcentages d'inhibition sont 9,83%; 42,62% ; 50,82% et 67,21 % respectivement
pour les doses 0,2 ; 0,5 ; 1 et 2 g.éq.mv/kgtrois heures après l'inductionde l'oedème.
L'effet est donc fonction de la dose. Pour ces mêmes doses, le pourcentage
d'inhibition est croissant dans le temps sauf pour 0,2 g éq. mv./kg puisque à cette
dose le degré d'inhibition est évalué à 19,44% ; 3,83 % et 9,83 % respectivement
pour 30; 120 et 180min les valeurs entre parenthèses dans le tableau 1).
L'extrait éthanolique de P. ovalis administré dans les mêmes conditions que
précédemment, réduit aussi considérablement l'œdème (tableau 1). Les résultats sont
très significatifs pour 500 et 750 mg/kg (P < 0.01 et P < 0.00 1) après trois heures
d'induction de l'œdème (Tableau 1).
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Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, Vol.ll,pp.1-11
Tableau 1: Effet de différentes doses du décocté et de l'extrait éthanolique
de P. ovalis sur le volume de l 'œdème (ml)
Traitement
Doses
Volume de l'œdème (ml) dans le temps (min).mv/kg
(g.éq et mg / kg ) 30
60
120
180
Formadéhyde
0,36 ± 0,1
0,47 ± 0,02
0,52± 0,02
0,61 ± 0,02
Décocté
0,2
0,29 ± 0,08"
0,42 ± 0,05
0,5 ± 0,07
0,55 ± 0,06'
(9,83)
(19,44)
(10,63)
(3,84)
0,5
0,25 ± 0,1'
0,3± 0,07"
0,34 ±0,03"
0,35 ±0,04'"
(30,55)
(36,17)
(34,61)
(42,62)
0,19 ± 0,06"
0,24 ± 0,06"
0,26± 0,03'"
0,3± 0,05"
(47,22)
(48,93)
(50)
(50,82)
2
0,17 ±0,02'"
0,17 ± 0,04'"
0,19± 0,02"
0,2 ± 0,018"
(52,77)
(63,83)
(63,46)
(67,21)
Ex!. Éthanolique
50
0,22 ± 0,012"
0,3± 0,02"
0,44± 0,15'
0,56 ± 0,02'
(38,34)
(34,46)
(13,84)
(9,43)
100
0,17 ± 0,04'"
0,23 ±0,03'"
0,35± 0,02"
0,45± 0,05'"
(50,92)
(50,71)
(32,05)
(24,86)
500
0,22 ± 0,01'"
0,24 ± 0,02"
0,25± 0,1"
0,24 ± 0,02'"
(49,31)
(53,72)
(55,76)
(57,78)
750
0,17 ± 0,01'"
0,18 ± 0,01'"
0,18± 0,02'"
0,17±0,03'"
(61,68)
(61,71)
(62,5)
(72,13)
Indocide (mg/kg)
100
0,28 ±0,03
0,29 ±0,02
0,31 ± 0,02
0,32 ± 0,04
(23)
(38,6)
(42,4)
(47,6)
Les drogues sont administrées par voies sous cutanée 30 minutes avant l'induction de l'œdème.
Les valeurs sont des moyennes ± E.S.M (erreur standard sur la moyenne) avec n = 6; * P < 0,1;
** P
< 0,01; ***P < 0,001 par rapport aux Témoins; les valeurs entre parenthèses sont les % d'inhibition
g.éq.mv/kg = gramme équivalent de matière végétale par kilogramme; Ext. = extrait.
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Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, VoU l, pp. 1-11
3.2. Test antipyrétique
L'hyperthermie est induite par l'injection par voie sous cutanée de 2ml/kg de la
levure de bière à 12%. La température qui était à 38,13 ± 0,17°C p asse à 40,2 ± 0,52°C
sept heures après injection de la levure (Tableau 2).
L'injection sous cutanée de l'extrait éthanolique de P. ovalis ou de la drogue de
référence, 30 min avant l'induction de 1'hyperthermie, réduit l'augmentation de la
température Tableau II).
Tableau II : Effet antipyrétique de P. ovalis
Traitement
Doses
Température (ooC) en fonction du temps (heures)
mg/kg
o
3
5
7
Témoins
38,13 ± 0,36
38,1 ± 0,49
39,54 ± 0,26
40,2 ± 0,52
Ext.élhanolique 500
38,13 ± 0,36
37,6 ± 0,55
38,94 ± 0,49
39,54 ± 0,l'
750
38,08 ± 0,41
37,81 ± 0,35
38,4 ± 0,78'
39,13 ± 0,6"
Acide AS.
50
38,04 ± 0,1
37,64 ± 0,59
38,17 ± 0,08
38,21 ± 0,06
Les valeurs sont des moyennes ± E.S.M. avec Il = 5; * P < 0,05; ** P < 0,005.
Acide AS. : Acide acétylsalicylique.
4. DISCUSSION
Dans nos conditions expérimentales le formaldéhyde a provoqué l'œdème dont
le volume est maximal au bout de trois heures (Singla et al., 1990; Ivanovska et al.,
1997) ; Viana et al., 1998). Le formaldéhyde provoque l'inflammation locale lorsqu'il
est injecté dans l'aponévrose de la p Jante du pied (Sen et N ag, 1991; Singh et al, 1997 ;
Suzuki et al., 1996) tout comme la carragénine (Bhatt et al., 1977; Ossipov et al.,
1995). La cause de cette réaction inflammatoire est la lésion tissulaire. Cette lésion
tissulaire induit la synthèse de l'histamine, des prostaglandines, des leucotriènes
7
Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, Vol.11, pp. 1-11
(Ammon et al., 1993), du PAF (facteur d'activation p1aquettaire), des cytokines, du
NO (monoxyde d'azote) et du TNF (facteur de nécrose tumorale) (Clarke et al.,
1996).
Les effets de la racine de Piovalis sur l'oedème s'expliquerait par l'inhibition de
la synthèse des substances pro-inflammatoires. Cette hypothèse nous paraît
vraisemblable dans la mesure
où l'extrait éthanolique de
P.ovalis
inhibe
l'hyperthermie induite par la levure de bière. L'hyperthermie qui accompagne les
réactions inflammatoires est provoquée par certaines substances pro-inflammatoires
comme les cytokines et les prostaglandines.
S. CONCLUSION
Nos résultats indiquent que le décocté et l'extrait éthanolique de la racine de P
ovalis inhibent de façon temps et dose-dépendante l'oedème induit par le
formaldéhyde à 1%. De plus l'extrait éthanolique inhibe l'hyperthermie (induite par
2 ml/kg de levure de bière à 12%). La réduction de ces deux symptômes (œdème et
fièvre) nous montre que la racine de P.ovalis posséderait des principes actifs anti-
inflammatoires qu'il faudrait extraire, purifier et caractériser.
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Pharm. Méd. Trad. Ali'. 2001, Vol.11, pp. 1-11
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10
Pharm. Méd. Trad. Afr. 2001, VoU1, pp. 1-11
Tableau I: Effet de différentes doses du décocté et de l'extrait éthanolique
de P. ovalis sur le volume de l 'œdème (ml)
Traitement
Doses
Volume de l'œdème (ml) dans le temps (min).mv/kg
(g.èq etmg / kg ) 30
60
120
180
Formadéhyde
0,36 ± 0,1
0,47 ± 0,02
0,52±0,02
0,61 ± 0,02
Décocté
0,2
0,29 ± 0,08'*
0,42 ± 0,05
0,5± 0,07
0,55 ± 0,06*
(9,83)
(19,44)
(10,63)
(3,84)
0,5
0,25 ± 0,1*
0,3± 0.07**
0,34 ± 0,03**
0,35 ± 0,04***
(30,55)
(36,17)
(34,61)
(42,62)
0,19 ± 0,06'*
0,24 ± 0,06**
0,26 ± 0,03'**
0,3 ± 0,05**
(47,22)
(48,93)
(50)
(50,82)
2
0,17 ± 0,02*'*
0,17 ± 0,04**'
0,19 ± 0,02*'
0,2± 0,018*'
(52,77)
(63,83)
(63,46)
(67,21)
Ext. Éthanolique
50
0,22 ± 0,012*'
0,3 ± 0,02*'
0,44 ± 0,15*
0,56 ± 0,02*
(38,34)
(34.46)
(13,84)
(9,43)
100
0,17 ± 0,04*'*
0,23 ± 0,03**'
0,35 ± 0,02'*
0,45 ± 0,05***
(50,92)
(50.71)
(32,05)
(24,86)
500
0,22 ± 0,01 '**
0,24 ± 0,02**
0,25 ± 0,1*'
0,24 ± 0,02'**
(49,31)
(53,72)
(55,76)
(57,78)
750
0,17 ± 0,01'*'
0,18 ± 0,01*'*
0,18 ± 0,02*'*
0,17 ± 0,03*'*
(61,68)
(61,71)
(62,5)
(72,13)
Indocide (mg/kg)
100
0,28 ± 0,03
0,29 ± 0,02
0,31 ± 0,02
0,32 ± 0,04
(23)
(38,6)
(42,4)
(47,6)
Les drogues sont administrées par voies sous cutanée 30 minutes avant J'induction de l'œdème.
Les valeurs sont des moyennes ± E.S.M (erreur standard sur la moyenne) avec n = 6; * P < 0,1;
** P
< 0,01; ***P < 0,001 par rapport aux Témoins; les valeurs entre parenthèses sont les % d'inhibition
g.éq.mv/kg = gramme équivalent de matière végétale par kilogramme; Ext. = extrait.
Il