ScœncesetMédedne
Répartition et évolution saisonnière des infections
microsporidiennes chez des larves de moustiques
de la Région de Dakar (Sénégal)
Karamoko DIARRA et Bhen Sikina TOGUEBAYE
Laboratoire de Parasitologie. Département de Biologie Animale.
Faculté Jes Sciences ct Techniques. Université Cheikh Anla Diop. Dakar. Sénégal.
Introduction
des différents stades de développement (Hazard et
Oldacre. 1975; Sprague, 1977, 1982; Weiser,
1977; Issi, 1986; Larsson, 1986; Canning, 1990).
Au cO:.Jrs de prospections menées dans la Région
Dans un précédant travail (Diarra, 1990; Diarra &
de Dakar (Sénégal), des microsporidies ont été
Toguebaye, 1991, 1992, 1994, 1997), nous avons
isolées chez différentes espèces de moustiques
déjà
décrit ces
espèces
en
microscopie
(Diptera, Culicidae). Les microsporidies sont des
électronique à transmission. Dans ce présent
Protozoaires parasites intracellulaires obligatoires.
travail, nous étudions la distribution spatiale et
Leur détermination est basée sur l'ultrastructure
l'évolution saisonnière des microsporidies décrites.
Matériel et méthode
débris végétaux. Elles sont ensuite aspirées à la
pipette et mises dans des tubes ou des flacons.
Une fois prélevées, les larves sont ramenées au
52 gîtes ont été prospectés au cours de notre
laboratoire où une partie est mise dans du
étude, de 1998 à 1999 (Tableau 1 et Fig. 1).
Lactophénol en vue d'une détermination et l'autre
Certains l'ont été systématiquement tous les mois
examinée pour la recherche des microsporidies
alors que d'autres ne l'ont été que très
parasites. Pour l'identification, on monte les larves
partiellement. Pour récolter et étudier les
entre lame et lamelle après avoir coupé l'abdomen
moustiques et leurs parasites, nous avons utilisé
à la jonction du 6ème et 7ème segment afin de voir
plusieurs techniques.
de profil les 8ème et 9ème segment. Les
préparations sont ensuite gardées dans du baume
1) Récolte et détermination
du Canada après éclaircissement à la potasse.
des moustiques
La détermination des moustiques se fait à la loupe
et au microscope photonique. Les objectifs
L'emploi du filet troubleau constitue le procédé le
suivants sont en général utilisés: 10, 20, 40, et un
plus simple et le plus rapide [Jour récolter les
100 à immersion à l'huile, ainsi que deux jeux
larves de moustique.
d'oculaires (x 8 et x 12,5). Un micromètre oculaire
Les larves et nymphes de moustiques en surface
et un micromètre objectif sont utilisés pour
sont recueillies soit à vue soit en fouillant dans les
étalonner les objectifs et faire les mensurations.
Rev. CAMES - Série A, vol. 02, 2003
63
Sciences et Médecine
Tableau 1 : Répartition des larves de moustiques dans les gîtes prospectés
Légende: ++ : abondants
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Figure 1: Localisation des gîtes prospectés dans Dakar-ville et sa banlieue
Rev. CAMES - Série A, vol. 02, 2003
64
Sciences et Médecine
2) Recherche des microsporidies
de propylène, avant d'être inclus dans l'Epon. Les
coupes sont ensuite réalisées à l'ultramicrotome
parasites des moustiques
Porter Blum MT1, puis contrastées à l'acétate
d'uranyle et le citrate de plomb. Elles sont ensuite
Cette méthodologie a déjà été décrite dans des
observées aux microscopes électroniques
travaux ultérieures (Diarra, 1990; Diarra &
Siemens Elmiskop 101 et Jeol1 00 CX II.
Toguebaye, 1991, 1992, 1997).
3) Analyse des résultats
Prélévement et mise en évidence
des microsporidies
Pour chaque gîte, le nombre des espèces de
moustiques
et
leurs
microsporidies
sont
La recherche des microsporidies s'est faite par
répertoriés.
dissection des larves vivantes. Des frottis frais ont
été réalisés et observés au microscope photonique
La fréquence de distribution (F=100N/52) est
à l'objectif x 40. Les spores de microsporidies
également estimée et notée pour chaque parasite
apparaissent réfringentes. Elles ont été mesurées
et chaque hôte. Elle nous a permis de distinguer
à l'aide d'un micromètre oculaire.
les espèces largement distribuées des espèces
très localisées. N= nombre de gîtes colonisés par
Techniques histologiques
les moustiques; 52= nombre de gîtes prospectés.
et cytologiques
Pour l'étude de l'évolution saisonnière des
microsporidies, deux gîtes sont retenus: les gîtes
a) Etude en microscopie photonique
n'1 et n'2.
des microspori dies
Résultats
Pour mettre
en
évidence
les
stades
de
développement des microsporidies, nous avons
a) Répartition des larves de
utilisé le coffret RAL qui permet une coloration
moustiques dans le gîtes
rapide. La lame séchée à l'air libre est passée
prospectés
dans trois solutions différentes:
Solution
Le tableau 1 donne la répartition des moustiques
1
:
méthanol
contenant
de
l'héxaméthylène pararosaniline pendant 1 mn,
dans les différents gîtes de la Région de Dakar.
puis rinçage;
L'analyse de la fréquence de répartition des
. Solution Il : 0,08 g d'éosine en solution aqueuse
espèces de moustiques dans les gîtes (Fig. 2,
tamponnée à pH 7 pendant 1 mn 30, puis
Tableau 1) montre que 75 % des gîtes prospectés
rinçage;
hébergent Culex quinquefasciatus. Le complexe
Anopheles gambiae a été trouvé dans 40 % des
- Solution III: 0,12 g de bleu de méthylène en
gîtes. Bien qu'il soit très rare de trouver Anopheles
solution aqueuse tamponnée à pH 7 pendant 2
gambiae dans des eaux usées, ce moustique a été
mn, puis rinçage.
isolé à Bel-Air (Gîte n012) dans des eaux très
Après le 3ème rinçage, la préparation est séchée
sales
hébergeant
également
Culex
puis observée.
quinquefasciatus et Culex tigripes. Culex tigripes a
été trouvé dans 35 % des gîtes. Il cohabite très
b) Etude en microscopie
souvent avec Culex quinquefasciatus puisqu'ils ont
en commun 34 % des gîtes. Culex decens a été
électronique à transmission
trouvé dans 15 % des gîtes associé à Culex
des microsporidies
quinquefasciatus (lorsque l'eau du gîte n'est pas
très sale). Dans les gîtes n° 24 et n° 49, nous
Des fragments de tissus parasités sont fixés 1h par
avons
trouvé
Aedes
aegypti
et
Culex
le glutaraldéhyde à 2,5 % dans le tampon de
quinquefasciatus. Enfin Culex tritaeniorhynchus et
cacodylate de sodium 0,1 M à pH 7,2 puis 1h par
Culex striatipes occupent respectivement 10 % et
le tétroxide d'osmium 1% dans le même tampon.
2 % des gîtes prospectés. Culex quinquefasciatus
Ils sont ensuite déshydratés par l'éthanol et l'oxyde
et Aedes aegypti occupent souvent des gîtes
Rev. CAMES· Série A, vol. 02, 2003
65
Sciences et Médecine
90
80
70
Fréquences (%)
60
50
40
30
20
10 .
0
1 1
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•
Figure 2 : Fréquences de la distribution des espèces de moustiques
(Nov. 1993 à ocL 1999)
moins stables (canaux à ciel ouvert, plans d'eaux
L'analyse de la fréquence de la répartition des
temporaires, récipients).
espèces de microsporidies (Fig. 3) dans les gîtes
montre que celles appartenant au genre
b) Répartition des microsporidies
Amblyospora sont les plus largement distribuées
par gîte
dans la Région dakaroise. En effet, sur 52 gîtes
prospectés, 8 hébergent des Amblyospora alors
Huit
espèces
de
microsporidies
ont
été
que Vavraia culicis, Microsporidium sp1 et
rencontrées chez des moustiques de la Région de
Microsporidium sp2 ne colonisent chacun qu'un
Dakar. Le tableau 2 montre que ces microsporidics
seul gîte (Tableau 2).
sont faiblement représentées. Seulement 15 %
Par ailleurs, la répartition de ces microsporidies
(8/52) des gîtes prospectés ont été trouvés positifs.
n'est pas liée à la distribution géographique de leur
hôte (Tableaux 1 et 2). Par exemple, Amblyospora
A l'intérieur d'un gîte, le nombre d'espèces
trouvées est variable. Certains gîtes (n° 1, n° 4,
culicis n'a été trouvée que dans 3 gîtes alors
n° 21, n° 50) n'ont hébergé qu'une seule espèce,
qu'elle
parasite
un
moustique
(Culex
quinquefasciatus) largement distribué dans la
d'autres deux espèces (n° 2, n° 14, n° 16) tandis
Région de Dakar (75 % des gîtes). C'est aussi le
que le gîte n° 17 a hébergé 3 espèces. Excepté
Vavraia culicis (qui a été trouvé dans 3 hôtes
cas des autres espèces de microsporidies
différents à l'intérieur du gîte n° 2), toutes les
trouvées.
espèces trouvées ne parasitent qu'un seul hôte.
Rev. CAMES - Série A, vol. 02, 2003
66
Sciences et Médecine
Tableau 2 : Répartition des Microsporidies par gîte
nO des gîtes
Microsporidies
Moustiques
1
Amblyospora tritaeniorhynchi
Cu/ex tritaeniorhynchus
Cu/ex decens
Vavraia cu/icis
Cu/ex striatives
2
Anovhe/es zambiae
Amb/vosvora sp
Cu/ex tizrives
4
Amb/vosvora cu/icis
Cu/ex quinque[asciatus
Amb/yospora dakarensis
14
Aiicrosporidium spi
Cu/ex tritaeniorhynchus
16
Amb/yospora cu/icis
Cu/ex quinquefasciatus
Amb/yospora sp
Cu/ex tizripes
Amb/yospora cu/icis
Cu/ex quinque[asciatus
17
Amb/yospora sp
Aiicrosvoridium sp2
Cu/ex tizrives
21
Amb/yosvora seneza/ensis
Cu/ex tha/assius
50
Amb/yospora tritaeniorhynchi
Cu/ex tritaeniorhynchus
•
Fréquences (%)
7
6
5
4
3
2
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Figure 3 : Fréquences de la distribution des espèces de microsporidies
(Nov, 1998 à ocl. 1999)
Rev, CAMES - Série A, vol. 02, 2003
67
Sciences et Médecine
14
350
12
300
10
250
8
200
6
150
4
100
2
50
o
-+---+--4--+---+----+0
Nov.
Déc.
Janv.
Fév.
Mars
Avr.
Mai
Juin
Juil.
Aoûl
Sepl.
Ocl.
-
Fréquences de V. culicis - . - Nombre de larves d'Anopneles gambiae
Figure 4 : Evolutions comparées de Vavraia cykucus et d'Anopheles gambiae dans le gîte n° 2
(Nov. 1998 à octobre 1999)
c) Évolution saisonnière de Vavraia
présente toute l'année dans le gîte n02. La
microsporidie y a été trouvée pendant 6 mois (De
culicis chez les larves d'Anopheles
novembre à décembre 1998 puis d'avril à juillet
gambiae
1999) avec un taux moyen de parasitisme de 4 %.
Vavraia culicis (Fig. 4) infecte de façon irrégulière
et très faiblement Anopheles gambiae s. 1. qui est
18
1400
16
1200
14
1000
12
800
10
8
600
6
400
4
200
2
o
o
Nov.
Déc.
Janv.
Fév.
Mars
Avr.
Mai
Juin
Juil.
Août
Sept.
Oct.
_
Fréquences d'A. tritaeniorhynchi
_ . -Nombre de larves de C. tritaeniorhynchus
Figure 5 : Evolutions comparées d'Amblyospora tritaeniorhynchi et de Culex tritaeniorhynchus dans le gîte n° 1
(Nov. 1998 à Oct. 1999)
Rev. CAMES - Série A, vol. 02, 2003
68
Sciences et Médecine
d) Évolution saisonnière
de disséminer les microsporidies dans les
nouvelles localités.
d'Amblyospora tritaeniorhynchi
Au cours de la transmission par voie orale, les
Amblyospora tritaeniorhynchi (Fig. 5) est très peu
larves de moustiques se contaminent en ingérant
répandu dans le gîte n01. Présente de novembre à
des Copépodes, hôtes intermédiaires morts, qui se
décembrè 1998, elle disparaît brusquement de
sont infectés en consommant des larves
janvier 1999 à octobre 1999.
parasitées mortes. Les spores formées dans les
larves ne sont pas infestantes pour les autres
Discussion
larves (SWEENEY et al., 1988 ; ANDREADIS,
1990, 1994 ; BECN EL, 1992). L'absence ou la
La présence du complexe A. gambiae dans des
faible présence de l'hôte intermédiaire dans le gîte
collections d'eau sale n'est pas un fait rare. Selon
constituent des facteurs qui peuvent limiter la
FAYE (1994) il existe pour ce moustique des gîtes
dissémination horizontale de ces microsporidies.
préférentiels et des gîtes inhabituels et la
colonisation des gîtes inhabituels n'est pas liée à
V. culicis, M. sp 1 et M. sp2 n'ont été rencontrées
l'absence des gîtes préférentiels. FAYE (1994) a
que dans un seul gîte alors que leurs hôtes
récolté des larves et des nymphes de ce
occupent de nombreux gîtes dans la Région de
moustique à Pout (Région de Thiès), dans des
Dakar. Les hôtes de ces microsporidies se
collections d'eau polluées (eaux de bain, de linge
contaminent au stade larvaire en ingérant les
et de vaisselle) en saison pluvieuse, période où de
spores libérées des larves et adultes morts. Les
nombreuses flaques d'eau de pluie contenaient
distances plus ou moins grandes entre les gîtes
aussi des larves de cette espèce.
peuvent limiter la dissémination des spores par les
individus adultes infectés et donc affaiblis.
Peu de gîtes hébergent des microsporidies dans la
Région de Dakar alors que tous les gîtes
Remerciements
prospectés hébergent au moins une espèce de
moustique. La faible fréquence de microsporidies
Ce travail a bénéficié d'un soutien financier (95-
dans la Région de Dakar peut s'expliquer par
108 RG/BIO/AF/AC) de l'Académie des Sciences
l'existence de facteurs limitant la dissémination des
du Tiers Monde (T'w.A.S).
spores des parasites. On peut citer par exemple
les modalités de transmission (et donc de
Bibliographie
dispersion) des parasites et les distances entre les
différents gîtes.
ANDREADIS, T. G. 1985. Experimental
Les microsporidies les plus fréquemment
transmission of a microsporidian pathogen from
rencontrées
dans
la
Région
de
Dakar
mosquitoes to an alternate copepod host.
appartiennent aux genres Amblyospora. Ces
Proceeding of Natural Academy of Sciences,
microsporidies ont un cycle de développement
USA. 82 : 5574-5577.
complexe et contaminent leurs hôtes moustiques
ANDREADIS, T. G. 1990. Epizoology of
par voies transovarienne et orale.
Amblyospora connecticus (Microsporida) in field
populations of saltmarsh mosquito, Aedes
Au cours de la transmission transovarienne, elles
cantator,
and
the
cyclopoid
copepod,
se développent dans les ovaires des femelles
Acanthcyclops
vernalis.
Journal
of
adultes et les oeufs infectés donnent des larves
Protozoology. 3: 174-182.
parasitées (HALL & LORD, 1982 ; ANDREADIS,
1985,1990; TOGUEBAYE & MARCHAND, 1985 ;
- ANDREADIS, T. G. 1994. Ultrastructural
SWEENEY et al. 1988; DICKSON & BARR, 1990 ;
characterization of meiospores of six new
LUKES & VAVRA, 1990; DARWISH & CANNING,
species of Amblyospora (Microsporida:
1991 ; BECNEL, 1992). Selon ANDREADIS
Amblyosporida) from nothern Aedes (Diptera:
(1985), cette voie, qui est pourtant la principale
Culicidae) mosquitoes. Journal of Eukaryotic
voie utilisée, est cependant incapable de maintenir
Microbiology. 41: 147-154.
l'infestation dans les populations de moustiques à
cause du faible taux de transmission. Cette voie
- BECNEL, J. J. 1992. Horizontal transmission and
permet donc aux femelles de moustiques infestés
subsequent development of Amblyospora
Rev. CAMES - Série A, vol. 02, 2003
69
Sciences et Médecine
ca/ifornica (Microsporida : Amblyosporidae) in
- FAYE, O. 1994. Le paludisme au Sénégal.
intermediate and definitive hosts. Diseases of
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Aquatic Organisms. 13: 17-28.
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Culex
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tritaeniorhynchus
(Diptera,
Culicidae):
Pathogénie, cycle de développement et
Ultrastructure of the octosporous phase of the
ultrastructure d'Amblyospora culicis n. sp.
life cycle with particular reference to unusual
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of Protozoology, 37 : 71-78.
308-320.
Rev. CAMES - Série A, vol. 02, 2003
70
Sciences et Médecine
'CD
52 gUes ont été prospectés dans la Région
1:)
Distribution and seasonal
E de Dakar (Sénégal). Les microsporidies du
~
f! prevalence of the microspo-
genre Amblyospora sont les plus largement
':C
~
distribuées dans ces gîtes. Cette répartition
ridian infections in'the
a:: n'est pas liée à la distribution géographique
ct
mosquitoes larvae from Dakar
de leurs hôtes. C'est le cas de Amblyospora
region (Sénégal)
culicis qui n'a été trouvée que dans 3 gîtes
alors qu'elle parasite un moustique, Culex
Studies carried out in 52 breeding places
quinquefasciatus, largement distribué dans
show that the microsporidia belonging to the
la Région de Dakar (75 % des gîtes).
genus Amblyospora are the most distributed
L'étude de l'évolution saisonnière des
in Dakar region. The distribution of these
infections a montré que Vavraia culicis
species is not linked to the geogrphical
infecte de façon irrégulière et très faiblement
distribution of their hosts. This is the case of
Anopheles gambiae, le moustique vecteur
Amblyospora culicis, parasite of Culex
du paludisme au Sénégal.
quinquefasciatus, widely distributed in Dakar
region (75 % of the breeding places), which
has been found in only 3 breeding places.
The study of the seasonal prevalence of
microsporidian infections shows that the
prevalence of infection due to Vavraia
culicis, in Anopheles gambiae, is irregular
and low.
Rev. CAMES - Série A, vol. 02, 2003
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