.. Sciences et ~édecin·e
Etude des proprlétésantlanémlques de.Justicia secundo
Vahl (Acanthaceae) chez des rats de souche Wistélr
TOSSOU R.2, GBENOU J.O.
2
1, DANSOU p' , FOSSOU M.2, MOUDACHIROU M. 7
kW
RESUME
Iusticia secunda Vahl est une plante de la famille des Acanthaceae. Elle est communément appelée « hounsiman» plante qui donne le
sang en fongbé et est utilisée au Bénin pour lutter contre l'anémie.:
Notre étude a pour objectif de connaître les différentes composantes chimiques de la plante et de tester les propriétés antianémiques
de l'extrait hydroalcoolique sur des rats Wistar, après induction de l'anémie par la phénylhydrazine chlorhydrate.
L'analyse phytochimiques, a révélé la présence des alcaloïdes, des tanins, des ilovonoides, des anthocyanes et des leucoanthocyanes.
L'administration de l'extrait hydroalcoolique par gavage aux rats anémiés aux doses de 1000 mg/kg/j et 2000 mg/kg/j a entraîné une
augmentation du taux d'hémoglobine, du nombre de globules rouges et de l'hématocrite.
L'hémolyse des rats traités à l'extrait est inférieure à celle des rats non traités tandis que leur résistance osmotique est élevée. Ce qui
indique la présence de plus de jeunes cellules chez les rats traités que chez les rats témoins.
Ces résultats confirment et valident l'indication thérapeutique de Justicia secunda Vahl dans la lutte contre l'anémie en médecine
traditionnelle.
Mots clés: lustkia secunda, anémie, extrait, hémoglobine, globules rouges, hématocrite, résistance osmotique.
SUMMARY
Secunda vahl lustkia tsan Acanthaceae plant.tt is commonly called "hounsiman" in fongbé and it is used in the treatment of anaemia
in Benin.
The aim of this study is to identify the different chemicat components groups of this plant and to test its antianaemic properties in
Wistar rats, after anaemia induced by the use of phenylhydrazine chlorhydrate.
Chemical analysis of the components of the plant revealed the presence of alkaioids, tannins, ûavonoids, anthocyanes and leucoan-
thocyanes.
The administration of hydro-ethanolic extract of secundo vahl Justicia to the anaemic rats at doses of 1000 mg/kg/day and 2000 mg/
kg/day for 13 days has increased the haemoglobin ievels, the number of red cells and the haematocrit.
Haemolysis in rats treated with the extract is lower than in non-treated rats, whereas their osmotieresistance is high. This finding indi-
cote the presence of younger cells in the treated rats than in the non-treated rats.
Ihese results confirm the therapeutic indication of secundo vahl Justicia for treating anaemia in traditional medicine.
Key words: Secunda vahl lusticio, anaemio, hematological data, osmotic resistance.
if
•
INTRODUCTION
Dans ce travail, nous nous proposons d'étudier les
L'utilisation des plantes à des fins thérapeutiques est une
propriétés
antianémiques
de
Justicia
secunda
Vahl
pratique multiséculaire. En cela Kassel (2003) affirmait: « Très
(Acanthaceae) une plante qui contiendrait des substances
tôt, au cours de l'évolution, les hommes, pour se soigner,
chimiques pouvant avoir
un effet de résorption sur
utilisèrent les ressources présentes dans leur environnement
l'anémie.
naturel >J.
Plusieurs travaux ont été réalisés sur les propriétés
1. MATÉRIEL ET MÉTHODE
biologiques des extraits de certaines plantes et ont permis
1.1 Matériel
la découverte de nombreux principes actifs utilisés en
1.1.1- Matériel animal
médecine moderne.
le matériel animal est constitué de rats albinos de souche
Wistar de poids corporel moyen 154,14 g, ayant libre accès à
Dans la riche et diversifiée flore du Bénin, Hibiscus
l'eau et la nourriture et acclimatés aux conditions d'élevage
sabdariffa,Tectona grandis, Justicia secunda et bien d'autres
de l'animalerie du laboratoire d'Expérimentation Animale
plantes sont connues comme ayant des effets de résorption
de l'Unité de Biologie Humaine de la Faculté des Sciencesde
sur l'anémie. l'anémie qui se traduit par une baisse du taux
la Santé (FSS), siseà l'ISBA(Institut des SciencesBiomédicales
d'hémoglobine en dessous de 12 g/dl est fréquente en
Appliquées) au champ de foire de Cotonou.
milieu tropical; 10 à 20% de la population a moins de 10 g/
dl hémoglobine (Gentilini M., 1993).
(a 7}Laboratoire de Pharmacognosie et des Huiles Essentiel/es, FSS-
Ces plantes pourraient être utilisées en lieu et place des
FASTIUAc, 01 BP: 188Cotonou, ISBA Champ de Foire, Bénin.
produits pharmaceutiques devenant de plus en plus chers
(2)Centrede Recherche desActivités Physiques et Sportiveset Motricité,
pour la population indigène (William A.O., 1985).
INJEPSIUAC, 01 BP: 169, Porto-Nova, Bénin
26
Rev. CAMES - Série A, Vol. 06/2008
Sciences efMédeéine
7.7.2- Matériel végétal
Tableau nO l . Variation du taux d'hémoglobine
Il est constitué d'extrait hydro alcoolique de Justicia
Taux d'hémoglobine (g/dl)
secunda Vahl récoltées dans le Mono à Honhoué dans la
Tests
commune de Houéyogbé dans le courant de janvier, février
JO
J2
J7
no
J15
2005, La plante est identifiée et authentifiée à l'Herbier
National de l'Université d'Abomey Calavi.
Témoin
13,5 ± 2,57
7,6± 3,33
9,6t 1,33
11,1 tO,17
12,88 ± 1,95
Variation
-43,70% "
+26,31% b
+46,05%b'
.+69,56% b'
1.2 Méthode
:;
7.2.7- Préparation de l'extrait
D11000
12,9± 1,86
6,9±4,14
9,9± 1,14
11,91 ± 0,87
13!63± 2,59
Laphase préparatoire aconsisté d'abord en la préparation
mglkg/
jour
de l'extrait hydro alcoolique avec un rendement de 2,85%,
Variation
-46,51%"
+43,47%b
+72,63% b'
+97,63%b'
ensuite à l'analyse chimique de la plante, basée sur des
réactions différentielles de coloration et de précipitation,
D22000
12,30± l,56
6,5±4,24
10,1 ±,64
11,88 ± 1,14
12,92±2,18
selon la méthode de Peter J.Houghton et al. (1996).
mg/kgf
jour
7.2.2- Protocole expérimental
Variation
-45,52%"
+55,38% b
+82,89%b'
+98,82%b'
Quatre lots de 6 rats ont été constitués: les rats témoins
a, pourcentages de variation par rapport au jour JO,
blancs, les témoins négatifs, les rats ayant reçu 1000 mg d'
b : pourcentages de variation par rapport au jour J2
extrait par kg de masse corporelle (lot Dl) et rats ayant reçu
• .Différenœ significative (p < 0,05)
.
2000 mg d'extrait par kg de masse corporelle par jour (lot
que la dose de 2000 mg/kg/j permet une récupération plus
D2).
rapide.
Au cours de la phase d'expérimentation, nous avons
dans un premier temps prélevé le sang des rats par ponction
3.7.2 Globules rouges
des veines caudales,induit l'anémie par l'administration par
Après injection de la phénylhydrazine, il y a eu une
voie intra péritonéale de 40 mg/kg/j de la phénylhydrazine
diminution de globules rouges dans les trois lots (44,36% ±
chlorhydrate (Naughton B.A., 1995) pendant deux jours (Jo
2,81) au jour J2.
et Jl). Nous avons aussi administré par gavage aux rats des
Une augmentation du nombre de globules rouges est
lots Dl et D2 respectivement 1000 mg/kg et 2000 mg/kg)
observée après traitement les jours suivants.
de l'extrait hydro alcoolique de Justicia secunda Vahl de J2
à J15. Les paramètres hématologiques (Genetet B., 1989;
Les résultats montrent que les rats du lot Dl ont presque
Ganong W. E, 2001 et Descat E, 2002) ont été dosés aux
totalement récupéré au jour J15 (98,11% de récupération)
jours JO, J2, J7,J10 et J15 au niveau des trois lots de rats:
et que ceux du lot D2 ont totalement récupéré au jour J15
lot Tn (rats anémiés), lot Dl et lot D2 à l'aide d'un compteur
(100,28% de récupération) (Tableau 2).Parcontre le taux de
automatique des cellules sanguines (Sysmex KX 21) et les
récupération n'est que 70,37% chez les rats témoins anémiés
variations ont été calculées par rapport aux valeurs de J2.
non traités. Les résultats montrent également que l'extrait à
Enfin, nous avons étudié la résistanceosmotique des quatre
dose de 2000 mg/kg/j permet une meilleure récupération
lots de rats constitués: lot Tb, lot Tn, lot Dl et lot D2, selon le
comparée à celle de la dose de 1000 mg/kg/j.
protocole de Redondo (1995) au jour J7.
Tableau n02 'Variation
.
du nombre de globules rouges
7.2.3 Analyse statistique
.
Nombre de globules rouges (n x 106/111)
Pour l'analyse des résultats obtenus, nous avons utilisé le
Tests
logiciel Epi Info 6.11 a été procédé au test ANOVApour vérifier
JO
J2
J7
JlO
J1S
la normalité des variables. Les comparaisons des valeurs
moyennes des différents paramètres ont été effectuées à
Témoin
6,93±1,34
4,05 ± l,54
4,49±1,10
5,6 ± 0,01
6,90±1,31
l'aide du test de Student. Le seuil de signification a été fixé
à p < 0,05.
Variation
-41,5So/o"
+10,86%b
+38,27%b
+70,37%b'
..'
D11ooomg/ 5,93±0,76
3,18± 2,00
4,87 ±0,30
S,60±O,42
6,jO ±
III. RÉSULTATS ET DISCUSSION
kg/jour
':124
3.1 Résultats
Variation
-46,16"
+53,17%b
+76,1 O%b'
+98',1 1%b'
3.1.1 Effets sur les paramètres hématologiques
L'administration de la phénylhydrazine a provoqué au
D22000
6,31 ±0,62
3,46± 2,23 5,47 ±0,22
6,3±O,61
6,93±1,24
mg/kg/jour
jour J2 une diminution significative (p == 0,0088) du taux
d'hémoglobine chez les rats des trois lots de 45,24% ±1,54.
Variation
-45,52"
+58,17%b
+84,68%b'
100,28%b'
Après traitement une récupération progressive est
a : pourcentages de variation par rapport au jour JO.
b 'pourcentages de variation par rapport au jour J2
obtenue lesjours suivants (Tableau 1).Lesrésultats montrent
• : Différence significative (p < 0,05)
d'une part, que les rats ayant reçu l'extrait hydro alcoolique
3.1.3 Hématocrite
de Justicia secundo Vahl ont presque totalement récupéré
L'administration de la phénylhydrazine a aussi diminué
au jour J15 (p < 0,005 pour les deux doses) et, d'autre part,
l'hématocrite au jour J2. Cette diminution est de 14,79%,
27
Sciences et Médecine
13,14% et 12,46% respectivement chez les rats témoins, les
IV. DISCUSSION
rats du lot Dl et du lot 02.
L'administration de la phénylhydrazine a provoqué une
baisse moyenne significative du taux d'hémoglobine, du
Après traitement l'augmentation de l'hématocrite au
nombre de globules rouges et de l'hématocrite. Nos résultats
jour J7 est de 32,91%chez les rats témoins, 33,08% chez les
sont proches de ceux de Ryu et Yook (2002) qui ont observé
rats du lot Dl, et 33,39%chez les rats du lot 02. Au jour J15 il
quant à eux une diminution du nombre de globules et de
est de 37,32%chez les rats témoins; 39,25% chez les rats du
l'hématocrite (respectivement de 50% et de 55%) avec une
lot Dl, puis 39,67% chez les rats du lot 02 (Tableau 3).
administration de phényhydrazine de 40 mg/kg/j pendant 4
jours chez les rats Sprague Drawley.
Tableau n03 •.Variation de l'hématocrite
En effet. dans notre étude, au jour J15,les rats ayant reçu
Hématocrite ("Al)
l'extrait ont presque totalement récupéré (p < 0,005) alors
Tests
que ce n'est pas le cas chez les rats témoins. Criswell et al.
JO
J2
J7
Jl0
J15
(2000), Ryu et Yook (2002) puis Redondo et al. (1995) ont
Témoins
35,0± 3,13
20,21±11 ,66 32,91±1 ,04
33,93±2,06
37,32±5,45
aussi observé cette réversibilité de l'anémie induite par la
phénylhydrazine à l'arrêt de l'administration.
Variation
-42,23%"
+62,84%b
+67,90%b
+84,66%b"
Les résultats montrent que les rats du lot 02 ont
totalement récupéré en ce qui concerne le nombre de
Dl 1000
32,99± 1,11
19,85±n.03
33,08±I,2
34,26±2,38
39,25±7,37
mg/kg/jour
globules rouges au jour J 15,
L'hémolyse des globules rouges au jour J7 des rats ayant
Variation
-39,80%"
+66,67%b
+72,61%b'
+97,77%b'
reçu en IP la phénylhydrazine chlorhydrate est inférieure
à celle des rats normaux. En revanche leur résistance
022000
33,4± 1,27
19,94±12,19 33,39±1,26
34,68±2,55
39,67±7,54
mg/kg/jour
osmotique est supérieure. Nos résultats sont comparables à
ceux de Redondo et al. (1995).
Variation
-45,52%"
+67,49%b
+73,95%b'
+98,98%b'
a : pourcentages de variation par rapport au jour JO.
Les hémolyses à 50% (H50) des rats normaux et des rats
b: pourcentaqes de variation par rapport au jour J2
• : Différence ~Ignificative (p < 0,05)
anémiés non traités étant supérieurs à celles des ratsanémiés
traités à l'extrait de Iusticia secundo Vahl, nous pouvons dire
3.1.4 Résistance osmotique
qu'il y a plus de cellules résistant à l'hémolyse chez les rats
La détermination de la résistance osmotique a permis de
traités que chez les rats non traités. Cette augmentation de la
constater que les concentrations de NaCl à 50% d'hémolyse
résistance osmotique des globules rouges des rats est due à
sont de 0,470% pour les rats (normaux) (Tb), 0,445% pour
la présence de cellules jeunes dans le sang.L'administration
les rats témoins anémiés (Tn), 0,405% et 0,375% pour
de l'extrait de Iusticia secundo Vahl a donc augmenté la
respectivement les rats du lot Dl et du lot 02 (Figure),Ainsi,
production de jeunes globules rouges,
au jour J7 (p =0,025), les globules rouges des rats traités
résistent plus à l'hémolyse que ceux des rats non traités.
L'analyse phytohimique a révélé la présence des
grands groupes chimiques que sont: les alcaloïdes, tanins,
flavonoïdes, anthocyanes et leucoanthocyanes. Îls ont un
110
pouvoir antioxydant, favorisent la régénération des tissus,
::
100
l
diminuent la perméabilité des capillaires sanguins et
1
~ 90
e
80
renforcent leur résistance à l'hémolyse (J. Bruneton, 1999).
1
70
;,
La présence de ces grands groupes chimiques de par leurs
co
80
..
propriétés.justifie la résistance des globules rouges des rats
E 50
traités à l'extrait.
c
40
~ 30
o
Les anémies sont fréquentes en milieu tropical; 10 à
'IL
20
1
10
20% de la population a moins de lOg/dL d'hémoglobine.
i
_=~~~~~-,
1
0 +--,------,--------,-,---,-~
Lesfemmes enceintes et les enfants constituent les groupes
!
0
à haut risque, Le paludisme, les parasitoses,les carences en
Concentrations de NaCI (%)
acide folique en sont les principales causes. Iustkia secundo
Vahl pourrait être conseillée pour lutter contre l'anémie.
CONCLUSION
Figure: Courbes de la résistance osmotique des
L'injection de laphénylhydrazinechlorhydratea provoqué
globules rouges au lour J7
une anémie hémolytique caractérisée par la diminution des
paramètres hématologiques. L'administration de l'extrait de
De cette observation nous,déduisons qu'il y a présence
Iustkia secundo Vahl par gavage à des doses de 1000 mg/
de plus de globules rouges jeunes chez les rats traités que
kg/j et 2000 mg/kg/j a augmenté de façon significative le
chez les rats non traités.
taux d'hémoglobine et le nombre de globules rouges au
28
Rev. CAMES - Série A, Vol. 06,2008
Sciences et Médecine
jour J7.La dose de 2000 mg/kg/j a permis une récupération
s- GENTILINI M., Médecine tropicale. Flammarion, 5e éd, Paris,
complète (100/28%) du nombre de globules rouges des rats
510-537 (1993).
au jour J15.
L'extrait, du fait des propriétés des grands groupes
6-
JEAN
BRUNETON,
Pharmacognosie-Phytochimie
Plantes
médicinales, 3 éd. Tech et documentation éditions médicales
chimiques qui y sont présents, a permis, à cause de la
(1999).
régénérescence de jeunes cellules une meilleure résistance
des globules à l'hémolyse.
7- NAUGHTON B. A., MOORE E., BUSH M. E., LAPIN D. M. and
DORNFEST B.S., Hemostatic alterations associated with
Nos
résultats
confirment
et
valident
l'indication
phenylhydrazine - induced haemolytic anaemia. Eur J Clin
thérapeutique traditionnelle des feuilles de Justicio secundo
Invest. 25: 722-727(1995).
Vahl dans la résorption de l'anémie. Cette plante pourrait
donc être conseillée pour lutter contre l'anémie.
8- PETER J. HOUGHTON and AMALA RAMA,
Laboratory
Handbook for the Fractionation of Natural Extracts (1996).
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29