·Sciences.et MédÊ!'cirie
Evaluation des marqueurs. du stress oxydant dans une
populationde Hanseniens en Côte d'Ivoire
CAMARA C.M.*, DJESSOU P**, MONDÉ A.A.* ,LOHOUES E.C., DJOHAN y. F.*, AKA A.***, SESS ED. *
RESUME
Objectif: L'objectif de cette étude était de vériiier l'influence réciproque éventuelle entre la lèpre et le processus de
lipoperoxydation ou de mise en branle du stress oxydant.
Matériels et méthodes: il s'agissait d'une étude transversale cas témoins qui a inclus 40 patients atteints de maladie
de Hansen déjà sous traitement polychimiothérapique à l'institut Raoul Follereau d'Adzopé et 34 témoins sujets sains,
Le niveau moyen de lipoperoxydation a été déterminé chez ces patients par le dosage des TBARS selon la méthode
spectrofluorimétrique de YAGI modifiée par SESS et coll.
Résultats: Al'issue de cette étude, nous avons constaté que:
le taux moyen de TBARS chez les malades (2, 77 ± 0,87 nmol/ml) est siqniiicativement plus élevé que chez les témoins (7,56
± 0,36 nmol/ ml) ..
Les paramètres biochimiques standards dosés, avaient des taux moyens inclus dans les limites des valeurs normales,
Conclusion.' Des radicaux libres sont produits dans la maladie de Hansen et semblent entretenir un stress oxydant par
la longévité du bacille de Hansen dans l'organisme du lépreux; l'adjonction d'antioxydants au tratemement spéciiique -,
pourrait améliorer cette situation.
Mots clés: Radicaux libres, stress oxydant, lipopéroxydation, lèpre, maladie de Hansen
SUMMARY
Objective .' this study aimed to check the possible reciprocal influence betweeri the leprosy and the process of
lipoperoxydation or setting in swing of the oxidizing stress.
Materials andmethodsitwas about a cross-seetionalstudypilotcase which relatedto 40 lep ro us underpolychimiotherapy
at the institute Raoul Follereau of Adzopé and 34 witnesses supposed healthy. The mean level of lipoperoxydation was
given among these patients by the proportioning of the TBARS according to the spectrofluorimetric method the YAGI
Results: has the resulting one from this study, we note that .' - the average rate ofTBARS is signincantly higher among
patients than at the witnesses (2,77 ± 0,87 nmol/ml versus 7,56 ± 0,36 nmol/ml). - the standard biochemical parameters,
showed average rates included within the limits of the normal values.
Conclusion: The free radicals are produced in the Hansen disease and seems to main tain a stress oxidizing by longe vity
the bacillus of Hansen in the body of the leprous one.
Kev words : tree.radkats. stress oxidizing, lipoperoxydation, TBARS, Hansen disease
.
INTRODUCTION
Le
stress
oxydant
serait
impliqué
dans
de
Les radicaux libres sont des espèces chimiques
nombreuses pathologies notamment le cancer [02], le
(molécules,
atomes
ou
ions)
dont
la
couche
VIH-SIDA [08], la drépanocytose [la], le paludisme [02],
périphérique contient un électron non couplé (électron
et accessoirement la lèpre ou maladie de Hansen [06,
dit célibataire) qui les rend très instable [04].
09].
.
Produits
dans
l'organisme
de
manière
Malgré son recul ces dernières années grâce à la
physiologique, ils peuvent également être générés
. polychimiothérapie dans le traitement des malades, la
dans des circonstances pathologiques.
maladie de HANSEN demeure endémique en Asie, en
Amérique latine eten Afrique.
Dans leur recherche de stabilité, ils s'attaquent aux'
, autres composantes cellulaires (ADN, macromolécules
et
surtout les
bicouches
phospholipidiques
des
membranes),
entraînant
ainsi . une. .cascade
de
"Servicede Biochimie Médicale du CHU de CocodyBPV 166Abidjan
réactions radicaiaires à l'origine d'un. stress oxydant .
"Service de Biochimie Médicale du CHU de TreichviJ/e
quand les moyens de défense de l'organisme s'avèrent
'''Actuellement au laboratoire de Biochimiede J'Institut PasteurCôte d'Ivoire
insuffisants [1].
Corresooadonce à massaracisse@ yahoo.fr
40
Rev~ CAMES - Série A, Vol. 04,2006
Sciences et Médecine
Eneffet,selon un rapport de l'organisation mondiale
~ Sur tube sec pour le dosage des paramètres
de la santé (OMS) en 1994, la lèpre toucherait environ
biochimiques
standards
(Urée,
Glycémie,
2.470.000 personnes dans le monde avec 283.000
Transaminases, Cholestérol, Triqlycérides.Créatinine)
cas estimés en Afrique parmi lesquels 15.000 pour la
~ Sur tube avec anticoagulant (rlèparinate de lithium)
Côte d'Ivoire qui en a déclaré officiellement 3.762 [06,
pour le dosage des TBARS.
. '
09]. La lèpre est donc un véritable problème de santé
publique dans nos régions.
Ib.2. Méthodes de dosage
Nous avons dosé l'urée, la glycémie, la créatinine,
Dans sa lutte contre le bacille responsable de la
les
triglycérides,
les
transaminases,
par
les
lèpre, l'organisme utilise, entre autres, les radicaux
méthodes enzymatiques usuelles sur un automate
libres comme moyen de défense.
multiparamétriques dont le principe repose
sur la
spectrophotométrie avec un système de gestion
Dans le souci de mieux connaître les caractéristiques
intégrée des résultats.
biochimiques de cette affection, nous nous sommes
proposés de vérifier l'influence réciproque éventuelle
La détermination des TBARS (Thio Barbituric Acid
entre la lèpre et le processus de lipoperoxydation ou
reactives Substances) a été' effectuée selon la méthode
de mise en branle du stress oxydant.
de YAGI modifiée par SESS et coll.(l 0).
la. MATERIEL
Il s'agit d'une méthode de dosage indirecte des
1a. 1. Cadre et type d'étude
.
radicaux libres. Elle mesure les substances issues
Il s'agit d'une étude transversale cas témoins qui
de la lipopéroxydation et réagissant. avec l'acide
s'est déroulée de Mars à Juillet 2004 d'une part à
thiobarbiturique (TBA).
l'institut RAOUL FOLLEREAU d'Adzopé (1 RFA) pour
le recrutement des malades et respectivement dans
Son principe est le suivant : chaque molécule de
le laboratoire de Biochimie de l'UFR des Sciences
Malon di aldéhyde (MDA) issue de la lipoperoxydation
Médicales de l'Université de Cocody pour le dosage des
réagit avec deux molécules d'acide thiobarbiturique
TBARS et Le laboratoire de Biochimie de l'Institut Pasteur
(Thio Barbituric Acid TBA). La réaction s'effectue en
de Côte d'Ivoire pour la détermination des constantes
milieu acide à la température de 95-100°C et conduit
biochimiques standards (urée, glycémie, créatinine,
à la formation d'un complexe de couleur rose. D'autres
cholestérol total, triglycérides, transaminases).
aldéhydes issus dela lipopéroxydation réagissent de la
même manière.
La méthode d'échantillonnaqe est de type aléatoire
systématique pour les malades et les témoins.
La coloration obtenue correspond à l'ensemble des'
substances réagissant (TBARS), cependant,les résultats
1a.2. Critères d'inclusion
sont exprimés en malondialdéhyde (MDA).
Les cas sont des patients atteints de la maladie de
Hansens
Ib.3. Méthodes de traitement des données
- pensionnaires de l'Institut Raoul Follereau d'Adzopé.
Nous avons utilisé:
- ayant un dossier médical à jour.
- Le logiciel Word pour le traitement de texte
- ayant répondu correctement aux questionnaires de
- Le logiciel Excel pour les courbes et graphiques
la fiche d'enquête.
.
- Le logiciel Epi info (EPI6) version française pour
l'analyse statistique avec:
Les témoins sont des parents de patients et des
r8J les tests de KRUSKAL WALLIS pour les comparaisons
agents de l'IRFA personnels soignant ou tout individu
de moyenne, et
présumé sain ayant ayant accepté de de participer à
r8J les tests de FISHER SNEDECOR pour larecherche de
l'enquete après consentement éclairé.
corrélation.
1a.3. Critères d'exclusion
'.
11- RESULTATS
Tout
individu
présentant
une
quelconque
2.1. desccription de la population d'étude
affection
susceptible
d'influencer
le
niveau
de
(tableau 1)
Iipoperoxydation,
o 30% de nos sujets ont un âge compris entre 41 et
- Pensionnaire de l'I.R.F. avec un dossier médical
50 ans,
incomplet.
o 20% de nos sujets ont un âge compris entre 21 et
30 ans,
.
,
lb. METHODES
o 15% de nos sujets ont un âge < 20 ans.
1b.I. Méthode de prélèvement
o L'âge moyen des patients est de 38,75 ans
5 ml de sang veineux sont recueillis dans différents
o Le sexe masculin est prédominant avec un sex-ratio
tubes chez le patient à jeun:
de 1,85 homme pour 1 femme chez les malades et
de 2,4 hommes pour 1 femme chez les témoins
Rev. CAMES - Série A, Vol. 04, 2006
41
Sciences etMédecine
Tableau "l,: Répartition des patients par tranches
Le niveau moyen de lipopéroxydation chez les
.,
·.d'âge et-par sexe
hommes n'est pas significativement différent de celui
.,' "
des femmes (tableau II).
Sexe
~anches.,:n .
"masculin l'
feminin;
TOTAL
'ages (am1ées) n
%
n
%
n
%
Tableau Il : Taux moyen de TBARS chez les malades
2,5
et les témoins
.
[10 - 20]
5
12,5
1
6
15
-
[21 - 30}
7
17,5
1
2,5
8
20
Population
Effectif
Moyenne
Ecart-
Limite
Limite
p
(nmol/ml)
type
inf
sup
[31 -40)
2
5.
3
7,5
5
12,5
[41 - 50]
6
15
6
15
10
30
Malades
40
2.153
0.871
0.98
4.920
0.0002
[51 - 60]
1
2,5
3
7,5
4
10
Témoins
34
1.559
0359
1.000
2.480
S
> 60
5
12,5
0
0
5
12,5
TOTAL
26
65
14
35
40
100
Letaux moyen deTBARS n'était passignificativement
Age moyen: 38,75 ans.
différent chez les multi bacillaires par rapport à celui
Sex ratio :1,85 hommes pour 1 femme.
des pauci bacillaires (tableau III).
2.Valeurs des paramètres biochimiques courants
Tableau III: Comparaison du niveau moyen de
(tableau II)
lipopéroxydation en fonction du sexe et de
Les taux moyensd'urée,de glucose et de cholestérol
la bacilloscopie chez les malades
sanguins sont sensiblement lesmêmes chez lesmalades
que chez les témoins tandisque les taux moyens de
Population
Effectif
Moyenne (nmoll
P
ml)
créatinine, des transaminases et des triglycérides
sanguins sont significativement différents de ceux des
Hommes
' 26
2,15
0,9569 N5
témoins sans être des valeurs pathologiques.
Femmes
14
2,16
Multibacillaire
22
2,14
Tableau
Il:, Taux
moyens
des
paramètres
Paucibacillaire
16
2,16
biochimiques standards et desTBARS chez
0,1649 N5
les malades et les témoins
Non précisé
02
2,50
Paramètres
Malades (40)
Témoins (34)
p
Par ailleurs, Il n'y avait pas de corrélation entre les
Urémie (g/l)
0,22
0,22
0,7031 N5
TBARS et les autres paramètres de notre étude.
Glycémie (g/l)
0,78
0,81
0,1311
N5
111- DISCUSSION
Créatininémie
8,97
10,06
0,0102
5
(mg/l)
3.1- Epidémiologie
30% des patients ont un âge compris entre 41 et 50
Cholestérolémie
1,586
1,584
0,7695
N5
(9/1)
ans, 20% ont un âge compris entre 21 et 30 ans, 15%
-
ont un âge < 20 ans.
'
ASAT (u1/1)
29,2
22,82
0,0045
5
ALAT(UI/L)
11,17
15,53
0,0194
5
L'âge moyen de l'échantillon de' malades est de
Triglycéridémie
38,75; Il s'agit alors d'une population jeune dans la
0,96
0,62
0,00000
5
(g/l)
force d'age de travail.
TBARS(nmol/ml)
2,153
1,559
0,0002
5
Le sexe masculinest prédominant avec un sex-ratio
Le niveau de lipopéroxydation des malades est
de 1,85 homme pour 1 femme chez les malades et de
significativement différent de celui des témoins.
2,4 hommes pour 1 femme chez les témoins.
3. Valeurs des marqueurs de la ipoperoxydation
La répartition globale de la population est en
(tableau II)
conformité avec les données de la littérature [09].
Chez les malades, le taux moyen de TBARS est de
2,153 nmollml avec un Ecart-type de 0,871 ; le taux
3.2- Paramètres biochimiques standard.
min était de 0,98 nmol/ml et le taux max de 4,920
3.2.1. Urée sanguine, glycémie, cholestérolémie totale
nmol/ml tandis que chez les témoins, le taux moyen
Le tableau
Il
ne
montre
pas de
différence
significative entre malades et témoins pour l'urémie,
était de 1,559 nmol/m] avec un écart type de 0.359 ;
la
cholestérolémie
totale
et
la
glycémie
avec
le taux min de 1,000 nmollml et le taux max de 2,480
respectivement, p urémie = 0,7032, P?olYCémie = 0,1314 et p
nmollml.
cholestérol total = 0,7695 au risque a = 50 0:
Le taux moyen de TBARSchez les patients est
significativement plus élévé que ceux des témoins.
Cette situation pourrait être le fait de la politique
42
Rev. CAMES - Série A, Vol.- 04 , 2006
Sciences et Médecine
de prise en charge des malades, menée par l'Institut
En outre la comparaison du .niveau moyen de
Raoul Follereau, politique qui vise à instaurer chez le
lipopéroxydation en fonction' de la bacilloscopie
lépreux en traitement, une prise en' charge rapide et -
. nous montre avec p =0,'649 que le type bacillaire n'a
totale de toute autre affection : Mais aussi résulte du
pas d'influence significative sur le niveau moyen de
tri des patients pour éviter l'interférence d'affections
Iipopéroxydation.
pouvant générer un stress oxydant.
Par ailleurs, la recherche de corrélation entre les
3.2.2. Cas de la Créatininémie et des transaminases
TBARS et les autres paramètres d'une part et entre ces
Les valeurs moyennes de la Créatininémie et
paramètres d'autres part, ne nous ont pas permis de
des transaminases (ASAT et ALAT) des lépreux sont
noter une corrélation significative.
.
significativement différentes de celles des témoins
mais ces valeurs restent comprises dans l'intervalle de
CONCLUSION
valeurs normales (Tableau Il). Cas de la triglycéridémie
Ce travail dont l'objectif était de déterminer le
niveau moyen de Iipopéroxydation (représenté par les
Latriglycéridémie des malades est significativement
TBARS) dans une population de malades Hanseniens
plus élevée que celle des témoins (Tableau Il ).
afin de préciser l'influence éventuelle et réciproque de
la lèpre et du stress oxydant nous a permis d'observer
Bien que cette valeur soit contenue dans les limites
que le taux moyen de TBARS était plus élevé chez les
des valeurs normales, il est à noter que les acides
malades Hanseniens que chez les témoins de l'étude
gras (surtout les AGPI) constituant des triglycérides
(2,'5 nmol/ml versus ',56 nmol/ml).
présentent une grande sensibilité à l'activité des
Ces résultats nous emmènent à écrire que dans la
radicaux libres.
maladie de HANSEN, des radicaux libres provoquent
un stress oxydant entretenu par la longévité du bacille
Il semble que les triglycérides soient impliqués
de HANSEN dans l'organisme du lépreux et par la prise
dans le processus de défense de l'organisme contre la
prolongée d'antibiotiques.
.
surproduction des formes radicalaires [03].
Par· ailleurs,
la
détermination
de
paramètres
3.3 TAUX DES TBARS
biochimiques(urémie,glycémie,choles~érolémietotale;.
Le niveau moyen de Iipoperoxydation représenté
triglycéridémie, transaminases) a montré l'absence de
par le tauxdes TBARS est significativement plus élevé
corrélation entre ceux-ci et les taux de'-rBARS et de se
chez les malades que chez les témoins ( p =0.0002)
,
rendre compte du bon suivi medibldesinillaçJés dé fa
.' .. lèpre à l'Institut RaouJ Follereaud'Adzopé: .,< "'!
.Eneffet,la pénétration de M.leprae dans l'orqanisme
induit une réaction inflammatoire au cours de laquelle·
REFERENCES' .
l'organisme produit des radicaux libres comme réaction
1 - AMES B.N., SHIGENAGA M.K., HAGENT.M. Oxidants, antioxidant
de défense [05].
.
and the degenerative deasesofaqinq. Proceedinq' of thenational
academy of sciences of the United State of America ; so. 7915-
7 9 2 2 . '
. .
. ..'
.
De plus, l'effet bactériostatique des antibiotiques
utilisés dans le traitement de la lèpre induit une
2 - ARUAMA 01' Free radicals.ioxidative stress, and 'antioxidants in
présence prolongée du .bacille de HAI\\JSEN dans
. human health and -desease. Journal of the American oil chrnists
society 1998,75,199-212.
'..
l'organisme du malade et par ce biais favorise .la
3- CRASTES de PAULETLeslipides membranaires :unecible privilégiée'
production de radicaux libres.
des radicaux libres. Nutrition et diététique; 1987; 22, 22-23
4
-
DE' LA
CHARRIERE. 0,
Vieillissement . cutané
: Aspects
Cette situation' peut être la cause d'une réponse
morphologiques et physiologiques. Encyclopédie de Med. Chir,
prolongée et du maintien de reactions radicalaires [03,
Dermatologie; 1987, 12235';1-8~"
. .
, "
.
07).
.
5 - DEBYC. La biochimie de l'oxygène.
La Recherche; 1991,22,56-63.
.6-JEAN LANGUILLON Précis delèproloqie.Pré-Presse-Pastelcréations,
Parailleurs les antibiotiques seraient impliqués dans
avril J999..';'0, .
.
l'apparition de formes radicalaires. Dès lors, leur prise
?~MAJ:< NEBAlJT.La,lu~te contre la lèpre enAfrique i~têrtropicaleXI.La
prolongée dans le cadré de la PCT, pourrait expliquer
.
.nouvelle thérapeutique de la.lèpre,les médicaments, 1 -25.
l'induction de formes radicalaires dans l'organisme
8- RABAÜD,è;TRONEL H; FREMONT5; MAYI. CANTON P; NICOLAS
des malades et donc y maintenir une Iipopéroxydation .
JP Radicaux libres et infection à i;IH~ Annales de biologie
significative [03]:
~", c1inique(ParisJ,1997,55,565-571.
9" SANSARRICQH. :la lèpre.Ellipses, 1995 .
. '.
Il n'existe pas dedifférence liée au sexe concernant ie
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degré de.lipopéroxydation.dans la lèpre(p = 0;9567).
. observations sur les principaux paramètres du stress oxydant
chez les drépancytaires homozygotes. Bull. Société de pathologies
exotiques; 1992, 85,174- 179.
Le sexe n'est donc pas un facteur influençant la
Remerciements particuliers aux Médecins, et personnels de l'institut
lipopéroxydation dans la maladie de HANSEN.
Raoul FolJereau d'Adzopé.
Rev. (AMES - Série A, Vol; 04,2006
43