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82 -
Ill:: TUDE PRELIIJIINAIRE DE QUELQUES EFFETS
0AlIDIO-VA8CULAIR8S D' EXTRA.ITS DE GBOPEILA oBV.AI.J:ATA
--~---------~-~~--
(Rubiacées)
par K~ KREHER ,
L. COME:AU
,
J .K. AKA ,
B. AGOH'
et R. TRICOCIill
Une étude des effets c~rdiovascu18ires a été entrepris€
ehez
le lapin et le Rat
blanc à piJrtir d'extraits de Geo'p&J.a. o~J.;I..~
Rubi;,oée utilisée par les Oubis du Sud Ouest de ln Cete d'Ivoire
e omme oontre-poison et comme subst~>nce anti-pyrétique et anti-abortive ~
Une première série d' exoo r Leric ee a montré que l'ex'l;rait
méthanolique t~tal (20 mg/ml) ent~G1nait une hypotension et une
légère ~coélération du rythme respiratoire.
Au niveau du muscle cardiaque, l'extr~it dilué (0,5 10-2 mg/
ml) présente un effet inotrope positif et chronotrope né~~tiÎ alors
qu'à forte concentro,tion ( 10 mg/ml), nous observons des effets !no-
tropes et chronotropes nér;:, tifs qui entraînent l ' 8.rr~t cardiElrttuê ~
L'nnalyse qualitative ,Je l'extrait totç:l.l par- chromatogro.phie
sur couche mince nous 2, permis ~ obtenir trois fractions A, B, C~
Aux faibles concentrations (0,5 10-2
mg/ml) seule la fraotion A,
présente les m~mes effets que l'extrait total. Une étude est en cours
pour déterminer le principe cardioactif qui ne sembler~it pas ~~e
d'origine or83,nique.
Une partie de cette étude a été supportée par le Contrat du ~Knistère
de la Recherche Scientifique
: OP 38-01
: "Substances Naturelles
à
usr'.ges phe-rmaceutique et cosmêtique de Cô t e d'Ivoire".
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J;NTRoDUCTIo..lI 1
L'étude des substances ria t ur-e Ll.e a issues de l..2. J)h2.rmaooplle
africaine es·i; effectuée la plu:p.'''.rt du -temps en ten,,:mt compte de tests
chimiques préalables, permett2vnt d'orienter le chercheur vers une
famille de composés ch Lmd.que s b i.on définis
(alcaloïdes, glycosides,
flavonoides,
etc ••• ).
L..q présente étudG,
conduite conjointement par les servioes
de Chimie Organique-BiologiquG et de Physiologie Animale de la
Faoulté des Sciences d'Abidjan, prend comme origine un soreening ohi-
miophysiologique exécuté sur ill~e quinzaine de plantes m6dicinales
ivoiriennes récoltées p'.r Morio i.e uz- AKE Assi du laborc'.toire de Bo"tan.i·-
que, Directeur de l'Institut de floristique de l'Universit6~ Parmi
eelles-ci, certn.ines se sont révél{)es très o.o-t Lv o a au n Lverxu des
tèsts physiologiques et ont montré ~ l'analyse chimique, l8 présenoe
d'hétérosides ou d'o..lcaloïdes. D':Lutres, quoique présentant des pro-
~ié~és oardio-toniques très nettes, n'ont rien révélé de pcrtieu-
~icr à l'cmo..lyse chimique.
L'isolement des substances a donc été entrepris en étudi~t
,haque e:rou:'Je de produits extr,::,its de la plante au moyen de tests
physiologiCJ.ues c<!,r':tctéristiques.
Il TECHNIQ!JE, ŒQ;NI;RALES
A) r~~tériel ~égétal
Les extrc'.its testés ont (,té obtenus à pc"rtir de qeOJ?&la
5<.b;v:.apata; (Rubiacées) qui est une JJJ.cmtG herbacée ra.mpante, commune
d2~ le sous-bois des :for~ts denses dG la Cete d'Ivoire.
Les Oubis habitant ln ré:'l;ion de Taï d arie le Sud-Ouest du
pays, J_n. o ormc.Lasient
sous le nom v oz-rra c u.La.Lr-e de Ba.ohoud.n , Pour faire
tomber la fièvre,
les Oubis sc frictionnent 3vec les feuillGs triYa-
~os ot mé:L..-..ng6es à. do l' huile de :o:;lme. Ces feuilles triturées et
délayées dans l'eau constituGnt pou.r les Oubis un contrepoison, on
utilisées en lavement, présentent des propriétés anti-abortives
(É~ ADJANOHOUN et L. AIŒ Assi 1970 : P'Larrte s ph:.rmaceutiques de Ceta
a'Ivoire et L. ARE Assi : ConrrDunic~tion personnelle).
B) ï~ohnigues physiologiques
Deux types d'expériences ont été réalisés.
1ère e:;::p6rience : Enregistrement Il in si tu" sur cylindre enfumé de le.',
Pr~i;~-artérielle et de ld respir~tion chez le l~pin anesthésio nu
oQrbam~te d'éthyl (40%).
- La pression artériGlle est enregistrée par la méthode
sanglante, l~ carotide étant reliée nprès intub~tion à un manomètre
à meroure de Ludwig
-
La respiration est
enreGistrée en circuit fermé aveo un
appareil dérivé de celui de Bénédicte. Le gaz carbonique est ~bsorbé
pnr de la ohaux sodée. Les variations du volume d'bocygène sont trûns-
crites cur le cylindre p~r l'intermédiGire d'une capsule nanométriquc
__
..:t_
11.,"="
1
~
_ ~
... 84 ...
... Les produits à tester Gont dilués d~s du liquide physio-
logique héparine:':, du type ~hc Ew o n ,
puis injectés dans la c Lr-ou.Lcvt Lori
sanguine pc',r la veine saphène ~
2ème expérience
:
Enregistrement
"in vitro" de l'activité mécanique du
;;;-~~;ïZ-Zt-perÎuséde Rat blanc.
Lei. survie du coeur isolé es-t; L'.ssurée pour plus::.eurs heures
pnr urie perfusion coz-onrvr-Lonn o ,
p,y-
J.' intermédiaire d'une
ce.rru.Lc Gor-
Jeique, avec du liquide physiolou;icjue héparine,
c~~èrbogén6(barbotage de
95 5; 02 + 5 7; CO ) , dont 18 pH est voisin de 7,4 et 10- température
2
égale a
33° C~
L':l.ctivité mécanique peut
~tre enregistrée, soit à l'8.ide
d'un levier isotonique,
sur cylindre eDÎumé
;
soit au moyen d'un trans-
duote'LU' optique qui transforme cette iJ,ctivité mécanique en un phénomène
é
Le o'tr Lq'ue v La uo.Ld.oo.b.Lo Sl.r l'6cr, 'n d'un oscilloscope cathodique ~
0) l.echnigue d' extr2',ction contrôlée de Geopp.y:la obv2:-11at.~ 1
D~ns un premier temps, l'extraction n été conduite au moyen
de solVGnts de polarité croiss~nte.
I.e p.La.nt.c entière (feuilü::s, tige et racine), sé chée au
tunnoJ. chE',uff",nt dur1nt 48 ho ur-e e
eGJc br-oyé e ,
et l'extraction est ef-
feotuée rvu lixivie..tev..r.
Une première extrL',ctionl, l ' héxane donne après élimino..tion
du a o.Lvrvnt
,
uri r{~sidu huileux .i.rir: cc i.f", De même l ' extro,c-tion suivante,
par Le ch.Loz-ua-o de mjthylène, ne d onrio qu'un produit p:~teux, e arre
e,ctivi-l:;é. Une [~rf..l.nde p';\\'rtie des chlorophylles se retrouve d :111.8 oet
extrC'..it.
Ui. troisième extr::\\ctio:n cct conduite au métho.nol, la poudre
de plante,
préalablement d6barass6e des dernières traces de ohlor~~e de
méthylène est extraite p,",r le nv:5th~,nol, à trois reprises, durant 24
heures~ JJI 6 vc.p o r o; i:; i o n du solvant conduit à un résidu brnn~JerG, pt'tteux,
c orrt onc.rrt encore des pigments. Ce1..L'C-ci sont éliminés par préci~9it;ation
à. llQ,oét{é~te de plomb, en milieu hydro-c1.lcoolique~
Darre urio pre,;lière étude l ' extr,',i t1.6thanolique,
débo..rassé d o ses chlo-
rophylles a
été testé directement.
D) :er.::\\'ctionnement de J_ 1 extré:"-; ttoto.l de Geophyl~1. obvrÜlc,tp, 1
LI a:nalyse quali tc,tive pc.r ch:romatographie sur couche mince
de silice, montre que cet extr,.-..i t
-i:;ot,~,l contient un grand nombre de
substances r.:jvélées IX1.r ll,',cide sulfurique concentré. Deux dl en-tre
elles p~'é::sen-Gcn-t; en U ..V. une fluorescence bleue. Dans le but de 10c2.-
liser J_GD ~)roduits c.c t Lf'e ,
nous
effectuons une ch.romatoeraphie en cou-
che mince :9rép:.,yo,tive sur silice, .vv o c pour
Luarrt le 1l16J.o,n,zc chlorure
é
de mü~hylènc-méthanol.
- 85 -
Nous soparons trois fractions
A,B,e telles que ••
/
0
/
R
A
,..
0,45
....,-~
f ---------
:".".
0,45
/ '
R
B
" , /--
0,7
---
f ---------
/~.
.,-
0,7
,~,
R
e
~
/ '
1
f ---------
' .
........,.
Après réoup6r~tion des produits constituants ces fractions, ceux-ci
son~ testée sê~1rément.
T:LI, ;RIiSULTATS DES TRETS :PHYSIOLOGISUES
1ère exp~rience ( Fig~ 1) L'extrait total (20 mg/ml) provoque
~e hypo-
~~~-~-~-----
tension de l'ordre de 1 cm de mercure, progressive et réversible, sv~
grande modification des différents t~pes d'ondes.
Les mouvements rcspir;,to ires du Lapin enregistrés parallèle-
ment présentent une légère accélération pendant l'hypotension.
2ème exp6rience :
-----------------
(Fig. 2) Les effets de l'extrait total sur le ooeUl~
isolé et perfusé de Rat blanc sont vo.riables suivant . J.es
ooncentra-
tions utilisées
:
2
Llextrait dilué
(0,5 10-
mg/ml) augmente l'amplitude des
contrdctions (effet inotrope pOGitif de 50%) et
diminue le rythme
oardiaque (effet chronotrope né~\\tif) de 260 à 40 battements/ minute~
L'extrait concentré
( 10 mg/ ml) diminue l'amplitude et le
ry-l:;hrne des contractions
(effets inotrope et chronotropc nêGDtifs)
jUSqè.J.'à l ' arr~t c,-,.rdiaque en diastole aprè s 10 secondes.
Toue ceo effets sont réversibles.
Les effets des -trois :fr,'.ctions de l'extrait toté'-l de Geo:Rl~"""'"
'l_~
~~lata
ont été étudiés principalement sur l'activité mécanique du
coe ut' isolô et perfusé de Rat blanc.
Aux fartes concentr~tions ( 10 mg/ ml), les trois fraotiollli
présentent des effets' ino-tropes et chronotropes négntifs (F:i.g~ 3), sans
aller toutefois jusqu'à l'arr~t cc:.rdiaque.
-2
.
... Aux faibles concentrGtions
(0,5
10
mg/ml), les frao-
tions B et e produisent les m~mes ~ffets qutaux fortes conoentrations ;
par contre (Fig. 4), seule la fraction A augmente l'amplitude des con-
trac-'cions
(comme le fais2.it l ' extr;-,it
total). En fonction de ces ré...
sultats, no~~ no~~ attachons actuellement
à isoler le produit le pl~ill
intôressan.t qui semble se tr'ouver d arie La :!t'action A.
Une première série d'expériences sembler~it montrer que cette
fraotion  ne possède auc~m principe actif d'origine organique, bien
que ùes cristaŒ~ isolés à p2xtir de cette fraction entr~~en~ les m~
mes effets que l ' extrait -totel.l.
-
86 -
CQNC;HllSION
.ft-:
G.r~ce aux efforts conjugués de deux équipes de cherCheurs
apparte~:e.nt à deux disciplines différentes, nous avons pu isoler une
substance il activité cardiotonique pr6sente dons une plLmte de la phar-
macopee ivoirienne:
Geo~~l~obvallata (Rubiacées).
Cette plante, apparermncnt, ne
contenait aucun procl ui t
appar-
tenant rvux familles ch.lrnâq uce c Irve a Lque e ,
L'expcSrience a
pourtant
montré qu'LIDe substance cristallisable semblerait ~tre à l'origine
de son 8.ctivité. L'étude de cette s-ubstance est actuellement en cours
et ser8 publiée incessamment.
I l serait souhaitable que cert8.ines plantes de la pllardaoo-
pée africaine clc\\.ssées " s::m s
int0r~t" par les Chimistes en r.~1.ison do
l'absence de IFcduits bien définis, soient reprises à
la lULliare de
leL~s l~opriétés thérapeutiques et étudiées en fonction, non pas de ln
nc.t1..!r'e des substcmces qui peuvent y
être trouvées, ma.Le en fonction <le
leurs ap91ic~tions médicales possibles. Toute pl~nte utilisée pc~r h~
médecine
tradi tiormelle d evz-o.L t
i':l.ire l'objet d'une analyse chimique
exhL~~~~ive afin de détenniner p~rmi les substances d'origine orRnnique
et S2ns o~b~ier les substances d'origine minérale, le principe actif~
•
.... 87 -
LE:GENDES DES FIGUREjS
--------------------
Act ion Extr~,it
'1:; ot o.L
( 20 mg/ml)
bill:'
Pression artôricùle et Rcspirc1toire.
2
Action E:~trait tot,"ü (0,5. 10-
mg/ml)
sur activ i t~~ mô cnrii.qu o
coeur iso16 Rat ~
Action Fractions A,B,e
(10 ma/ml)
sur activité m6canique
coeur isolé ~qt~
!,i,gure 4: :
A\\,,....."-'U -t_. ,. ..,·,
~_L,
F-'., .,_....
L. ~,.) ..
.....' ,_.
A (0_ 5'10-2
. , .
mg/ml)
sur activité mécanique coeur isolé Rat~
fig 1
fig2
4 sec
7
EFFET
SUR
LIE.
C.
G.
DE
CHAT
--------- ~ - - - - - - - ~ - -- ---------- - - ----