IIISE AU POINT D' mm :mTHODE INDUSTRIE; LLE1Jl!.;r,'J:'
HTT}JRESSAl\\T'TE :POUR L'EXTRACTION DE LA BERBERlNTi
:D:;~ TF.I:ALICTRUl\\1 RHY1-JCHOCL.RPUH DILLON ct A .RIC H
par
Serge
DUBE
Luc Van PUYVLLDE
Groupe de recherches sur l a médecine
tradi tioTffic,lJ.G,
la pharmacopGe et les plantes médicinales rWffiLèniGGo
B.P. 52
Butare
(Rws.nda)
Nous avons discuté lors d G8 dGUX derniers c oJ_loC'uù~::; cl u
C1:.1.IJS (1,2) cle nos travaux sur Thalic~ rh..xa.chocar]2Ul:!1
DILLm~
(;t Jl.~ RICH (Renonculacées), connUG on kinynrwanda sous J_cs nons do
UDUGOEijOnO,
en préfecture de Cyangugu, de l1KANYABAHII:'U... ,
en :1::-6:l:'c c-
tL-:.rc. è.e Gisonyi, et de .AK..ANY1!.RUTOKI,
en préfecture de Kibu.yü ~ lT01..1..S
aVOllS isolé de cette plante trois alcaloïdos
:
la noro:.r:jrl1;)"llrc,cti-
l'lino, 10. Llae:;:noflorine et 18 berbérine
(talJleau r)
(3).
Les r8cines do 1. rhynchocarpwn DILLON et L. RICIT, ~o
couleur jauno, sont riches on borbérine. Cotte subSt2XlCO i:ï.-i':';6res-
sc.nte ~'.2':..)o.rcissait
dr.ns los ph<::,rmacopées
jusqu' en 1949 (4), nc..ic
son UJ['.c;e El. 6té abandonYl0 par l a suite en Occident. La. oCl~béri:~e
as-i; ce:JC:lc1an-i; oncore employée on méde cine chinoise
(5) c"c on on
recoa '<'~lC:Le 11aintcnc,nt l~ usage pO'l.U' lut-ter contre 18. d;srSClJ:CCl':7.c
tro:c):Lc2~e (6) ~
Le (.!.roupe de rechorches sur le. méàecine tr~-:di-Gio:~,:'~'..:1~_0,
ln }}harr.l8.oopéo et les plantes médicinales rwandaises pOUJ.'Gui-c r.;i:.:'c:~.
-tanélUont plusieurs objectifs complémentc.iros, dont 10 :c")r~_llci:;c'.J_ es-:;
la fubrication de médic8.1iwnts au R•.,randa à po.rtir de mntièrec
premières locales
(7,8). Nou.s voudrions dens cette Cori1L1UEic::-,,'c:i.u:-:
vous faire pt:.rt do nos
offorts en vue de
trouve-r une ;nétLoC.0 :L:ll-:'U~
triellcmcnt intéressante pour l'extraction do la bcrbérin;.- \\:"0 ~ ..
r.h;y;no.hoqp.:t'.J2..um DILLON ct A. RICH~
DOSAGE
Avant de penser ù fe-ire 1.' extraction cl. , Ul'lG Gubct2.l'-c~;
d'une ]}lante sur une
grr'..ndo échelle, i l est importe.J.'1.t do COI~l[':.~tro
la -cencur do la plnnto en cet-tG substance
• :Nous avons l'cdt le-
clODC,GC cIo le, bcrbérinc è.ans !~ rhynchocc..rpur:l DILLON ct l.... RICI: :..)C,::::-
s~ectrom6tric
UV ct visible~
- ~95 .,
l N',H
o
CI~O
MÂGNOFLORlNE
BERBERINE
TABLEAU l
.... 296 -
On fait
d ~ cbord l! extraction de la borbérine avec de
l'onu bouillante .. Dans une expérienc 0
typique, on pèse e:::o.ctOl'.lCl'lt
011viron l
g
do l a poudxo dos rC'.cinos de ;:'0 FJ1YAchocarp'Ll.r-l
DILLOH
et A~ RICH 0 On tro.nsfè~o la. poudre quanti tativomont sur Ul1.G colo;"!:·.G
de
chromatographie de ~~J ;~lJ.!1) on ujouJee de l'eau bouillante ct on
l8.ispe uc..cérer pcnd8.llt doux ou trois heures .. On :rait ensuito ::.)c.SDe~'
de lf eau bouillante sur le colonne jusqutà obtention d=un filt~ct
à. peu près incolore
(environ l,5 l ) ~ On recueille lE: :ril-l;:L'eoti',-i::...'cc.~
tOLlent cJ.o..ns un bc,llon j'cl.ugé de 2 l . On laisse refroidir à
20 C ci;
on conble avec de l:onu jusqu'au trcit do
jaugv. On fe.it ln LlCCTU:;"':'
imm6diatei~lGnt au spectJ.'ophotom.ètro, p3X' compo.rmson avec une so2.1.:-
tion COIU::..UC dlun écho....'1.tillon authentique de berbérine o
La'berbérine donne en spoctrométrie UV -
VIS des pics
à
227,5, 263,344 et 421 nm (H 0). Le produit d'extractio~ aos
2
rncincs do !~ rh.;vnchoC::Ar..P_\\l~
DILLON et 1>.0 RICH contion-l; en :....:'.1.·c
de le. bcr1Jérino boaucoup dl aut:ces produits. Cepcnd2..nt, lo. CO:..'1>::'::..'2.::..··
son du speotre o.. u produit d'extr2.ctiol1. avec le spectre c1 f unc cc:'u·~
tion de berb6~ine authentiquc a montré qu'il n'ya pns d'interfé-
rence de ces impuretés pour lus pics à 344 et à 421
nm~ Hous
avons donc ut ilisé ces d eux pics pour le dosage et nous [',vo:·~'::J :'CS'l:-
ré de cette façon une teneur rnoyonne cn borbérinc de l,4 p. co::C'c,
par ra~port au poids de matière sèche.
F,xTRfl..CTION
Si l t on songe à f,,~ire l t oxtr3.ction d'une substn...'1.ce d l 1.:1_0
::.:>la.n:to,
0 ~g~ de ~:C". be:.'bé:.':: uo,
on vuo cl 1 une epplicntion sur uno
cre.ncle écholle,
i l i'aut t::01.'.:vor une méthode qui soit économique" Ln
né-choC.o Clue nous utilisons au lo.bo:':"~è,toire (tabloc,u II) COl'JBiste-
à
séparer lGS prcxl ui"cs o:rga.niq uos en quatro fractions
(€;;rmssos
et ciree,
stérolstorpè:l.os, e.l.calo!:des non quaternaires ct o..lco.-
lo!des q1.1.atcrnairos)
cJe olle
implique l'utilisntion de plucio;1r8
produits ct solvantl3
lncido c::"itiquo
~ ammoniaquo, reinoo:rc..tc Q'c;:,_
monium, résine écr...o.:ngcuso d ~ ions. etc.) 0 Cette méthode ne GO ~L't·>;
pas par conséquE::nJ,; à U-.YJ.O utilis8,-r;ion sur une grande échelle
Dana la mé"thoG.0 que nous c~vons mis au point t ~1.0'L"UJ :f.~.'./_._'
sons l ' G::Jcraction de l a borbérino de Til rhYl1chocarpum DILLOn ct ,',.
RICH avec' C.e l'eau bou:i..l.lanto", Ce s oJ.V8.l.l.t~~~;:'~i~·~~;t·e"'pïus ic U1:'O ave.:::-
t a e e s :
J,tenu ne co'Llte pe.s cher; o'ost un bon solvant dG li~ "Ue:..'··
b6rine ct
c' cst un mauvais solvant dos autres aloalo.5:deG q'c.l.' on
trouve (:.:ns'la pl8.ntej"
car le prcduit d'extraction de le, p:...c,~_·:;e : c
contient qu t un nutre é"-lculoîdo,
à l t ét<:',t de tre.ces ~ probahJ_v_\\c:~.i;
la. macnof'lorinc~
-
2.91
?Lll.NTE
_.__._--_._--
1.) séchage
2) broyage
3) méthanol
~,
R60iclu
Fraction s olilblG
insoluble
dans 10 méthanol
1) 8vaporat ion
2) ac. citriqu(;; 5;:;
3) filtration
..-------1
Résid u
phase acido
insoJ.u.blo
extraction c.vcc
éther de pétrole
.r
-~-l
phe.so orb'8.l:1iquo
phase acide
extract~on avec CHC1}
-s.-----,------~
l')1J.:,è.SC
orcro'liquG
pha.se acido""
T:;.my.clill8 ET STEROLS
NH
OH/pH 8
==-:.~-==::::;:::::.::=;==-====:=======
4
extrection avec CHC~
f~·
phE'.se
------1
organique
pho.se ba..sique
1)
. .
1 /
nc. c~tr~que
pH 5
ALC.t..LOmES NON QUATERNAIRES
2) reineckate d' DXillD..
========~==================
3) résine échangeuse (ci)
~
ALCALOIDES QUi~TERNL.IRES
====================~==
TABLEAU
II
-
298 -
Lors d'un osscd préliminaire, nous avons ccnstct6 l::"'_:C;
la. plus grœ'ldo partie du prcduit passe 8,U tout début de ln 1:'crca
lo:tion. Ainsi
,
lors d'une percolation sur 9,98 g de poudro, nO"B
avons trouv5 5,l g dG :proo uit
solide d:-'ns los lOO premiers J,ll C_e
f i l t:L~;:;,t, 800 mg do pr ad uit
s olid e dans le El
900 ml suivc.ntn e<; C:; .. , .....
~ ''''''.Jo
do :,)rodl~it solide dr...rls los 1000 clcrniers ml. On pourr::.i-c (;.(;;'.c
réc.1uire 6vonlluellcmcnt 18 volumo de solvant à utiliser ct, ~y:.:'
conséquont, le volume de la solution à traiter pc.r l a sui-tG. :!::rr
10 g de ::;>oucl.ro, 1000 ml d 'cc.u bouiJ.lant e suffisant à o;:tr~~iro lo.
mo.jet:U'e partie de l a berbérine et i l ost certain qu'en o:;.)ér['.--t
sur U.:"1.C.. :c.JlUG gre.nde échelle C'.vec un percolateur plus sophistic."c'.ü
on pourr<:'.i t
réduire dc.v2.nto.ge le
rnpport volume du solvc..;;.yc/:')O:::/.D
de poudre~
~our r60upérer la b~rbérino contenue d2~s la solution
aquelmc, l'lOUB avons esscyé deux méthoèles.
Le, première ~éthode consiste & r6duiro le volwûo de
1<'. solu·[;~.on aquousc ct à effcctuor ensuite unG cxtr<:'.ction c on·cin1..:c
a~ c::lo:.:oi'orme. Les iili;?uret6s sont pratiquement insolubles d:::m.s
le
chloroforme, alors que la bcrbérine u
est légèrement soluble.
Le ~:;~:'ocluit obtenu est rclc.'civcmcnt Ji)ur et on peut le cristalliser
facilement dc~s le méthŒnol. Le rendement de l'extrcction ost
cependa.nt faible. l..insi, lors d'un essni sur 20 g de poudre, deYc.l'l"t
contenir 280 mg de bcrbérine, i l c. fallu extrc.ire l a solution
aqueuse à l'extracteur liquide-liquide pendent
65 heuros pour
obten~ 96 mg de berbérine~
La deuxième m6thodo c onsistG à éVr'.porer la Ilb.c.SO c.q-:..'.c. u:'c:
à sec et à reprendre;; le r6siliu de..I1s le méthe.nol. La bErbérine ;:;.::-c;
ben.ucoup plus so11ib1e c1~.ns le méthanol que lGS ir..'lpuretés C'[;:l ~c-.......t
éliminar une bonne pnrtiG
dos impuretés par fi1tration~ Le. c~~cc~
"tr<:'.tion de l a phase méthanoliquc à un petit volume amène l"~'~.'<':'~:"':·.
tian cI 'un nouveo.u précipité,
éliminé par filtra.tion. Le ooll'.ti:::.n
r.l0thanol:i.quG résultante contient pratiquement toute 12. beJ..~;y::':cL:-.e
(..;:Jc:r'[',i-co do la plante ct,
on plus, quelques impuretés. Lf', h,,:;.:"~:,::.·:.:.c.
criotalliso facilement do l a solution à
Îroid.
Nous travaillons préoentc-l11cnt à re,t't'inor J.c, nedl.Oc~.~"
de feçol1. :?L obtenir la bcrb6rine pure avec un bon rend Guc:.....J;; •